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重组逆转录病毒pLNCX2-GDNF转染许旺细胞及其表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 利用基因转染技术将胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因转入许旺细胞(SC)以提高其分泌该因子的水平。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法合成GDNFcD—NA片段,以逆转录病毒pLNCX2为载体导入许旺细胞内,并运用RT—PCR、免疫细胞化学染色、ELISA及运动神经元联合培养法检测外源性基因在mRNA和蛋白水平的表达及其产物的活性。结果 RT—PCR检测结果示GDNF—SCs表达GDNFmRNA的水平明显优于SCs;免疫细胞化学检测发现GDNF—SCs抗GDNF蛋白染色呈强阳性,正常SCs呈弱阳性;ELISA法检测结果示转染后4周GDNF—SCs分泌GD—NF蛋白的水平升至正常SCs的5.1倍;运动神经元联合培养法结果显示GDNF—SCs分泌的外源性基因产物具有生物学活性。结论 GDNF基因转染SC在mRNA和蛋白水平表达GDNF明显优于正常SCs,外源性基因表达产物具有神经生物学活性。 相似文献
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目的 评价脑胶质肉瘤的CT诊断价值。方法 回顾性分析5例经手术病理证实的脑胶质肉瘤的CT表现.并复习文献。结果 肿瘤均位于幕上,其中颞叶3例,额颞叶1例,枕顶叶1例。CT扫描4例为低等混杂密度,1例为稍高密度,增强扫描为不规则强化。边界清楚,4例周围有水肿,1例无周围水肿。结论脑胶质肉瘤少见,CT扫描能够清楚显示病变,但易与胶质母细胞瘤、转移瘤等相混淆,确诊依靠病理检查。 相似文献
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本文报告在硬膜外超声引导下脑组织活检病理证实为弥散性大脑神经胶质瘤病1例,并就该病的临床表现、CT所见、病理特征以及超声波引导下脑组织活检病理检查的方法扼要介绍,对该病早期诊断的可能性和准确性进行了讨论。 相似文献
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1病历摘要患者女性 ,16岁 ,学生。因反复头痛、呕吐两月余 ,步态不稳1周于2001年4月6日入院。体检 :神志清 ,对答切题 ,瞳孔等大 ,对光反射灵敏 ,颈软 ,指鼻试验阳性 ,闭目难立 ,蹒跚步态。实验室检查 :血粪尿常规及肝肾功能检查正常 ,脑脊液蛋白含量增高。CT检查 :小脑蚓部见3.0cm×2.5cm大小的肿块 ,密度略高。增强扫描肿块均匀强化 ,CT值较平扫高20Hu ,瘤周见一环状水肿带。第四脑室受压变形 ,第三脑室及两侧脑室增大。MR检查 :肿瘤边界清 ,位于小脑蚓部 ,突入第四脑室。肿瘤信号均匀 ,T1加权呈低信号 ,… 相似文献
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患者,女,32岁。偶然发现左肘窝有一肿物,无外伤史。查体:左肘前有一肿块约3×5cm,质硬,不移动,无明显压痛,局部皮肤颜色、皮温及感觉正常。肘部伸直正常,屈曲较健侧略受限。 X线检查:于左肘关节之前略偏外方显示1.5×2.5大小边缘不甚规则略呈分叶两团块状钙化阴影,肿块中有多数班点状、索条状钙化,正侧位片未见直接与骨相连接征象,桡骨头骨质未见破坏、增生及局部骨膜反应(图1、2)。 相似文献
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1病例介绍患者,男性,33岁,因左小腿隐痛进行性加重半年,周围软组织肿胀2个月,曾在外院治疗无效,于2004年12月17日入院。体检:左小腿胫骨远端局部触及肿块,大小为8.0cm×6.0cm×5.0cm,质硬,边界不清,固定,移动度差,局部有压痛,左踝关节背伸活动受限,背伸20°,跖屈35°。X线摄片正侧位片示:左小腿胫骨下段前内侧见一长径约为7.0cm的肿块影,密度不均匀,边缘不规整,内见成骨性团块影大小约为2.5cm×2.0cm5、.0cm×1.4cm,为成骨性组织,可见筛孔状溶骨性破坏,骨皮质中断缺损,2块成团性高密度影形成骨膜三角。CT检查示:左小腿胫骨下段前内侧见混… 相似文献
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目的:探讨视网膜母细胞瘤(Rb)的发生与Rb基因(Rb1)缺失、失活等异常的关系。方法:用逆转录病毒载体pDOR与全长4.7kb野生型Rb1cDNA构建逆转录病毒表达载体pDOR-Rb1+。用脂质体介导法将pDOR-Rb1+转入CRIP包装细胞系。结果:实验产生了0.5X105Cfu具有一次感染能力的重组逆转病毒。利用该病毒感染SO-Rb50,经G418筛选,获得了抗G418细胞群体。运用PCR及Southern杂交技术对转染细胞进行检测,结果表明该抗G418细胞中有完整的外源Rb1存在。Northern杂交发现其Rb1mRNA表达水平有所提高。对细胞群体生长速率、软琼脂集落形成能力的测定表明,外源Rb1的表达使SO-Rb50在软琼脂中集落形成能力降低,而群体生长速率无明显影响。结论:外源Rb1对SO-Rb50恶性表型有一定影响。 相似文献
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目的研究体外培养星形细胞牵张损伤后超微结构的变化。方法取新生1~2 d大鼠的皮层细胞原代培养,经纯化后传代培养于乳胶膜培养皿中。采用计算机控制的牵张损伤装置,分别以50、150、250 kPa压力牵张损伤培养于乳胶膜上的大鼠皮层星形胶质细胞。用3%戊二醛固定后,行扫描电镜和透射电镜观察。结果当用50 kPa驱动压力进行牵张损伤时,细胞结构即有明显破坏,表现为细胞间隙增宽,部分胞体和突起被撕裂;以50 kPa牵张损伤后1 h,透射电镜下可见线粒体肿胀、嵴减少;损伤后6 h可见线粒体致密、细胞器减少等。当牵张应力增大,星形细胞损伤程度加重,细胞器明显减少,线粒体空泡化,微丝、微管明显减少,直至水样胞质或致密胞体。结论较小的应力即可致星形细胞紧密连接的破坏和超微结构的改变,可能与脑外伤后产生广泛的脑水肿有关。 相似文献