NHH、NIF、TNHH 对大鼠实验性脑血肿治疗作用的比较研究

目的：探讨基因工程药物NHH、NIF、TNHH对大鼠实验性脑血肿的治疗作用。以期筛选出最佳的治疗药物。方法：用动物自身血脑内注射法建立大鼠实验脑血肿模型，24只大鼠随机分为NHH组、NIF组、TNHH组和模型组。用药组从尾静脉给NHH、NIF、TNHH，2mg／kg，bid，给药容积为1ml／kg，模型组给予相应容量的生理盐水。分别于术后4小时、12小时、24小时、48小时、72小时进行神经功能缺损体征评分，术后72小时采血测定血清AFTT,用干湿法测血肿边缘处脑组织含水量，     

海洛因成瘾复吸大鼠脑组织超微结构和部分神经递质的变化

目的：建立海洛因成瘾、脱毒，复成瘾、脱毒，再成瘾、脱毒3个阶段大白鼠模型，了解海洛因致各阶段大白鼠脑损害的动态趋势。方法：电镜下观察脑超微结构变化，荧光分光度法测定脑NA、DA、5-HT等神经递质的含量。结果：3个阶段大鼠脑内多部位神经元胞体、轴突、树突都出现变性、凋亡、胀亡等超微病理结构改变，神经胶质细胞、神经毯也出现相应的超微病理结构改变，而且随复吸次数增多而病变加重。脑NA、DA、5-HT、含量升高，而且随复吸次数增多而升高。结论：大白鼠脑组织出现广泛性超微病理结构改变，随复吸次数增多而病变加重，脑神经递质含量也随复吸次数增多而升高。     

神经导航中脑组织变形补偿的点云处理

有限元方法是解决神经导航中脑组织变形的重要方法,需要手术过程中的脑皮层信息作为其边界条件.本文通过非结构点云进行了脑皮层信息的表示,并通过对其进行处理来获取有限元方法的边界条件.点云处理包括纹理映射、分割、简化和去噪,其中非结构点云的简化与去噪采用了改进的基于表面特性k邻域的聚类方法.实验结果证明所采用的点云处理方法是可靠的.     

颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定

目的:研究颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定,为立体定向自体神经干细胞移植治疗脑出血、脑梗塞及颅脑损伤后遗症提供临床前基础。方法:通过改进原代培养方法,从颅脑手术患者废弃脑组织中培养和鉴定神经干细胞(NSCs)。收集颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织各约500 mg以上,按改良方法进行原代培养并传代,通过免疫荧光检测NSCs标志物巢蛋白(Nestin)的表达,传代培养5代时开始进行诱导分化。结果:培养约3～10 d后,多数患者废弃脑组织中均可见干细胞球生长,经Nestin免疫荧光检测均呈阳性表达。选取第6代诱导分化后的贴壁细胞分别经β-Tubulin(神经元标志物)、Sox10(少突胶质细胞标志物)与GFAP(星形胶质细胞标志物)免疫荧光检测,可见少量神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞阳性表达。取第3代与第6代细胞行免疫印迹鉴定,第3代细胞仅见Nestin与少量β-Tubulin表达,第6代细胞可见不同程度的Nestin、β-Tubulin、Sox10及GFAP等表达。结论:本研究成功从颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织中分离培养获得成人NSCs,并可向神经元及神经胶质细胞分化,使立体定向自体神经干细胞移植促进神经功能修复从实验室到临床应用成为可能。     

超声处理对羊瘙痒病脑组织中PrPSc聚集状态的影响

目的 研究超声处理对感染羊瘙痒症仓鼠脑组织中PrP^Sc聚集状态的影响，寻找产生PrP^Sc低聚体的条件。方法 裂解液制备脑组织提取物，用各种超声条件处理不同阶段的脑组织提取物；以蛋白酶消化后的Western blot方法和图象分析系统观测PrP^Sc蛋白的分布和聚集状态。结果 适当的超声处理(15s共30次)可增加脑组织匀浆上清中PrP^Sc含量1．29～1．58倍；同样条件下超声处理可明显增加羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量，而对正常对照仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量影响不大；对经常规高速离心获得的PrP^Sc的超声处理显示约90％的PrP^Sc存在于离心上清液中。结论 对感染动物脑组织进行超声处理可增加PrP^Sc的提取量，利于实验室检测。适当的超声处理可破碎大的相对分子质量的PrP^Sc聚集物，产生小的相对分子质量的PrP^Sc产物。     

不同浓度缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响

目的： 探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(HP extract)对PC12细胞缺氧耐受性的影响。方法: 复制小鼠急性重复缺氧模型，制备HP extract。在培养PC12细胞中加入HP extract使其终浓度分别为0.2、0.8、3.2、6.4、12.8 g/L(HP组)。以同浓度正常小鼠脑匀浆提取液(N extract)作为对照组(N组)。缺氧(2%O2) 培养24、48、72 h后, 采用四唑盐（MTT）比色法检测各组细胞活力 (A570值)并检测缺氧24、48、72 h乳酸脱氢酶（LDH）透出率、缺氧24 h早期凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测)、缺氧72 h晚期凋亡率(Hoechst33258染色荧光显微镜检测)。结果: HP extract浓度低于6.4 g/L(包括6.4 g/L), 缺氧培养24 h时, HP组A570值显著高于同浓度N组, 其 LDH透出率显著低于同浓度N组。随缺氧时间延长, 高浓度HP extract逐渐失去细胞保护作用。至72 h时浓度高于6.4 g/L(包括6.4 g/L)HP extract有促细胞凋亡作用, 此时HP组A570值显著低于同浓度N组, 其LDH透出率和晚期凋亡率均显著高于同浓度N组。结论: 缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响呈浓度依赖性和时间依赖性。     

脑脓肿的CT诊断

脑脓肿是化脓菌侵入脑组织引起的化脓性炎症及限局性脓肿。是脑组织占位性病变中较常见的一种。我院开展CT两年来,共做头部扫描5000余人,资料完整并经手术、病理证实的脑脓肿33例,现总结报告如下。     

宫内至断乳前持续被动吸烟幼鼠脑组织形态学研究

目的 建立宫内至断乳前持续被动吸烟幼鼠动物模型,检测被动吸烟致幼鼠脑损害是否存在凋亡形态学改变。方法 SD雌鼠于交配后第2天,入低、中、高3种香烟浓度的被动烟箱中,每日5h,待其自然分娩,幼鼠置与宫内相同香烟浓度的被动吸烟箱中,每日5h,至21d断乳,取幼鼠一侧大脑半球,进行光镜、电镜及凋亡特殊染色观察。结果 各被动吸烟组幼鼠香烟浓度增高脑细胞凋亡比例增加。结论 脑细胞凋亡比例增加是被动吸烟致幼鼠脑损害可能原因之一。     

丁香酚对致热家兔弓状核区脑组织中PGE2和cAMP含量的影响

目的：观察皮下注射丁香酚是否可引起弓状核组织中前列腺素E2（PGE2）和环磷酸腺苷（cAMP）含量的改变,以及两者的变化是否有相关关系,借此进一步探讨了香酚解热的中枢机制。方法：应用放射免疫技术测定应用内毒素及丁香酚后的家兔弓状核组织中PGE2和cAMP含量的变化。结果：在内毒素ET所致家兔明显发热的同时,弓状核组织中的PGE2和cAMP含量也明显升高,而丁香酚则显著地抑制了上述物质的升高反应,而且ET及丁香酚所引起的体温改变与弓状核中PGE2和cAMP的含量之间均存在着明显的量效关系。结论：丁香酚有明显的解热作用,可明显抑制ET性发热反应,且ET与丁香酚对体温的影响与弓状核区脑组织中PGE2和cAMP含量的升降存在明显的量效关系。     

基于Raf-MEK-ERK信号通路探究梓醇对蛛网膜下腔出血大鼠脑组织损伤的影响

[目的] 通过考察梓醇对蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠脑组织丝/苏氨酸蛋白激酶（Raf）-丝裂原活化蛋白激酶（MEK）-细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响,探讨其抗SAH脑损伤的作用机制。[方法] 将大鼠随机分为假手术组、SAH组、梓醇组、梓醇+U0126组（梓醇+Raf-MEK-ERK信号通路抑制剂U0126）。采用血管内穿孔法构建大鼠SAH模型,评估大鼠神经功能和SAH分级,伊文思蓝（EB）检测血脑屏障通透性,苏木素-伊红（HE）染色观察脑组织病理变化,免疫荧光染色检测神经元细胞凋亡及微管连接蛋白轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）、p-ERK阳性细胞表达,蛋白免疫印迹（Western blot）检测脑组织Raf、MEK、磷酸化（p）-MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、自噬基因Beclin-1、LC3-Ⅱ表达。[结果] 与假手术组相比,SAH组神经元细胞排列松散,数目减少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、原位末端标（TUNEL）阳性细胞数显著增加,凋亡率、LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达、Bax、Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达显著升高,神经功能评分减少,Bcl-2蛋白表达降低（P<0.05）;与SAH组相比,梓醇组神经元损伤明显减轻,细胞死亡较少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、TUNEL阳性细胞数显著减少,凋亡率、Bax显著降低,神经功能评分、Bcl-2表达升高,LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达及Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达进一步升高（P<0.05）;Raf-MEK-ERK通路抑制剂U0126可逆转梓醇对脑组织损伤的改善作用（P<0.05）。[结论] 梓醇可能通过激活Raf-MEK-ERK信号通路,促进神经细胞自噬,改善SAH大鼠脑损伤。