Innate Immunity and Organ Transplantation: The Potential Role of Toll-like Receptors

Traditionally, the recognition and tolerance of transplanted grafts has been considered to be within the realm of the adaptive immune system. Innate immunity, on the other hand, as the first line of host defense, plays a role in fighting against invading microorganisms. Recently, with the discovery of the Toll-like receptors (TLRs), the role of innate immune responses in the control of adaptive immunity has become a new area of interest. Emerging evidence suggests that in addition to responding to pathogen-associated molecular patterns of microorganisms, TLRs can be activated by endogenous ligands, expressed by mammalian cells. These 'danger signals' may participate in ischemia-reperfusion related organ damage and subsequently influence function and survival of transplanted grafts. Furthermore, it has been suggested that adaptive immune responses can enhance the acute inflammatory responses controlled by innate immunity in organ transplantation. This review addresses the potential involvement of TLRs in different stages of organ transplantation. Intriguing and controversial findings are presented and discussed in order to stimulate more attention to this emerging and potentially important area of research in organ transplantation.     

氟比洛芬酯对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨氟比洛芬酯(FA)对脑缺血-再灌注(I-R)损伤的保护作用.方法 40只雄性SD大鼠,随机均分为五组,即A组(I-R)、B组(I-R FA5 mg/kg)、C组(I-R FA 10 mg/kg)、D组(I-R FA 20 mg/kg)和E组(脂微球对照组).采用颈内动脉丝线栓塞致大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,再灌注后24、48、72 h观察神经功能缺损评分(NDS评分)并于72 h后处死动物,取大脑切片行10 g/L 2,3,5-氯化三苯四唑(TTC)染色,测量并计算脑梗死容积百分比.结果 72 hNDS评分:B、C、D组明显高于A、E组(P<0.05);梗死容积百分比,B、C、D组明显低于A、E组(P<0.01),B、C、D组间24、48、72 h NDS评分差异无统计学意义;梗死容积百分比B组明显高于C、D组(P<0.05).结论 FA可明显减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤.     

肌病肾病代谢综合征治疗进展

肌病肾病代谢综合征是急性动脉阻塞致骨骼肌溶解的严重并发症。积极治疗原发病，及早补液扩容、碱化尿液、早期血液净化治疗是降低截肢率、病死率的关键。本文就肌病肾病代谢综合征治疗进展作一综述。     

Activated Protein C Reduces Graft Neutrophil Activation in Clinical Renal Transplantation

We studied the role of endogenous activated protein C (APC), the major physiological anti-coagulant with concomitant anti-inflammatory properties, on ischemia/reperfusion (I/R) in 45 patients participating in a larger trial comparing three immunosuppressive protocols in cadaveric renal transplantation: perioperative anti-thymocyte globulin (ATG, Fresenius AG, Bad Homburg, Germany), perioperative basiliximab and conventional triple therapy. Blood samples for assessing plasma APC, protein C, and lactoferrin concentrations, neutrophil CD11b and L-selectin expressions and blood leukocyte differential counts were obtained preoperatively and before reperfusion from central venous cannula, complemented with simultaneous samples from iliac artery and graft vein for calculation of transrenal differences (Delta) of study parameters at 1 and 5 min after reperfusion. Unlike basiliximab or conventional therapy groups, ATG infusion induced a substantial increase in plasma APC concentration (119 [88-144]% before infusion vs. 232 [85-1246]% after infusion, p<0.001), resulting in renal graft sequestration of APC at 1 min after reperfusion (Delta=-72 [-567 to 12]%, p<0.001). Graft APC consumption was associated with transrenal reduction of neutrophil activation markers (L-selectin r=0.7, p=0.01; lactoferrin r=-0.6, p=0.02; CD11b r=-0.8, p=0.001), and with both warm (r=0.6, p=0.01) and cold ischemia time (r=0.6, p=0.02) and donor age (r=0.6, p=0.01). These findings suggest that APC has an anti-inflammatory role in I/R injury in clinical renal transplantation.     

丹参对大鼠肝细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 :探讨丹参对大鼠肝脏缺血再灌注时肝细胞凋亡及相关基因 (Bcl-2和 Bax)表达的作用。方法 :SD大鼠随机分为假手术 (SO)组、缺血再灌注 (IP)组及丹参 (SM)治疗组 ,并根据再灌注不同时间点再分为 7个亚组。后 2组缺血时间均为 30 min。分别于再灌注 0、1、6、12、2 4、48、72 h后采取肝脏组织标本。分别采用原位末端标记 (TU NEL)技术和免疫组化 ,检测大鼠肝组织细胞凋亡及 Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果 :缺血再灌注组细胞凋亡 1h开始出现 ,12～ 2 4h达峰值 ,Bcl-2、Bax的表达增强 ;2 4h后凋亡峰缓慢下降 ,Bcl-2、Bax的表达陆续减弱。丹参治疗组与缺血再灌注组相比于 1～ 72 h各时间点 Bcl-2表达增强 ,Bax表达减弱 ,凋亡细胞数明显减少 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论 :丹参可通过增强 Bcl-2表达 ,抑制 Bax表达 ,而抑制肝脏缺血再灌注时肝细胞凋亡。因而可以预防肝脏缺血再灌注损伤。     

地氟醚与NO预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的建立在体大鼠肺缺血再灌注(I-R)损伤模型，观察吸人20ppmNO和／或1．3MAC地氟醚预处理对大鼠肺I-R损伤的作用。方法60只SD大鼠随机分为五组，假手术组、I-R组、地氟醚 I-R组、iNO I-R组及地氟醚 iNO I-R组。各组在缺血后与再灌注3h分别处死6只大鼠，检测肺组织IL-10、IL-1β、TNF-α以及ICAM-1表达，MDA、MPO含量和肺组织湿干重比。结果与假手术组相比，肺I-R后IL-10、IL-1β及TNF-α等细胞因子生成明显增加，ICAM-1呈显著上调，MDA与MPO显著升高，肺水含量增加。吸入NO和地氟醚均可在一定程度上抑制肺I-R后IL-1β和TNF-α的生成，降低ICAM-1的上调，减少MDA和MPO生成，同时抑制IL-10生成。结论吸人地氟醚和／或NO抑制促炎细胞因子以及黏附分子的表达，同时对抗炎因子也有明显抑制作用，对肺I-R损伤起到保护作用；但两者联合应用并未呈现显著的协同作用。     

磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在丁苯酞保护心肌缺血再灌注损伤中作用机制的实验研究

目的观察丁苯酞预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用以及磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路在此过程中的作用。方法将大鼠心肌细胞(H9C2)随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、丁苯酞预处理组(I/R+NBP组)。通过氧气剥夺以及无糖培养基的更换模拟6 h缺血4 h复灌心肌缺血模型。通过细胞计数检测试剂盒(CCK-8)检测不同药物浓度细胞活性,探索丁苯酞的最佳药物浓度;比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)以及丙二醛(MDA)含量;蛋白质印迹法(Western blot)检测PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和Akt的蛋白表达水平;定量聚合酶链反应(qPCR)技术检测白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在核糖核酸(mRNA)水平的表达。多组之间比较采用单因素方差分析,两组之间比较采用t检验。结果丁苯酞的最佳用药浓度为100μmol/L;I/R组MDA、LDH的表达量高于Sham组[(172.03±14.99)nmol/L比(38.98±6.49)nmol/L、(195.04±14.50)%比(100.00±0.00)%,t=14.106、11.354,P<0.05];I/R组IL-1β、TNF-α的表达量高于Sham组(22.36±2.71比1.00±0.00、6.20±0.31比1.00±0.00,t=13.660、28.874,P<0.05);I/R组PI3K、p-Akt的表达量也高于Sham组(0.61±0.34比0.34±0.01、0.95±0.04比0.36±0.04,t=13.487、18.392,P<0.05),差异有统计学意义。I/R+NBP组MDA、LDH的表达量低于I/R组[(56.98±4.79)nmol/L比(172.03±14.99)nmol/L、(140.34±4.44)%比(195.04±14.50)%,t=12.661、7.890,P<0.05];I/R+NBP组IL-1β、TNF-α的表达量低于I/R组(6.66±0.60比22.36±2.71、1.76±0.11比6.20±0.31,t=9.798、23.352,P<0.05),差异有统计学意义;I/R+NBP组PI3K、p-Akt的表达量高于I/R组(1.00±0.05比0.61±0.34、1.27±0.04比0.95±0.04,t=11.440、10.432,P<0.05),差异有统计学意义。结论丁苯酞可以通过减少细胞损伤、抑制氧化及炎性反应进而减轻心肌缺血再灌注损伤,该过程可能有PI3K/Akt通路的参与。     

川陈皮素通过激活SIRT1/FOXO3a信号来减轻肾缺血再灌注损伤

目的：本研究旨在探究川陈皮素（NOB）保护小鼠肾缺血再灌注损伤（RIRI）的可能分子机制。方法：将Balb/c小鼠分为5组（n=6）：假手术组、模型组、NOB组（50 mg/kg）、组蛋白去乙酰化酶沉默信息调节因子1（SIRT1）抑制剂EX527组（5 mg/kg）、NOB+EX527组（50 mg/kg的NOB+5 mg/kg EX527）。在建模前24 h对小鼠进行药物处理。通过阻断小鼠左肾动静脉血流建立RIRI模型。建模24 h后检测肾组织中氧化应激标志物含量。通过苏木精-伊红（HE）染色和天狼星红染色评价肾组织病变和纤维化。通过TUNEL染色检测肾细胞凋亡。通过蛋白质免疫印迹法检测肾组织中SIRT1、叉头框蛋白O3a（FOXO3a）、细胞凋亡和自噬相关蛋白表达。通过实时荧光定量PCR检测肾组织中SIRT1和FOXO3a mRNA的水平。结果：与模型组比较,NOB组小鼠肾脏病变程度减轻,肾脏纤维化面积降低（均P<0.05）。与模型组比较,NOB组肾组织抗氧化作用升高（P<0.05）。与模型组比较,NOB组肾组织中细胞凋亡减少（P<0.05）。与模型组比较,NOB组肾组织中SIRT1和FOXO3a的mRNA和蛋白相对表达量升高,微管相关蛋白轻链(LC)3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白相对表达量升高,而p62降低（均P<0.05）。此外,EX527逆转了NOB对肾脏的保护作用（P<0.05）。结论：NOB通过激活SIRT-1/FOXO3a信号通路介导的自噬来减轻RIRI。     

肿瘤坏死因子、白细胞介素6活性变化对家兔肠缺血再灌注后急性肺损伤的影响

目的测定家兔肠缺血再灌注后血浆和肺组织匀浆TNF和IL-6的活性,结合肺组织病理学改变,探讨急性肺损伤的病理机制.方法利用肠系膜上动脉夹闭模型,将家兔随机分为正常对照组、缺血60min组,缺血60min后再灌注(1h、2h、4h)组,分别测定不同时段血浆TNF和IL-6的活性,并于缺血60min,再灌注4h处死动物,开胸取肺,测肺体指数和肺组织匀浆TNF和IL-6的活性,并做肺组织病理学检查.结果血浆TNF和IL-6的活性于肠缺血1h就显著升高(P＜0.01),再灌注1h继续升高(P＜0.01),以后逐渐下降,于再灌注4h几乎接近正常对照组水平.再灌组肺组织匀浆TNF和IL-6的活性与正常对照比较显著升高(P＜0.05),再灌组、缺血组肺组织病理改变与正常对照组比较都有不同程度的变化.结论提示肠缺血再灌注后可引起急性肺损伤,并且血浆和肺组织匀浆TNF和IL-6的活性的变化可能为肺部病理改变原因之一.     

MgSO_4对大鼠脑缺血-再灌注损伤电生理方面的影响

目的观察大鼠脑缺血－再灌注损伤时ＭｇＳＯ４对皮层脑电图、肢体运动功能及血Ｍｇ２＋浓度的影响。方法 用改良的大脑中动脉线栓法建立大鼠脑缺血－再灌注模型,进行皮层脑电图描记、血清Ｍｇ２＋浓度测定及运动功能 评估。结果　ＭｇＳＯ４能减少扩展性抑制波（ＳＤｓ）产生数（Ｐ＜０．０５）;１０％　ＭｇＳＯ４治疗组疗效优于５％ＭｇＳＯ４组,且早 期给药效果更佳（Ｐ＜０．０５）。结论ＭｇＳＯ４作为兴奋性氨基酸（ＥＥＡｓ）非竞争性Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸受体（ＮＭＤＡ－ Ｒ）拮抗剂可有效减少ＳＤｓ产生数,对大鼠脑缺血－再灌注损伤有保护作用。