Wg3h细胞系转染PSV_2-neo质粒前后生长特性及表面超微结构改变的研究

本文对转染PSV_2-neo质粒后的Wg3h细胞系(Wg3h-neo)在长期传代中的生长特性和表面超微结构与母系Wg3h细胞进行了比较研究。结果发现:转染后Wg3h细胞的DNA合成及生长速度明显高于母系Wg3h细胞,生长饱和密度增大。在软琼脂培养中不形成集落,接种在裸鼠不长肿瘤。在扫描电镜下,细胞表面的微绒毛较母系Wg3h细胞丰富。Southern印迹杂交实验证明PSV_2-neo质粒已整合到宿主细胞的基因组中。转染后Wg3h细胞的生长特性和表面超微结构均发生了某些转化特征。     

人SNCA基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的:构建含人野生型及致病突变A30P、A53TSNCA基因的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA,并通过稳定转染获得过表达人野生型及致病突变A30P、A53T α-synuclein(SNCA)的单克隆PC12细胞株.方法:通过RT-PCR方法扩增SNCA基因,T-A克隆后测序.在此基础上利用单核苷酸差异引物定点诱变法相继构建含SNCA基因编码区EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ两酶切位点的同义突变及其致病突变G88C(Ala30Pro)、G209A(Ala53Thr)的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA,并以PCR、双酶切、测序鉴定.以重组质粒pEGFP-C3-SNCA通过脂质体转染方法转染PC12细胞;以G418进行筛选;以有限稀释法进行亚克隆获得稳定过表达人野生型及致病突变A30P、A53T α-synuclein的单克隆PC12细胞株,并以稳定转染pEGFP-C3的PC12细胞作为对照组细胞,通过RT-PCR、Western blot及荧光显微镜鉴定各单克隆PC12细胞株.结果:PCR、酶切及测序证明重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA构建成功.RT-PCR、Western blot及荧光显微镜确认目的基因序列在PC12细胞稳定过表达.结论:成功地构建SNCA基因WT及A30P与A53T突变型的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA;成功获得过表达人野生型及致病突变A30P、A53T α-synuclein的单克隆PC12细胞株.     

琼脂石蜡双包埋切片在胸水细胞学诊断中的应用

目的探讨胸水琼脂石蜡双包埋切片在肿瘤细胞学诊断中的意义。方法对44例胸水沉淀物分别进行常规涂片和琼脂石蜡双包埋切片,并对琼脂石蜡双包埋切片进行免疫组织化学染色。结果在确诊的21例恶性胸水中,琼脂石蜡双包埋切片法检测癌细胞的阳性率为90.48%,显著高于涂片法52.38%。11例涂片法阳性的标本中,只有5例做出了病理分类诊断,而19例琼脂石蜡双包埋切片阳性的标本均做出了病理分类诊断。琼脂石蜡双包埋切片的免疫组织化学染色阳性结果定位准确,图象背景清晰。结论琼脂石蜡双包埋切片细胞集中,可以提高恶性胸水癌细胞的检出率和做出分型的病理诊断,利于以及进行免疫组织化学检测。     

国内首报染色体新核型46,XY/47,XY,+8病例分析

病例报告 患儿。男,2岁半,因发商迟缓,智了、f骶下姚诊。系0■胎足月颞产,生后轻度窒息,全身矗鱼鳞状黑皮,7—3个月脱掉,6—7个月时患过肺欠,t‘\_不会说话,只会喊爸爸妈妃,营养j}1等. 查体::q 84cm,体讯12.5kg,头同47cm,胸围45cm,方型颅,前后囱已闭,头发稀,鼍棕黄色,发际低,前额突出,耳大而低位,眼距宽,内眦赘皮,左眼上内斜,鼻根宽而不低,鼻孔外翻,青蛙嘴,口角轻上斜,腭弓高,上切牙呈月牙形破损,典型蹼颈,双手小捐内弯,两足2—3趾短,足底有类似猫爪的特殊皮肤纹理.反应差,任性,智力低下.心肺正常,肝肋下3 cm,脾未触及,右侧睾丸下降至阴囊,…     

神经系统特异性蛋白质在新生儿缺氧缺血性脑病中的诊断价值

目的 评价缺氧缺血性脑病（HIE）新生儿脑脊液（CSF）和血浆中神经元特异性稀醇化酶（NSE）、S-100蛋白（S-100protein,S-100)、髓鞘碱性蛋白（MBP）、肌酸磷酸激酶脑型同工酶（CK-BB）等党课 经系统特异性蛋白质与新生儿HIE程度及预后的关系。方法 新生儿HIE患儿55例,无中枢神经系统疾患的患儿16例作为对照,取CSF和血浆检测上述4种神经系统特异性蛋白质水平。NSE、S-100、MBP用放射免疫试剂盒检测,CK-BB用酶法及琼脂糖电泳法检测,存活出院的患儿定期随访。结果 CSF的NSE、S-100、MBP、CK-BB及血浆NSE、CK-BB均与HIE程度相关,但只有CSF的神经系统特异性蛋白质才能较准确地反映患儿的远期预后,其中敏感性、特异性最高的指标是NSE和S-100。结论 CSF的NSE和S-100是判断HIE患儿脑损伤程度、预测远期预后的可靠指标。     

亚稀褶红菇对大鼠致死毒性分级研究

目的 为了解亚稀褶红菇对大鼠的半数致死量（LD50）,进行毒性分级。方法 采用急性毒性试验经典方法寇氏法,设亚稀褶红菇175、248、350、495、700 mg/kgBW共 5个剂量组和阴性对照组(等体积生理盐水),每组大鼠12只,雌雄各半,腹腔注射,连续观察14 d大鼠的毒性反应和死亡情况。并对试验大鼠进行病理组织学检查。结果 根据试验结果,经计算,亚稀褶红菇对SD大鼠腹腔注射LD50为406 mg/kgBW,95%可信限为348～473 mg/kgBW。病理学检查显示大鼠心脏、肝脏、肾脏均有损害,随剂量增加损害程度加重。结论 按照大鼠急性毒性（LD50）剂量分级亚稀褶红菇为中等毒性,相当于人的致死量为5 g/人。     

魔芋精粉与几种常用膳食纤维降血脂效果比较及机理探讨

用含胆固醇1％、胆盐0.25％、猪油5％的高脂饲料喂饲健康雄性大鼠,诱发高脂血症的同时分别加入5％的魔芋精粉、果胶、褐藻胶及琼脂,观察此四种膳食纤维对大鼠生长、血清脂质含量、肝脏脂质含量及肝脏组织病理的不同影响,并通过测定粪中酸性固醇的排泄量来观察它们对胆汁酸代谢的影响。结果表明:1)四种膳食纤维均能有效地降低进食高脂膳食大鼠的空腹血清总胆固醇含量,对空腹血甘油三酯水平无影响;2)魔芋精粉能较其余三种膳食纤维更有效地降低肝脏组织脂质含量,包括胆固醇及甘油三酯。肝组织病理学检查亦显示魔芋精粉减轻肝脂变效果最佳;3)四种膳食纤维均能增加粪中胆汁酸尤其是鹅脱氧胆酸的排泄量,推测这可能是它们降低机体脂质的机理之一;4)四种膳食纤维在5％摄入水平对大鼠摄食及生长无不良影响。     

琼脂培养MTT法测定肺癌和卵巢癌药物敏感性的临床评价

目的 评价琼脂培养MTT法（简称MTT法）测定肿瘤细胞对化疗药物敏感性的临床应用价值。方法 应用人肿瘤干细胞集落形成能力测定（HTSCA）和MTT法同时对人肺癌细胞进行药物敏感性测定,并对结果进行共同相关性分析;同时,回顾性观察MTT法测定卵巢癌患者对顺氯氨铂（DDP）的体外敏感性与临床疗效关系;前瞻性观察通过MTT法测定药物敏感性结果指导临床选择有效药物对肺癌化疗效果的影响。结果 ①MTT比色法和HTSCA同时可供药敏分析的药物浓度次是126,两法测定结果的总符合率是92．8％（117／126）。②MTT法测定的卵巢癌细胞对DDP体外敏感性与临床疗效相关,总符合率是92％（24／26）。③MTT法药敏预测指导人肺癌化疗组临床有效率（91．2％）,较常规方案化疗组（53．3％）明显增高（P＜0．05）。结论 MTT法测定人实体瘤体外药物敏感性具有指导临床化疗的价值。     

稀碘伏液在阑尾切除术中的应用

急性阑尾炎是外科的常见急腹症之一 ,临床上大多数是以手术治疗为主 ,而术后切口感染率也相对较高 ,我们对急诊行阑尾切除术的患者常规采用稀碘伏液局部用药 ,取得了良好的效果 ,现报道如下。1　临床资料选择 1998年手术治疗化脓、坏疽及穿孔性阑尾炎 4 8例 ,应用生理盐水冲洗切口作为对照组 ,其切口感染率为 14 .2 %。2 0 0 0年后使用碘伏生理盐水稀释液 (含有效碘 0 .0 2 5 % )冲洗切口为观察组。如果阑尾穿孔并腹膜炎者应先用上液冲洗腹腔。共治疗化脓、坏疽及穿孔性阑尾炎患者 89例 ,切口感染率为 5 .1% ,经 χ2 检验 ,0 .0 2 5 >Ｐ >0 …     

茯苓多糖颗粒剂的研制及质量检测

以提取的茯苓多糖为主要原料,制成颗粒剂保健品,并拟定质检项目其进行定性、定量检测。工艺简单易行,具有较好的治疗、保健功效。