MicroRNA-206、microRNA-29b、microRNA-133a的表达及对骨折患者延迟愈合的预测价值

目的 分析microRNA-206（miR-206）、microRNA-29b（miR-29b）、microRNA-133a（miR-133a）的表达及对骨折患者延迟愈合的预测价值,为临床应用提供依据。方法 选取2020年1月—2020年12月四川省医学科学院·四川省人民医院收治的123例骨折延迟愈合患者作为观察组,另取该院100例骨折愈合正常患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者血清miR-206、miR-29b、miR-133a的表达;绘制受试者工作特征（ROC）曲线,分析各指标单独及联合预测骨折延迟愈合的价值。结果 观察组血清miR-206、miR-29b、miR-133a相对表达量高于对照组（P <0.05）。miR-206、miR-29b、miR-133a预测骨折延迟愈合的准确性分别为82.79%、83.90%和86.67%,较3者联合预测准确性（96.72%）低。3者联合预测骨折延迟愈合的敏感性和特异性分别为95.94%（95% CI：0.922,0.986）、96.00%（95% CI：0.937,0.993）,高于单独预测。结论 骨折延迟愈合患者血清miR-206、miR-29b、miR-133a相对表达量较高;3者联合检测可有效预测患者延迟愈合,具有较高的临床应用价值。     

miR-214和miR-181c在胃癌组织中的表达及预后价值

目的探讨微小RNA-214（miR-214）和miR-181c在胃癌组织中的表达水平及对预后的影响。 方法选取2014年1月至2015年1月于川北医学院附属医院收治的68例胃癌患者为研究对象,均接受手术治疗,出院后随访1~60个月。利用实时荧光定量PCR技术检测患者癌组织和癌旁组织miR-214、miR-181c相对表达量;利用Kaplan-Meier曲线进行生存分析;Cox多因素回归分析影响胃癌患者预后的独立危险因素。 结果胃癌组织中miR-214、miR-181c表达水平均明显低于癌旁组织,差异有统计学意义（P<0.05）。根据miR-214、miR-181c表达均值将患者分为高表达组和低表达组,miR-214、miR-181c表达水平与年龄、性别、淋巴结是否转移无关,与TNM分期、肿瘤分化程度有关（P<0.05）。患者总生存率为44.12%,miR-214低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.71%、57.69%,两组间比较差异有统计学意义（P=0.035）;miR-181c低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.55%、60.87%,差异有统计学意义（P=0.024）。Cox多因素回归分析结果显示,TNM分期高（HR=1.569,95% CI：1.029~2.391,P=0.036）、miR-214低表达（HR=1.643,95% CI：1.294~2.087,P<0.001）及miR-181c低表达（HR=1.327,95% CI：1.045~1.685,P=0.021）是影响胃癌患者预后的独立危险因素。 结论miR-214、miR-181c在胃癌组织中表达显著下调,与胃癌患者临床病理参数及不良预后有关,参与胃癌的发生发展过程。     

microRNA-671-5p在肝细胞癌中的表达及其负向调控丝切蛋白2与上皮细胞-间质转化的关系

背景与目的:近年研究发现,microRNA-671-5p(miR-671-5p)参与了多种恶性肿瘤的发生发展,同时与多种病毒介导的肝损伤相关,但其与肝细胞癌(HCC)之间的关系目前仍未见报道。本研究的目的为观察miR-671-5p在HCC中的表达情况,分析其功能及其与HCC生物学行为及临床病理特征的联系,并初步探讨作用机制。方法:用qRT-PCR检测80例HCC组织及癌旁组织样本、不同HCC细胞系(Hep3B、MHCC-97H、HepG2、SMMC-7721)及人正常肝细胞(L02)中miR-671-5p的表达,且在同时分析TCGA数据库中miR-671-5p在HCC组织与癌旁组织的表达差异。分析miR-671-5p表达量与临床病理因素的关系;用miR-671-5p抑制物敲低MHCC-97H细胞系中miR-671-5p的表后,分别采用CCK-8实验及Transwell实验分别检测HCC细胞转染miR-671-5p抑制物后增殖、侵袭及迁移能力的变化。利用TargetScan及Starbase网站预测miR-671-5p的靶基因,并通过Western blot、双荧光素酶实验及TCGA数据库分析验证。用Western blot观察降低miR-671-5p表达对HCC细胞中miR-671-5p靶基因及上皮细胞-间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、vimentin)表达的影响,以及在此基础上同时敲低靶基因的表达后,以上蛋白表达的变化。结果:miR-671-5p的表达在HCC组织中明显高于其癌旁组织,在各种HCC细胞系中均明显高于正常肝细胞,且随着样本肿瘤分期与HCC细胞的侵袭力的增加而升高(均P0.05);TCGA数据库分析也显示,miR-671-5p在HCC组织中的表达量明显高于癌旁组织(P0.05)。miR-671-5p的表达水平与AFP水平、肿瘤数目、静脉侵犯、Edmondson-Steiner分级及TNM分期明显有关(均P0.05)。转染miR-671-5p抑制物后,MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移能力均明显降低(均P0.05)。生物信息学分析及双荧光素酶实验均显示丝切蛋白2(CFL2)是miR-671-5p潜在靶基因,TCGA数据库分析也显示miR-671-5p与CFL2的表达呈负相关(均P0.05)。降低MHCC-97H细胞中miR-671-5p的表达后,CFL2蛋白的表达水平升高,同时EMT相关蛋白表达明显降低(均P0.05),但同时干扰CFL2的表达后,以上变化均有明显程度的逆转(均P0.05)。结论:miR-671-5p在HCC中表达上调,且与HCC的不良临床病理特征密切相关。miR-671-5p可促进HCC细胞的增殖、侵袭、迁移,其机制可能与抑制CFL2的表达而促进EMT发生有关。     

血清miR-133a在脓毒症并发ARDS中表达及预后的关系

目的分析血清微小核糖核酸(miR)-133a在脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)患者中的表达及与预后的关系。 方法选取2019年6月至2021年5月我院收治的65例脓毒症患者,根据是否并发ARDS,分为并发ARDS 35例和无ARDS 30例。随访28 d,统计脓毒症并发ARDS者预后,检测患者入住ICU第1天、第2天、第3天血清miR-133a水平,比较存活者和死亡者临床特征,采用Logistic回归分析判定影响脓毒症并发ARDS预后的因素,采用受试者工作曲线(ROC)分析血清miR-133a水平预测脓毒症并发ARDS者预后的价值。 结果并发ARDS入住ICU第1天、第2天、第3天血清miR-133a水平均高于无ARDS者(P<0.05);随访28 d,脓毒症并发ARDS者病死率为40.00%;死亡者入住ICU第1天、第2天、第3天血清miR-133a水平均高于存活者(P<0.05);死亡者序贯器官衰竭(SOFA)评分、血管外肺水指数、第1天血清miR-133a水平与存活者比较,差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素回归分析显示SOFA评分、第1天血清miR-133a水平均是影响脓毒症并发ARDS者死亡的危险因素(P<0.05);ROC分析显示,第1天血清miR-133a水平预测脓毒症并发ARDS者死亡的最佳截断点为1.47,灵敏度为85.71%,特异度为90.48%,AUC为0.857。 结论脓毒症并发ARDS者血清miR-133a水平升高,血清miR-133a水平是影响脓毒症并发ARDS者死亡的危险因素,监测血清miR-133a水平变化,作为预测患者预后的指标。     

干细胞转录因子Oct4和CD133蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨干细胞转录因子Oct4(Oct4)和CD133蛋白在肝外胆管癌(EHCC)中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化方法检测50例EHCC、30例癌旁胆管组织(TAC)和20例正常胆管组织(NBDT)中Oct4和CD133蛋白表达水平,并结合临床病理特征进行分析。结果:在EHCC中Oct4和CD133蛋白阳性表达率分别为62.0%(31/50)和68.0%(36/50)。EHCC中Oct4和CD133表达阳性率显著高于TAC和NBDT(P0.05)。Oct4和CD133的表达与EHCC的TNM分期、分化程度和转移相关(P0.05),且两者表达呈正相关(r=0.33,P0.05)。结论:检测Oct4和CD133基因蛋白表达可作为评估EHCC生物学行为和预后的参考指标。     

微小RNA-422a在胃癌组织中的表达及参与多柔比星耐药的机制研究

摘 要 目的：研究微小RNA-422a（miR 422a）在胃癌组织中的表达及参与多柔比星耐药的机制研究。 方法: 检测46例胃癌及癌旁组织中miR 422a的表达水平,分析其与胃癌临床特征和预后的相关性。将miR 422a转染到SGC-7901/多柔比星细胞中,检测不同浓度多柔比星对SGC-7901细胞增殖的影响,计算耐药指数（RI）,同时检测miR 422a和肌细胞增强因子2D（MEF2D）的表达以及细胞凋亡情况。 结果: miR 422a在胃癌组织的表达水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）;根据miR 422a的表达水平将患者分为高表达组和低表达组,发现miR 422a的表达水平在分化程度、淋巴结转移和TNM分期有显著差异（P＜0.05或P＜0.01）;与预后良好组患者相比,预后不良组患者miR 422a表达显著降低（P＜0.05）;SGC-7901的半抑制浓度（IC50）为0.33 μg·ml-1,SGC-7901/多柔比星的IC50为12.08 μg·ml-1,RI为36.61;miR 422a mimic组的IC50为4.01 μg·ml-1,RI为2.74;通过转染miR 422a mimic,miR 422a显著上调,同时抑制MEF2D,SGC 790/多柔比星细胞在多柔比星诱导的情况下细胞凋亡率显著升高（P＜0.01）。 结论: miR 422a在胃癌组织中低表达,并与胃癌患者预后不良密切相关,上调miR 422a水平可以增加SGC-7901对多柔比星的敏感性,这一发现可能为逆转肿瘤耐药性提供新的治疗靶点。