Delayed c-fos proto-oncogene expression in the rat hippocampus induced by transient global cerebral ischemia: an in situ hybridization study

The relative levels of c-fos mRNA in individual neurons of the hippocampal formation of rats is dramatically increased following 20 min of cerebral ischemia induced by 4-vessel occlusion. After 24 h of recirculation, a number of scattered neurons in the dentate hilus became hybridization positive. This effect appeared to peak between 24 and 48 h. A few neurons in the pyramidal cell layer of CA1 expressed c-fos as early as 24 h, but the most intense labeling in this region was seen at 72 h of recirculation. These results correlate well with the known distribution of delayed ischemic necrosis in the brain.     

体外冲击波对大鼠胸段脊髓影响的初步研究

目的:初步探讨体外冲击波(ESW)对大鼠胸段脊髓的影响.方法:雄性SD大鼠126只,随机分为4组,直接冲击组(A组,48只),不做椎板切除手术,直接进行冲击波冲击,冲击参数:发射电压10kV,冲击能量0.250mJ/mm2冲击频率60次/min,冲击次数1000次;手术后冲击组(B组,48只),切除T7～T10椎板,皮肤愈合后行冲击波处理,参数同A组;手术后不冲击组(C组,24只),切除T7～T10椎板,不行冲击波处理;正常对照组(D组,6只),不进行任何处理.A、B、C组义分为处理后4h、8h、24h、72h共4个时间点,D组不分时间点.A、B、C组处理前、后及D组行BBB评分,并经灌注后取T7～T10脊髓标本,切片行HE染色观察脊髓损伤情况,用免疫组化方法观察脊髓C-fos蛋白的表达.结果:A组和B组大鼠处理后8h、24h、72h时BBB评分均有下降,以8h最低,分别为16.8±0.8分和14.5±1.0分,处理后各时间点两组间均有显著性差异(P<0.01),A组和B组8h、24h、72h时BBB评分均明显低于C组和D组(P<0.01),但C组和D组之间无显著性差异(P0.05).A组和B组HE染色均可见脊髓出血、水肿,神经元变性坏死,且B组较A组损伤程度重;组及D组未见明显脊髓损伤表现.B组脊髓中C-fos蛋白表达最强,其次为A组,均以24h表达最强,平均光密度值分别为0.396±0.008和0.293±0.013,两组比较有显著性差异(P<0.01);组及D组表达均不明显,与A组和B组比较有显著性差异(P<0.01),C组和D组之间无显著性差异(P0.05).结论:发射电压10kV、冲击能量0.250mJ/mm2的ESW可造成大鼠胸段脊髓一定程度的损伤,冲击时椎板可起到一定保护脊髓的作用.     

低频电刺激对中国树鼩死亡后脏器中激素水平影响

目的 探索低频电刺激对中国树鼩死亡后脏器中激素水平的影响。方法 给予中国树鼩低频电刺激，分别于死亡后0 h、3 h、6 h、12 h、18 h、24 h、36 h和72 h取甲状腺、肝脏、脾脏，用放射免疫法测定内皮素(endothelin,ET)、心钠素（atrial natriuretic factor，ANF）、血栓素(thromboxane ,TX)水平；剥取死后0 h中国树鼩中脑腹侧背盖区 (ventral tegmental area，VTA)检测c-fos表达。结果 电刺激后，中国树鼩尸体脏器中内皮素、心钠素、血栓素水平比对照组显著升高,其含量随死亡后时间的延长而降低，且呈现一定的趋势；VTA c-fos表达明显增强。结论 低频电刺激能引起中国树鼩脏器中激素的合成、释放和脑组织c-fos表达。     

帕罗西汀对心理应激大鼠血浆皮质醇和行为的影响

目的：观察帕罗西汀对心理应激大鼠血浆皮质醇和行为的影响。方法：建立大鼠心理应激模型,观察抗焦虑药物帕罗西汀用药组大鼠下丘脑室旁核c-fos表达、血浆皮质醇和旷场行为。结果：与正常对照组比较,心理应激大鼠下丘脑室旁核c-fos表达显著增加（P〈0.05）,血浆皮质醇含量明显升高（P〈0.05）,在旷场中的穿行格数和直立次数明显增加（P〈0.05）,而帕罗西汀用药能减少大鼠下丘脑室旁核c-fos表达、血浆皮质醇含量和在旷场中的活动（P〈0.05）。结论：帕罗西汀通过抑制c-fos基因表达,下调了下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）水平,从而减轻了心理应激所致的焦虑症状。     

西红花煎液对急性全脑缺血再灌注大鼠C—fos蛋白表达的影响

目的：探讨西红花煎液对大鼠全脑缺血再灌注后C—fos蛋白表达的影响及探讨其机制。方法：采用改良四血管法制造大鼠全脑缺血再灌注模型，通过免疫组化法检测再灌注各时间点以及西红花煎液和阳性对照药尼莫地平预处理后C—fos蛋白的表达。结果：缺血再灌注后，大鼠海马CA1区C—fos蛋白表达增强，与假手术组相比有统计学意义（P〈0．01）；与缺血再灌注组相比，预处理组大鼠海马CA1区C—fos蛋白的表达明显受到抑制（P〈0．01）；阳性对照药尼莫地平组与西红花煎液低剂量组相比无明显差异；西红花煎液高剂量组再灌注7h、24h与尼莫地平组及西红花煎液低剂量组相比C—fos蛋白表达明显受到抑制（P〈0．05）。结论：西红花煎液的神经保护机制可能与其抑制C—fos蛋白的表达有关。     

沙土鼠全脑梯度再灌注的脑保护实验研究

目的 动态研究不同灌注时间和灌注量全脑组织缺血损害的恢复程度和即早基因的表达，以探明梯度再灌注的脑保护作用机制。方法 将沙土鼠随机分为4组：实验组夹闭两侧颈总动脉，造成沙土鼠全脑缺血模型，夹闭10 min后开放10 min，开放不同脑血流量(1／4开放组，1／2开放组，一次性全开放组)，分别检测3组及单纯血液稀释组缺血海马CA区C-fos蛋白的表达，以及缺血区大脑半球的改善状况。结果 开放10 min、1／2脑血流量时C—fos蛋白表达最高(P＜0．05)，海马CA区缺血损害改善最明显；开放10 min、全脑血流量一次性开放时海马CA区损害最严重。结论 ①在梯度再灌注流量中，脑缺血海马区C-fos的表达和神经元凋亡呈反相作用关系；②低流量灌注有明显改善脑缺血的作用；⑧夹闭10 min后，开放1／2脑血流量，持续10 min的效果比一次性再灌注开放效果要好。     

C-fos启动子在人胶质瘤细胞株及正常组织的转录活性研究

目的 观察C-fos、TERT、Survivin、E2F1、Cox2及CMV启动子在人胶质瘤细胞株U87、U373、U251中的转录活性以及C-fos、CMV启动子在正常组织中的转录活性. 方法 设计引物并应用PCR法从人胶质瘤基因组中克隆C-fos、TERT、Survivin、E2F1、Cox2启动子.将上述5种启动子以及CMV启动子序列插入到pGL4-Basic报告载体中.将构建的pGL4-Cfos、pGL4-TERT、pGL4-Survivin、pGL4-E2F1、pGL4-Cox2、pGL4-CMV重组质粒和内参质粒pRL-TK瞬时共转染胶质瘤细胞U87、U373、U251,双荧光素酶实验检测各启动子的转录活性;C57BL/6J小鼠10只,分为C-fos组、CMV组,每组5只,分别由尾静脉注射600 μL含40 μg pGL4-Cfos-luc、pGL4-CMV-luc质粒的生理盐水,24 h后检测小鼠心、肝、脾、肺组织中荧光素酶的活性. 结果 各启动子基因序列经测序确认正确;TERT、Survivin、Cox2、E2F1、C-fos启动子的转录活性(相对于CMV启动子)在U87细胞中依次为0.03％、0.33％、0.38％、0.24％、3.73％;在U373细胞中依次为0.95％、65.34％、0.32％、9.07％、70.83％,在U251细胞中依次为0.41％、15.57％、0.15％、0.51％、17.30％;CMV组小鼠心、肝、脾、肺组织荧光素酶活性依次为(93.40 ±75.06)RLU/mg蛋白、(12.33±6.49)RLU/mg蛋白、(22.60±7.50)RLU/mg蛋白、(950.47 ±538.74)RLU/mg蛋白;C-fos组小鼠心、肝、脾、肺组织荧光素酶活性依次为(2.13±1.92)RLU/mg蛋白、(1.11 ±0.95)RLU/mg蛋白、(2.07±1.51)RLU/mg蛋白、(29.24±25.89)RLU/mg蛋白,与CMV组比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 C-fos启动子在人胶质瘤细胞株中的转录活性高于TERT、Survivin、E2F1、Cox2,在正常组织中的转录活性低于CMV启动子.     

Environmental context modulates the ability of cocaine and amphetamine to induce c-fos mRNA expression in the neocortex, caudate nucleus, and nucleus accumbens.

We reported previously that environmental novelty enhances the acute psychomotor activating effects of amphetamine, its ability to induce behavioral sensitization, and its ability to induce c-fos mRNA in the striatum and other structures, relative to when amphetamine is given in the home cage. The purpose of the present experiment was 2-fold: to determine (1) whether environmental novelty has a similar effect on the ability of cocaine to induce c-fos mRNA, and (2) whether this effect is seen in neurologically-intact rats (in previous experiments we studied the intact hemisphere of rats with a unilateral 6-OHDA lesion). In the dorsal portion of the caudate putamen, core and shell of the nucleus accumbens, and in several cortical regions, both amphetamine (1.5 mg/kg) and cocaine (15 mg/kg) induced higher levels of c-fos mRNA expression when administered in a novel environment, relative to when they were administered in the home cage. The ability of environmental context to modulate psychostimulant drug-induced immediate early gene expression may be related to its ability to modulate forms of drug experience-dependent plasticity, such as behavioral sensitization.     

封闭负压引流技术对人慢性创面创缘组织中c-fos表达的影响

目的　研究人慢性创面在封闭负压引流治疗前后 ,创缘组织中原癌基因c -fos表达的变化 ,从而进一步阐明封闭负压引流促进慢性创面愈合的机制以及慢性创面的成因。方法　对 5例慢性创面患者给予封闭负压引流治疗 ( - 12 0mmHg压力 ) ,分别于吸引前以及吸引后 1,4,7天切取创缘组织 ,固定、包埋、切片后 ,应用免疫组织化学方法观察c -fos蛋白表达的动态变化。结果　负压吸引前 ,c-fos阳性细胞表达较多 ,主要分布在表皮基底以及真皮浅层中的成纤维细胞及炎性细胞的胞核中 ,少部分胞浆中亦存在。随负压时间的延长 ,c-fos阳性细胞渐少 ,主要分布在真皮层的成纤维细胞胞核中 ,至第 7天已罕见c-fos蛋白的表达。结论　c -fos在封闭负压引流促进慢性创面愈合的过程中 ,可能起着重要作用 ,也反向证实c -fos的大量表达 ,是慢性创面形成的一个重要因素