托珠单抗在新型冠状病毒肺炎的应用研究探讨

2019年12月以来,新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)在武汉暴发并蔓延至全国,给整个社会带来巨大的挑战。部分COVID-19感染者早期发病并不十分凶险,但后期会突然加速进展,病人很快进入多脏器功能衰竭的状态,李兰娟院士等提出了"细胞因子风暴"概念。但目前并没有特效药物,认为IL-6是诱发细胞因子风暴的重要通路,本文结合相关文献的复习和分析,旨在综述IL-6受体阻断剂托珠单抗在新型冠状病毒肺炎危重患者使用的可行性。     

Immunogenicity of the hepatitis A vaccine 20 years after infant immunization

To determine the duration of immunity provided by the Hepatitis A vaccination (HepA), we evaluated a cohort of participants in Alaska 20 years after being immunized as infants. At recruitment, participants received two doses of inactivated HepA vaccine on one of three schedules. We conducted hepatitis A antibody (anti-HAV) testing for participants at the 20-year time-point. Seventy-five of the original 183 participants (41%) were available for follow-up. The overall anti-HAV geometric mean concentration was 29.9 mIU/mL (95% CI 22.4 mIU/mL, 39.7 mIU/mL) and 50 participants (68%) remained seropositive (titer ≥ 20 mIU/mL). Using a fractional polynomial model, the predicted percent seropositive at 25 years was 55.3%, 49.8% at 30 years and 45.7% at 35 years, suggesting that the percent sero-positive could drop below 50% earlier than previously expected. Further research is necessary to understand if protection continues after seropositivity diminishes or if a HepA booster dose may become necessary.     

Bishonokiol A Induces Multiple Cell Death in Human Breast Cancer MCF-7 Cells

Objective: A dimeric neolignan, bishonokiol A (BHNKA) isolated from Magnolia grandiflora, significantly inhibits the proliferation of human breast cancer cells. However, the exact mechanism of BHNKA induced breast cancer cell death is unknown. In this study, we investigated the pharmacological mechanism underlying BHNKA induced MCF-7 cell death. Methods: Cell viability measurement was performed by the MTT assay. Flow cytometry with PI staining, DAPI staining, and electron microscopy were used to analyze cellular death modes. In addition, western blotting, siRNA transfection, ATP assay, and fluorescence microscopy were used to determine the mechanism of BHNKA induced MCF-7 cell death. Results: BHNKA induced cell death by apoptosis, necroptosis and autophagy at the same concentration and time in MCF-7 cells, and electron microscopy confirmed these results. The mechanism of BHNKA triggered apoptosis and autophagy in MCF-7 cells was primarily due to an increase in the Bax/Bcl-2 ratio and simultaneous up-regulation of LC3-II protein expression, respectively. BHNKA induced necroptosis by activation of the RIP1-RIP3-MLKL necroptosis cascade, up-regulation of cyclophilin D (CypD) protein expression to stimulate ROS generation. We further demonstrated that siRNA-mediated down-regulation of CypD protected against BHNKA induced cell death. Conclusions: These results suggest that BHNKA may be a potential lead compound for development as an anti-breast cancer agent for induction of multiple cell death pathways.     

华细辛和北细辛HPLC特征图谱识别与抗炎靶点及抗炎成分分析

建立华细辛和北细辛HPLC特征图谱并结合聚类分析研究2种来源细辛的识别方法;应用网络药理学方法预测细辛潜在抗炎靶点并寻找潜在抗炎成分。对89批细辛药材(12批华细辛和77批北细辛)的数据进行分析确定了11个特征峰,用对照品、紫外光谱和LC-MS指认了11个特征成分。特征峰面积聚类分析显示华细辛和北细辛被分为2类,且利用特征峰面积比值可实现两者区分,当特征峰9(细辛素)/参照峰S(卡枯醇)峰面积比值大于5时为华细辛,小于2时为北细辛。对119种细辛成分进行网络药理学分析的结果表明细辛抗炎作用可能与COX-2,COX-1,iNOS,MAPK14,LAT4H,NR3C1,PPARG和TNF等8个靶点相关,其中COX-2最为关键,与5种特征成分细辛脂素、芝麻脂素、细辛素、甲基丁香酚和黄樟醚均存在相互作用。此外,细辛脂素、芝麻脂素与iNOS,MAPK14也存在相互作用关系,黄樟醚和细辛素可作用于iNOS,COX-1,LAT4H,甲基丁香酚可作用于COX-1,LAT4H。细辛脂素与芝麻脂素均可作用在COX-2,iNOS和MAPK143个靶点上,提示它们是细辛发挥抗炎作用的活性成分;COX-2分子对接结果和COX-2活性实验结果验证了细辛脂素、芝麻脂素可抑制COX-2活性,为细辛抗炎作用活性成分。基于HPLC特征图谱的华细辛和北细辛识别方法简便易行;预测到的细辛抗炎靶点和抗炎成分为完善细辛质量评价体系奠定了基础。     

AKR7A3在肺腺癌中异常表达及临床意义

目的:探讨醛-酮还原酶家族7成员A3（AKR7A3）在肺腺癌中的异常表达及与临床病理特征的关系，并探究其临床意义。方法:采用生物信息学数据库分析、免疫组化、Western Blot、Real-time PCR等方法对肺腺癌组织及不同细胞中AKR7A3的表达进行检测与分析。结果:Oncomine数据库分析结果显示，在肺腺癌中，AKR7A3的表达普遍高于正常肺组织，分别为正常肺组织的1.811倍（P=0.022）、1.356倍（P<0.01）、1.413倍（P=0.002）。Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果显示，AKR7A3高表达的患者较低表达的患者生存时间缩短，差异具有统计学意义（P=0.003 7）。免疫组化染色显示肺腺癌组织中AKR7A3的表达较癌旁增高，在与临床病理特征的相关性分析中，发现其与肿瘤分化程度（P<0.01）、淋巴结转移情况（P=0.029）以及TNM分期（P<0.01）相关，且会造成患者生存时间缩短（P=0.031）。Cox多因素分析表明AKR7A3可能是影响肺腺癌患者预后的独立危险因素(P=0.012)。Western Blot及Real-time PCR实验提示不同肺腺癌细胞中AKR7A3蛋白及mRNA表达普遍增高。结论:AKR7A3在肺腺癌中表达增高，对预后有不良影响，有促进肿瘤发生发展的作用。     

脂蛋白相关磷脂酶A2、胰岛素样生长因子-1与老年VD患者认知功能的关系及预测价值研究

目的 探讨脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）与老年血管性痴呆（VD）患者认知功能的关系及预测价值。方法 选择2019 年3～6 月在我院接受治疗的VD 患者60 例为研究对象，同时选取同期在我院接受检查的健康者60 例为对照组，比较两组患者的Lp-PLA2、IGF-1、简易智力状态检查量表评分（MMSE）水平；采用Pearson 相关性分析法对Lp-PLA2、IGF-1 与MMSE 评分的相关性进行分析；采用受试者工作曲线（ROC）下面积（AUC）比较Lp-PLA2、IGF-1 对VD 的预测价值。结果 观察组患者的Lp-PLA2 水平明显高于对照组（P＜0.05），观察组患者的IGF-1、MMSE 评分明显低于对照组（P＜0.05）；Lp-PLA2 与MMSE 评分呈负相关性，IGF-1 与MMSE 评分呈正相关性；Lp-PLA2 与IGF-1 诊断VD 的AUC 值分别为0.940、0.954。结论Lp-PLA2 水平越低，IGF-1 水平越高，患者的认知功能越好，且Lp-PLA2、IGF-1 对老年VD 患者均具有较高的预测价值。     

Same-Day Repeat Hepatopulmonary Shunt Measurement during Planning Angiography for Hepatic Radioembolization

This report describes a technique for measuring lung shunt fraction (LSF) twice in a single session during planning arteriography for radioembolization using low and standard dose technetium-99m macroaggregated albumin (^99mTc-MAA). A patient with a 16.0 cm hepatocellular carcinoma and LSF of 70% was treated with lenvatinib for 4 weeks. Planning arteriography with administration of 0.5 millicuries of ^99mTc-MAA was then performed. Arterial access was maintained while the LSF was calculated, which was persistently elevated at 54%. Embolization of arteriovenous shunts was performed during the same session and 5.0 millicuries of ^99mTc-MAA were administered. The repeat LSF was 29%. Successful radioembolization was subsequently performed.     

真武汤合苓桂术甘汤改善心肾综合征大鼠模型水钠潴留的作用机制研究

[目的]研究真武汤合苓桂术甘汤对心肾综合征大鼠模型水钠潴留的作用机制。[方法]将60只雄性SD大鼠随机分为两组,即空白组与手术组,空白组大鼠常规饲养,手术组大鼠经5/6肾切除联合异丙肾上腺素皮下注射制备心肾综合征模型,剔除死亡大鼠后,将手术组剩余成模大鼠按体质量分层随机分为空白组、中药组、常规治疗组。中药组给予真武汤合苓桂术甘汤灌胃,给药量为7.29 g生药/(kg·d);常规治疗组给予贝那普利(0.45 mg/kg)+呋塞米(1.8m g/kg);空白组予以等容积生理盐水灌胃,每日1次,连续6周。观察实验过程中各组大鼠的精神状态、活动情况、灵敏度、毛发情况、食欲、大小便等一般情况及死亡情况,比较各组灌胃前、灌胃6周后的血清脑钠肽(BNP)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿水通道蛋白2(AQP2)的前后差值情况。[结果]灌胃6周后,中药组大鼠一般情况较灌胃前改善、喘息不明显,常规治疗组一般情况同样较灌胃前改善。通过比较治疗前后各组大鼠实验室指标差值发现,中药组与常规治疗组BNP均下降,中药改善大鼠心力衰竭情况接近常规治疗组水平,两组下降水平无统计学差异(P0.05);中药组Scr水平较前下降,常规治疗组Scr水平升高;中药组尿AQP2水平较前略增高,与空白组尿AQP2水平无统计学差异(P0.05),常规治疗组尿AQP2水平较前明显升高。[结论]心肾综合征大鼠尿AQP2的表达主要由肾脏调控,AQP2可作为心肾综合征水钠潴留状态的参考指标,真武汤合苓桂术甘汤改善心肾综合征大鼠水钠潴留状态的作用机制可能是通过抑制大鼠肾脏AQP2过度表达,减少水的重吸收,改善了水钠潴留状态。     

妊娠早期糖化血红蛋白联合PAPP-A对妊娠期糖尿病的预测意义

目的:探讨妊娠早期血清学指标糖化血红蛋白(glycohemoglobin,HbA1c)联合妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy-associated plasma protein A,PAPP-A)对妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的预测意义。方法:随机选取2018年12月1日-2019年7月30日孕11~13+6周于我院门诊产检的妊娠妇女,进行临床资料采集并记录妊娠早期(11~13+6周)空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、HbA1c、PAPP-A中位数倍数(multiple of the median,MoM)水平,根据孕24~28周进行的75 g口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)结果将研究对象分为研究组和对照组,统计分析妊娠早期血清学指标预测GDM的最佳截断值并得出最适宜的联合预测方案。结果:多因素Logistic回归分析显示,高水平FPG和HbA1c、低水平PAPP-A、受孕方式采用辅助生殖技术、有家族糖尿病史以及妊娠早期体质量指数(BMI)为超重或肥胖均是GDM发生的独立危险因素。有糖尿病家族史和使用辅助生殖技术受孕发生GDM的风险显著增高(OR分别为7.206和47.512,均P<0.001)。分析不同预测指标的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线及曲线下面积(area under the curve,AUC)显示,PAPP-A MoM联合HbA1c及FPG诊断时AUC最大(0.728),其后依次为PAPPA MoM联合HbA1c(0.721)、HbA1c联合FPG(0.717),均大于HbA1c(0.707)和FPG(0.647),而PAPP-A MoM的AUC为0.380,对GDM没有诊断意义。结论:具有高风险因素的孕妇,推荐在妊娠早期联合检测HbA1c与PAPPA MoM,以早期预测GDM。     

羌活中的香豆素类成分及其抑制脂多糖诱导的RAW 264.7细胞NO生成活性的研究

目的研究羌活Notopterygium incisum的香豆素类成分及其抗炎活性。方法采用硅胶、HPLC等柱色谱方法进行分离纯化,通过质谱、核磁共振波谱数据鉴定化合物的结构;采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7炎症反应模型,考察羌活中香豆素类成分对炎症反应模型一氧化氮(NO)生成的影响。结果从羌活甲醇提取物分离得到24个香豆素类化合物,分别鉴定为异欧前胡素(1)、川白芷素(2)、补骨脂素(3)、香柑内酯(4)、茵陈素(5)、欧芹酚(6)、5-去氢羌活醇(7)、环氧脱水羌活醇(8)、7″-O-甲基异羌活醇(9)、佛手柑素(10)、7-异戊烯氧基-6-甲氧基-香豆素(11)、栓翅芹烯醇(12)、羌活醇(13)、去甲呋喃羽叶芸香素(14)、异羌活醇(15)、蛇床夫内酯(16)、6-异戊烯氧基伞形花内酯(17)、紫花前胡苷元(18)、异虎耳草素(19)、紫花前胡苷(20)、前胡苷V(21)、前胡苷I(22)、印枳苷元-11-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(23)、羌活苷(24)。化合物7～10、13和15抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞NO生成活性最强,最大半数抑制浓度(IC_(50))值为8.50～35.12μmol/L。结论化合物7为新的天然产物,化合物17为首次从羌活中分离得到;C-5位上具有多烯烃结构的香豆素抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞NO生成活性较强。