苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导EA.hy926细胞Bax表达的影响

目的 探讨苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(EA.hy926) Bax表达的影响.方法 苦荞麦总黄酮作用于高浓度软脂酸刺激下的EA.hy926细胞,RT-PCR技术检测Bax mRNA表达水平,免疫细胞化学方法检测Bax蛋白的表达情况.结果 与对照组相比,模型组细胞Bax mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组相比较,苦荞麦总黄酮组与二甲双胍组细胞Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.01);苦荞麦总黄酮组与二甲双胍组之间无显著差异(P＞0.05).结论 苦荞麦总黄酮可以降低EA.hy926细胞Bax基因及蛋白的表达,从而发挥抑制血管内皮凋亡的作用.     

软脂酸对酒精体外诱导的脂肪变性肝细胞的作用及机制

目的:探讨不同浓度的软脂酸对酒精体外诱导的脂肪变性肝细胞的作用及机制.方法:体外培养人正常肝细胞株L-02,设立空白对照组、酒精诱导组及软脂酸干预组.软脂酸干预组设6个浓度梯度(2.5、5、10、20、30、40μmol/L),空白对照组用正常培基培养96h,酒精诱导组和软脂酸干预组在细胞培养24h后加入终浓度为60mL/L的无水乙醇,继续培养24h后,软脂酸干预组加入各浓度软脂酸.采用MTT法测细胞增殖,油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,试剂盒检测细胞内三酰甘油的含量,Westernblot法测定细胞核内成熟的固醇调节元件结合蛋白-1c(nSREBP-1c)的含量.结果:60mL/L的无水乙醇培养L-02细胞72h成功建立了脂肪变性模型,软脂酸干预后,软脂酸浓度≤10μmol/L时,软脂酸明显地促进酒精诱导的脂肪变性肝细胞的增殖(P<0.05),并且明显地减轻细胞内脂滴的形成,减少细胞内三酰甘油的含量和细胞核内nSREBP-1c的含量,并呈现出剂量效应关系;而软脂酸浓度≥20μmol/L时,明显地抑制酒精诱导的脂肪变性肝细胞的增殖(P<0.05),并且加重细胞内脂滴的形成,增加细胞内三酰甘油和细胞核内nSR...     

胰高血糖素样肽-1对胰岛素抵抗肌细胞脂代谢相关基因表达的干预作用

目的:探讨胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,Glp-1)对胰岛素抵抗肌细胞模型的胰岛素敏感性和脂类代谢相关基因的影响。方法:分化成熟的肌小管细胞经软脂酸(palmitate,PA)诱导,建立胰岛素抵抗肌细胞模型。在此基础上,用药物Glp-1干预后,检测胰岛素抵抗指标的变化,并用real time PCR的方法检测脂类代谢相关基因的转录水平。结果:浓度为0.25 mmol.L-1的PA孵育成肌细胞C2C12 24 h后,细胞能被诱导成胰岛素抵抗状态。Glp-1干预后,葡萄糖消耗量和摄取率显著升高,细胞内脂类堆积明显减少。脂类合成相关基因Fas的mRNA水平在胰岛素抵抗细胞中显著上升,经Glp-1干预后表达量显著下降,而脂肪酸氧化分解的多个关键基因在胰岛素抵抗及Glp-1处理组中并没有呈现出一致的变化。结论:PA能够诱导分化成熟的C2C12细胞为胰岛素抵抗肌细胞。Glp-1药物能够增加胰岛素抵抗肌细胞的胰岛素敏感性,并能够通过调节脂类代谢基因的表达而改善细胞的脂类沉积状态。     

蜂房挥发油的提取、分析及生物活性的检测

目的 对蜂房挥发油组分的提取分析及生物活陛进行研究。方法 采取液质联用．气相色谱及细胞毒实验方法。结果 提取物中含有四特丁基焦儿荼酚、硬脂酸软脂酸等多种成分，并具有抑癌活性。结论 通过上述研究为蜂房的药用研究及开发奠定基础。     

仙鹤草根芽中新二氢黄酮醇甙的结构研究

从仙鹤草根芽的苯提取物和丙酮提取物中分得三个化合物。通过理化性质,波谱数据(UV,IR,NMR,MS,GD,GC),化学降解和衍生物制备,两个已知化合物分别鉴定为软脂酸(Ⅷ)和胡萝卜甙(Ⅸ),一个新化合物确定为(2S,3S)-(一)-花旗松素-3-O-β-D-葡萄吡喃糖甙(Ⅹ)。     

炒白芥子中化学成分的研究

目的 研究炒白芥子中的化学成分,为进一步明确其中的有效成分奠定基础.方法 采用溶剂法进行提取和萃取,采用色谱和重结晶等方法进行分离纯化,利用波谱法进行结构鉴定.结果 从炒白芥子中分离得到了10个化合物,分别鉴定为4-羟基苯乙酸-2'-醛基-5'-呋喃甲酯(Ⅰ)、对羟苯基乙腈(Ⅱ)、对羟基苯甲醛(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、软脂酸-1-单甘油酯(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)、芥子酸(Ⅶ)、对羟基苯甲酸(Ⅷ)、对羟基苯乙酸(Ⅸ)和双(5-甲酰基糠基)醚(X).结论 上述10个化合物均为首次从炒白芥子中分离得到,其中I为新化合物,命名为白芥子醛(sinaldehyde),化合物Ⅱ,Ⅴ,Ⅶ～X为首次从生白芥子中分离得到.     

软脂酸对人脐静脉内皮细胞PI3K/Akt表达的影响及六味地黄丸的干预作用

目的：研究软脂酸（palmitic acid,PA）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）PI3K/Akt表达的影响及六味地黄丸（liuweidihuang pill,LWDHP）含药血清的干预效应。方法：首先制备LWDHP含药血清,然后将培养的HUVEC作为研究对象,分为正常对照组,模型组,5% LWDHP含药血清治疗组,二甲双胍（metformin,MET）组,药物处理后采用RT-PCR及Western blot检测细胞内PI3K/Akt的mRNA和蛋白的表达。结果：RT-PCR结果显示模型组细胞的PI3K/Akt的mRNA表达量较正常对照组显著减少（PPI3K＝0.000,PAkt＝0.000）,5% LWDHP含药血清组（PPI3K＝0.012,PAkt＝0.000）及MET组（PPI3K＝0.000,PAkt＝0.000）细胞内的PI3K/Akt mRNA表达量较模型组增加,5% LWDHP含药血清组细胞内PI3K/Akt mRNA表达量与MET组比较有统计学意义（PPI3K＝0.000,PAkt＝0.000）。同时Western blot结果显示模型组细胞的PI3K/P-Akt的蛋白表达较正常对照组也显著减少（PPI3K＝0.000,PP-Akt＝0.000）,5% LWDHP含药血清组（PPI3K＝0.000,PP-Akt＝0.000）和MET组（PPI3K＝0.000,PP-Akt＝0.000）细胞内PI3K/ P-Akt蛋白表达量较模型组同样明显增加,5% LWDHP含药血清组细胞内PI3K/P-Akt 蛋白表达量与MET组比较有统计学意义（PPI3K＝0.003,PP-Akt＝0.001）。结论：LWDHP干预保护后可以促进PA诱导损伤的HUVEC内PI3K/Akt mRNA和蛋白的表达。     

软脂酸制备3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的方法

目的 用软脂酸(PA)诱导3T3-L1脂肪细胞,探讨用PA制备3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型的方法.方法 将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞,用油红O染色法鉴定细胞.用不同浓度的PA(0 mmol/L、0.25 mmol/L、0.5mmol/L、1.0 mmol/L)干预3T3-L1脂肪细胞24 h,收集各组细胞培养液,用葡萄糖氧化酶法测定各组细胞培养液葡萄糖的含量,观察PA对3T3-L1脂肪细胞糖摄取的影响.结果 0.25 mmol/L PA就可明显抑制成熟的3T3-L1脂肪细胞葡萄糖的摄取(P＜0.01),且呈浓度依赖性.与对照组相比,0.25 mmol/L PA组、0.5 mmol/L PA组、1.0 mmol/L PA组葡萄糖摄取率分别下降5.25％、10.29％、14.54％.结论 在胰岛素刺激下,0.25 mmol/L PA作用于3T3-L1脂肪细胞24 h就可诱导细胞产生IR,且随着浓度的增加其效果逐渐增强.     

儿茶素对软脂酸导致的大鼠原代肝细胞损伤的保护作用

目的 探讨儿茶素能否对软脂酸所导致的大鼠原代肝细胞毒性具有保护作用。方法 使用大鼠原代肝细胞分别与毒胡萝卜素和软脂酸以及儿茶素共孵育16 h后检测内质网应激相关蛋白GRP78、GRP94和CHOP,同时检测细胞凋亡和坏死。结果 软脂酸与毒胡萝卜素类似,均可使共孵育的大鼠原代肝细胞GRP78、GRP94和CHOP的水平升高,而儿茶素的加入可以减少细胞凋亡和坏死并显著减少这三种标志物的产生(P＜0.05)。结论 儿茶素可经由抑制内质网应激从而保护细胞不受软脂酸的毒性影响。     

蜂房抗肿瘤成分的提取及分析检测

目的确定蜂房抗肿瘤的有效成分.方法采用液质联用及气相色谱法,对蜂房提取物进行定性定量分析.结果提取物中含四特丁基焦儿茶酚、硬脂酸、软脂酸等多种成分.结论定量检测蜂房中软脂酸,为制药及临床检测应用奠定了基础.