RP-HPLC测定清毒素胶囊中松香酸的含量

清毒素胶囊是以临床经验为基础,以药理活性筛选为向导,将中药松香通过提取、分离、精制制成的中药新制剂,用于治疗银屑病。松香为松科植物马尾松Pinus massonianaLamb.及其同属若干种植物树干中取得的油树脂经蒸馏除去挥发油后的遗留物,具有燥湿祛风,生肌止痛,杀虫之功效[1],临     

松香酸通过上调miR-30a-3p表达增强缺氧诱导的HUVECs血管生成

目的探讨松香酸对急性心肌梗死(AMI)后内皮细胞血管生成及迁移的作用与机制。方法在体外构建人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)细胞缺氧模型;通过Matrigel小管形成实验检测HUVECs的血管生成情况;Transwell及伤口愈合实验检测HUVECs的细胞迁移;Western blot检测血管内皮生成因子A(VEGFA)的表达情况;qRT-PCR检测miR-30a-3p的转录水平。结果成功构建细胞缺氧模型;Matrigel小管形成实验显示缺氧抑制HUVECs的血管生成及细胞迁移,而利用松香酸处理缺氧细胞后,可以促进其血管生成和细胞迁移;Western blot结果显示,松香酸能够促进VEGFA的表达;进一步利用qRT-PCR检测松香酸处理后细胞内miR-30a-3p水平,发现松香酸可明显提高miR-30a-3p水平,而在细胞内转染miR-30a-3p inhibitor后,松香酸促进HUVECs的血管生成和细胞迁移作用被抑制。结论松香酸可能通过调节miR-30a-3p的表达,增强HUVECs的血管生成与细胞迁移。     

HPLC测定枫香脂碱提物中脱氢松香酸和松香酸的含量

目的:建立用于测定枫香脂碱提物中脱氢松香酸和松香酸含量的HPLC方法.方法:采用C18柱;流动相乙腈-0.1％乙酸溶液(70∶30),流速1.0 mL·min-1,检测波长210,240 nm.结果:脱氢松香酸在0.4～3.4 μg,松香酸在0.6 ～4.8μg具有良好的线性;平均加样回收率分别为99.53％,101.9％.结论:所建立的方法简便、准确,可用于枫香脂的质量评价.     

国产沉香二萜类化合物研究(Ⅲ)

目的研究国产沉香Aquilariae Lignum Resinatum的小极性化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过NMR、MS等波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从国产沉香的石油醚提取物的中分离得到9个化合物,分别鉴定为18-降去氢松香酸-4α,7α-二醇(1)、18-降去氢松香酸-4α,7β-二醇(2)、7α-羟基去氢松香酸(3)、2α-羟基去氢松香酸(4)、2β-羟基去氢松香酸(5)、7α,15-二羟基去氢松香酸甲酯(6)、7-羰基-13β-羟基松香-8(14)-烯-18-羧酸(7)、2β-羟基海松酸(8)、3β-羟基海松醇(9)。结论化合物1~9均为首次从沉香属植物中分离得到的二萜类化合物,其中化合物1和2为降二萜类化合物,化合物3~9为二萜类化合物。     

松香酸通过诱导自噬减轻AGEs诱导的心肌H9c2细胞凋亡和内质网应激反应

目的:本文旨在探索松香酸(abietic acid,AA)对晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)诱导的心肌H9c2细胞凋亡和内质网应激的影响及其相关机制。方法:H9c2细胞分为5组:对照组加入生理盐水处理24 h;AGEs处理组加入AGEs(100 mg/L)处理24 h;AGEs+AA(10、25和50μmol/L)组同时加入AGEs(100 mg/L)和AA(10、25和50μmol/L)处理24 h。MTT法检测H9c2细胞活力。Western blot分析肌红蛋白(myoglobin,Mb)、肌酸激酶MB同工酶(creatine kinase MB isoenzyme,CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,c Tn I)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、cleaved caspase-12、GADD34、Bi P、LC3、P62和beclin 1的蛋白水平。ELISA检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性。流式细胞术分析细胞凋亡。结果:低浓度(低于50μmol/L)的松香酸对H9c2细胞活力无明显影响,高浓度(高于50μmol/L)的松香酸会降低H9c2细胞活力。AGEs组Mb、CK-MB和c Tn I蛋白表达及LDH的水平明显高于对照组(P0.05);与AGEs组相比,AGEs+AA(10、25和50μmol/L)组Mb、CK-MB和c Tn I的蛋白表达及LDH的表达水平明显降低(P0.05)。松香酸(10、25和50μmol/L)可抑制AGEs诱导的心肌细胞凋亡、CHOP和cleaved caspase-12蛋白水平的升高及GADD34和Bi P表达的降低(P0.05)。而且,松香酸(10、25和50μmol/L)可抑制AGEs诱导的心肌细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和beclin 1表达的降低及P62表达的升高(P0.05)。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤可逆转松香酸对心肌细胞LC3、Mb、cleaved caspase-12和Bi P蛋白水平的影响(P0.05)。结论:松香酸通过诱导自噬减轻AGEs诱导的心肌H9c2细胞凋亡和内质网应激反应。     

消肿片中松香酸的HPLC和UPLC-MS/MS检测方法研究

摘要：目的:建立消肿片中添加松香酸的HPLC和UPLC-MS/MS检测方法。方法:采用HPLC-DAD测定松香酸含量,色谱柱为SHISEIDO CAPCELL PAK C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为0.1%甲酸-乙腈-四氢呋喃（35:40:25）,流速:1.0 ml·min-1;检测波长:241nm;柱温:25℃;进样量:10μl。采用UPLC-MS/MS方法对松香酸进一步确认,色谱柱为Agilent Poroshell120 EC-C18（2.1mm×50mm,2.7μm）;流动相为0.1%甲酸-乙腈（30:70）;进样量1μl;流速0.2ml·min-1。离子化模式为ESI+扫描,毛细管电压3500V,毛细管出口电压175V,干燥气温度:300℃,干燥气流速:8L·min-1,雾化器压力:35psig,碰撞能量15ev;扫描范围100～1 000m/z。结果:松香酸的线性范围为4.068～406.8μg·ml-1,r=0.999 9,平均回收率为100.88%,RSD为0.92%（n=9）。UPLC-MS/MS确认样品的一级质谱、二级质谱均与松香酸对照品一致。结论:该方法简便、准确、重复性好,适用于消肿片中非法添加松香酸的检查。     

人参再造丸中非法添加松香酸的检查方法

摘 要 目的：建立人参再造丸中非法添加松香酸的HPLC检查方法。 方法: 采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈 0.1%甲酸（82∶18）为流动相等度洗脱,检测波长为241 nm（全波长扫描范围为190～400 nm）, 柱温为30 ℃,流速为1.0 ml·min-1,进样量为10 μl。通过比对供试品与对照品HPLC色谱及光谱,对人参再造丸中是否非法添加松香酸作定性分析,并利用超高效液相色谱 质谱（UPLC MS）联用技术对阳性检出样品进行验证。 结果: 本方法可检出松香酸,检出限为0.99 μg·g-1。 结论: 该方法简便快速、灵敏度高、准确可靠,可用于人参再造丸中非法添加松香酸的检查。     

根痛平胶囊中非法添加松香酸的补充检验方法研究

目的建立根痛平胶囊中非法添加松香酸的HPLC_PDA（二极管阵列检测器）检查法。方法选用Thermo SCIENTIFIC,AcclaimTM120,C18（5μm,4.6 mm×250 mm）色谱柱,二极管阵列检测器（PDA）,乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长241 nm（200～300 nm）。通过比对供试品与对照品HPLC色谱保留时间及其光谱图,对根痛平胶囊中是否非法添加松香酸进行定性定量分析。结果 13批根痛平胶囊样品中3批未检出,2批次检出量低于2.795 mg·g-1,8批检出松香酸,含量最高者达768.1 mg·g-1。结论此方法灵敏度高、准确性好,操作简单,可以用于根痛平胶囊中非法添加松香酸的定性定量检查。     

松香临床应用小议

松香又称松脂,为松科植物马尾松、油松或同属他种植的油树脂经除去挥发油后所留存的固体树脂。呈棕黄色,带松节油气味。性温,味苦、甘,有小毒。成份为松香酸酐和游离的松香酸,还含有少量的树脂烃、挥发油和微量的槲皮素、山柰甙及苦味物质。民间多为外用,治痈疖疮、湿疹、外伤出血、烧伤     

液质联用技术用于沉香中非法掺入含松香酸类物质的检测

目的 建立检测沉香中非法掺人含松香酸类物质的液质联用方法.方法 样品加乙醇进行超声后的提取液进行液质联用分析.色谱柱为Agilent zorbax SB-C18(5μm,4.6 nm×250 mm);流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(75:25);柱温30℃.采用ESI离子源,正离子方式检测.质量扫描范围m/z 50～500,干燥气(N2),体积流量8.0 L/min,干燥气温度325℃,雾化器压力35.0 psi.结果 通过对母离子(m/z 303.2),其二级质谱碎片(m/z 109.1,123.1,135.1,149.1,257.2,285.2)和液相色谱保留时间(18.1 min)3个方面信息与松香酸对照品以及沉香对照药材比较,证实4批不同产地的沉香样品中均掺入了含松香酸类的物质.结论 该方法快速灵敏可靠,可用于沉香药材中非法掺入含松香酸类物质的检测.