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991.
sTRAIL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
克隆TRAIL基因的95-281位(sTRAIL),构建表达载体,建立原核表达体系,优化诱导表达的条件。分离人外周血淋巴细胞,提取总RNA,RT-PCR,克隆sTRAIL的cDNA,构建原核表达载体,优化IPIG诱导的条件。结果:(1)克隆了TRAIL基因95-281位的cDNA,DNA测序结果与报道的一致。(2)构建了sTRAIL基因的原核表达载体,酶切结果与预期的一致。(3)转化宿主菌,优化IPIG诱导条件,发现3mmol/L,诱导3~4h表达最好。sTRAIL基因的克隆及表达为下游中试发酵及纯化奠定了上游的基础,也为研究TRAIL抗肿瘤的机制提供了可能。  相似文献   
992.
(His)6-Arg-Arg-人胰岛素原在大肠杆菌中的高效表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了提高胰岛素原的表达量,用pQE-40质粒构建了(His)6-Arg-Arg-人胰岛素原[(His)6-Arg-Arg- human Proinsulin,RRhPI]的大肠杆菌表达系统。通过培养条件的优化,在摇瓶培养的条件下,目标产物:RRhPI以包涵体形式获得了高效表达,每升培养基收获湿菌体约27g,包涵体6g(干重1.8g),RRhPI约540mg。该水平已超过现有文献报道的摇瓶培养的最高水平。  相似文献   
993.
对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及其突变体在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞、丝状真菌、昆虫细胞和转基因动物乳腺等表达系统中进行表达的研究工作情况进行了综述,并对各个表达系统的优缺点进行了比较。  相似文献   
994.
研究新鲜和冻存脐血中血小板(PLT)、血小板微粒(PMPs)含量的变化,以及它们对脐血CD34^ 造血干/祖细胞粘附分子表达的影响。测定冷冻前后,脐血中PLT、PMPs的含量,以及脐血CD34^ 细胞与PMPs孵育后粘附分子(CD41a,CD61,CD62P)的变化。结果,冻存脐血中PLT含量减少、PMPs含量增加;新鲜PMPs上调CD34^ 细胞粘附分子表达的作用比冻存PMPs强;脐血PLT经过深低温冷冻后仍然能被激发产生PMPs,并能上调CD34^ 细胞粘附分子表达。结果显示:我们可以用冻存的PLT来获得PMPs,以提高干细胞粘附分子表达。  相似文献   
995.
毛细支气管炎患儿HLA-DR及IL-4表达与IgE生成关系探讨   总被引:13,自引:0,他引:13  
为探讨毛细支气管炎患儿淋巴细胞HLA—DR和Thl/Th2细胞因子表达对IgE合成的影响,对58例RSV毛细支气管炎患儿及20例正常儿童,采用间接免疫荧光法检测外周血淋巴细胞HLA—DR表达;以IFN—γ代表Thl类细胞因子和IL4代表Th2类细胞因子,ELISA方法及多标记免疫分析系统测定血清IgE和IL-4及IFN—γ的表达水平。结果患儿组外周血淋巴细胞HLA—DR表达阳性率、IgE及IL-4表达均显著高于对照组,P分别<0.01、<0.05和<0.01;两组IFN—γ水平差异无显著性(P>0.1),而患儿组IL—4/IFN—γ水平则显著高于对照组(P<0.02);HLA-DR表达及IL—4水平与血清IgE水平之间密切相关(P<0.001)。提示RSV毛细支气管炎患儿Thl/Th2类细胞因子表达处于Th2强势状态,淋巴细胞HLA—DR和IL—4高表达使IgE合成增多,在毛细支气管炎的发病中起重要作用。  相似文献   
996.
目的 探讨喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)手术病理检查切缘翻译启动因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E)蛋白表达与预后的关系。方法选择1989年1月~1996年12月中山大学肿瘤防治中心喉鳞癌手术切缘病理检查没有发现癌细胞患者共67例,用免疫组化方法检测切缘与原发灶中eIF4E蛋白的表达,比较阳性及阴性表达两组患者的生存率。结果 喉鳞癌手术切缘和原发灶eIF4E表达阳性率分别是32.8%(22/67)和100.0%(67/67)。eIF4E切缘阳性组复发、转移和死亡14例(达63.6%),阴性组13例(占28.9%),差异有显著性(P=0.006);寿命表法统计两组的5年生存率分别为43.31%与77.52%,差异有显著性意义(P=0.0006)。结论 喉鳞癌手术切缘病理检查没有发现癌细胞而eIF4E蛋白表达阳性者预后较差。  相似文献   
997.
细胞增殖周期调控异常与肿瘤细胞的恶性增殖关系密切,细胞周期蛋白作为一种调节细胞周期活动的重要蛋白,与白血病的发生发展有一定关系,其中细胞周期蛋白A、B1、D、E与白血病关系较密切。对细胞周期蛋白在白血病中作用的研究,有助于判断预后,并可为多靶点治疗白血病提供理论依据及技术基础。  相似文献   
998.
目的 :用荧光标记 m RNA差异显示方法研究抗纤维化中药作用于肝星状细胞过程中基因表达的变化。方法 :分离培养肝星状细胞 (HSC) ,分别由正常大鼠血清和中药大鼠血清处理 HSC,用荧光标记 m RNA差异显示方法分离中药血清抑制或者诱导 HSC表达的特异基因。结果 :用荧光标记 m RNA差异显示方法共分离得到 c DNA差异片段 4 5条。结论 :荧光标记 m RNA差异显示方法是一种快速、敏感、经济有效的筛查中药治疗某种疾病后相关基因表达的方法  相似文献   
999.
目的 研究电针对大鼠下丘脑孤啡肽表达的影响。方法 应用免疫组化ABC法观察大鼠下丘脑孤啡肽变化;应用RT-PCR技术观察大鼠孤啡肽前体mRNA的变化。结果 电针可以上调去卵巢大鼠下丘脑孤啡肽免疫阳性细胞数,去卵巢大鼠下丘脑孤啡肽前体mRNA含量在电针前后变化不大。结论 电针可以影响去卵巢大鼠下丘脑孤啡肽表达。  相似文献   
1000.
阳离子抗菌肽研究进展   总被引:8,自引:0,他引:8  
阳离子抗菌肽广泛分布于多种生物 ,越来越多的证据表明它们在机体天然免疫中有着重要的作用。广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤细胞及其它特性也使得其具有潜在的医药价值。对抗菌肽的研究正不断深入。该文从一般性质、作用机制、构效关系、重组表达、应用价值、存在的问题与发展方向等方面 ,对阳离子抗菌肽的最新研究进展进行综述  相似文献   
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