γ1neo-hgp100基因的体外转染表达及体内免疫保护效应

肿瘤转移是一个复杂的、多步骤的、肿瘤细胞和宿主细胞相互作用的过程，是恶性肿瘤的重要生物学行为，往往是导致病人死亡的直接原因。随着分子生物学的发展，对肿瘤转移抑制的研究已进入分子水平，nm23基因即是近年来发现并被证实与多种肿瘤的转移有关的较新的肿瘤抑制基因，该基因可能通过影响细胞内微管的聚合／解聚和G蛋白介导的信号传导，而参与肿瘤的发生和发展。     

钙增敏剂的研究现状及应用

本世纪80年代初，在研究治疗充血性心力衰竭的新型强心药时，发现一类作用机制完全不同于传统强心药的药物，它不是通过增加心肌细胞内的钙离子浓度，而是通过增加细胞收缩蛋白对Ca抖的敏感性来增加心肌细胞的收缩力，这类药物称为钙增敏剂(calcium sensitizer)。近年来发现，钙增敏剂不仅在治疗心衰方面有着较好的应用前景，而且还有良好的抗休克以及调节外周血管反应性、改善器官组织血流量等作用。     

眼睛蛇毒心脏毒素对大鼠心肌细胞收缩及细胞内钙离子的作用

目的 研究眼睛蛇毒心脏毒素（Cardiotoxin，CTX）对心肌细胞的形态、收缩幅度和细胞内钙离子（[Ca^2＋]i）的作用。方法 应用荧光计量法（以Fura-2／AM为荧光染料）及光学成像系统来测定单个心肌细胞[Ca^2＋]i和收缩幅度。结果 0．001～1μmol／L的CTX使心肌细胞由杆状变成圆形，药物的作用从第1分钟时开始，到第20分钟时趋于稳定。在电刺激存在的情况下，1μmol／L的CTX最初导致电诱导的[Ca^2＋]i和收缩幅度瞬间增加，接下来[Ca^2＋]i时程延长，最终细胞对电刺激不敏感、突然收缩、[Ca^2＋]i持续增高。在缺乏电刺激的情况下，1μmol／L的CTX可诱导Ca^2＋震荡波、持续性[Ca^2＋]i增高，这种作用与40mmol／L的KCl和10mmol／L咖啡因所引起的[Ca^2＋]i瞬间增加不同。结论 CTX作用初期使[Ca^2＋]i增高，使细胞[Ca^2＋]。超载，同时伴随细胞形状的改变。     

萘哌地尔衍生物(BWYJ)对血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响

目的:观察萘哌地尔衍生物(BWYJ)对家兔血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响,对其血管活性进行机理探讨,进一步明确其作用机制。方法:采用钙荧光指示剂Fura-2/AM负载的培养家兔胸主动脉平滑肌细胞,观察该药对NA、5-HT和高钾所致的[Ca2 ]i的升高的影响。结果:Fura-2/AM负载血管平滑肌细胞的实验中,静息时各浓度的BWYJ对[Ca2 ]i无明显影响,但其对NA和5-HT所引起的血管平滑肌[Ca2 ]i增加均有明显的抑制作用,而不影响高钾所致血管平滑肌[Ca2 ]i的增加。结论:BWYJ通过阻断细胞膜上的α1受体或5-HT2A受体,抑制这些受体中介的钙内流,从而抑制细胞内Ca2 的释放,使血管平滑肌[Ca2 ]i降低。     

细胞内钙离子在高温诱导海马神经元凋亡中的作用机制

目的探讨Ca2+在高温诱导海马神经元凋亡中的作用,为丹曲林钠在热致脑损伤疾病中的应用提供实验依据。方法通过体外建立高温诱导原代培养的海马神经元凋亡模型,应用Ca2+特异性阻断剂丹曲林钠,观察其对神经元凋亡率、细胞内Ca2+荧光强度及其动态变化的影响。结果丹曲林钠能够明显降低高温处理后海马神经元的凋亡率;42℃处理并加入丹曲林钠组的扫描结果显示,Ca2+荧光强度为107.35±6.0,较正常培养的细胞内Ca2+荧光强度(159.12±33.8)明显降低,加入丹曲林钠20～25s后Ca2+浓度即开始下降,约50s后下降至最低值,然后稳定于低于原来基线的水平。结论丹曲林钠在高温诱导的海马神经细胞凋亡中具有重要的保护作用,在预防热致脑损伤疾病中具有一定的应用价值。     

p,p′-DDE对离体培养的大鼠睾丸支持细胞MAPK通路的影响

目的　研究p ,p′ DDE对离体培养大鼠睾丸支持细胞内信号转导通路的影响。方法　从大鼠睾丸组织中分离支持细胞进行离体原代培养 ,以SABC方法来检测细胞内p ERK的表达。结果　发现支持细胞细胞内p ERK随p,p′ DDE剂量的增高而染色加深 ,而且胞浆胞核都表达。结论　p ,p′ DDE可导致支持细胞内ERK磷酸化 ,诱导ERK下游通路的激活 ,从而影响到基因的转录和表达。     

CGRP对缺氧缺血新生鼠脑细胞内游离Ca2+的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧缺血新生鼠脑细胞内游离Ca2+的影响及对脑损伤的保护作用.方法 7日龄SD大鼠制成HIE模型.⑴药物治疗组于模型后即给CGRP 3μg*kg-1*d-1,腹腔内注射,共3d;⑵生理盐水组每天给予同剂量生理盐水腹腔内注射;⑶正常对照组(假手术组).各组于3d后断头取脑,采用钙荧光指标剂Fura-2AM法测定脑细胞胞浆游离钙浓度[(Ca2+)].结果生理盐水组脑细胞内钙含量最高,(129.47±17.21nmol/L)与正常对照组(93.72±24.16nmol/L)比较有显著差异P＜0.01,而药物治疗组(103.35±12.46nmol/L)与正常对照组比较无显著差异.结论 CGRP能阻止新生鼠缺氧缺血脑损伤后细胞钙内流,降低细胞膜对Ca2+通透性可能是CGRP对脑缺氧缺血保护作用的重要机制.     

阿魏酸对视网膜神经细胞内游离钙浓度变化的影响

目的研究阿魏酸(FA)对视网膜神经细胞内游离钙([Ca2 ]i)水平变化的影响。方法以胚胎7个月人视网膜,新生小牛视网膜和生后4个月小鼠视网膜为研究对象,检测FA作用后[Ca2 ]i水平变化。结果500μg/mLFA作用下,胚胎人组[Ca2 ]i荧光强度(基值为57.08±3.97)在10s内降至38.41±4.92,维持在38.41±4.92～43.45±3.29;新生小牛组[Ca2 ]i(基值为69.48±3.87)在20s内降至52.86±3.69,维持在49.75±3.82～54.39±4.04;成年小鼠组[Ca2 ]i(基值为71.54±3.73)在20s内降至54.91±3.57,维持在53.81±3.49～58.14±3.49,且发现胚胎人组[Ca2 ]i基值和受光照射后变化明显异于新生期小牛组和成年小鼠组。结论FA能有效降低视网膜神经细胞内游离钙水平,对于促进增殖和保护细胞具有重要作用。     

半乳糖对离体晶状体上皮细胞游离钙影响的实验研究

目的 观察高浓度半乳糖诱导正常离体晶状体上皮细胞中游离钙的变化以及钙离子阻滞剂维拉帕米对它的阻滞作用。方法 钙离子指示剂fluo-3与离体的正常品状体上皮细胞中游离钙螯合后，用激光扫描共聚焦显微镜观察35mmol／L半乳糖在不同条件下致细胞内荧光强度的变化。结果 35mmol半乳糖作用于离体品状体上皮细胞后可见细胞内与钙离子的荧光强度呈持续上升趋势，各个细胞上升的幅度及反应的速度有细微差别，但100s左右均出现上升趋势。先加2mg／mL的维拉帕米，2min后加半乳糖溶液至终浓度为35mmol，观察5min只见基本正常的钙波动，未见明显的钙上升或下降改变。结论 半乳糖溶液能致离体晶状体上皮细胞中游离钙升高，维拉帕米能有效地抑制此过程。     

谷胱甘肽对新生大鼠脑缺氧缺血脑细胞内钙和脂质过氧化影响的研究

为研究谷胱甘肽对缺氧缺血脑损伤引起的神经细胞保护的作用 ,利用新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型 ,通过检测新生大鼠脑细胞内游离钙、脑组织内超氧化物歧化酶 ( SOD)、丙二醛 ( MDA)探讨谷胱甘肽对缺血缺氧性脑损伤的影响。结果显示 ,谷胱甘肽(还原性 )预防可显著减少脑神经细胞内游离钙 ,但对脑组织内超氧化物歧化酶 ( SOD)、丙二醛 ( MDA)影响不大。提示谷胱甘肽可有效抑制缺氧缺血损伤引起的脑细胞内游离钙聚积 ,但不能影响 SOD和 MDA水平