冠状动脉外膜炎症在动脉粥样硬化病灶形成中的作用

目的：探讨动脉外膜炎症诱发载脂蛋白E基因剔除（apoE-/-）小鼠冠状动脉粥样硬化病灶发生的机制。 方法： 取apoE-/-小鼠心脏做连续切片，选择冠状动脉外膜有炎性细胞浸润的3类部位代表粥样硬化病灶形成过程中的3个阶段：①未发现粥样硬化病灶；②有直接从主动脉延伸的病灶顶端和③成熟粥样硬化病灶的冠状动脉。分别采用HE染色、Movat染色、免疫组化和透射电镜方法鉴定3个病变阶段的冠状动脉外膜中炎细胞类型。 结果： ①未发现粥样硬化病灶；②有直接从主动脉延伸的病灶顶端和③成熟粥样硬化病灶的冠状动脉外膜分别以巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞浸润为主，其构成比分别为60.00%、57.65%和66.67%，各组构成比分别与其它两组比较均有显著差异（P<0.01）。 结论： 动脉外膜炎症可能是诱发动脉粥样硬化发生的早期事件之一，ApoE-/-小鼠冠状动脉粥样硬化病灶形成过程中，动脉外膜经历了一个从急性炎症到慢性炎症的过程。     

补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及MRP表达的影响

目的：探讨补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌细胞耐药逆转作用及机制。方法:采用MTT及流式细胞术，分别观察补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP耐药细胞的细胞毒作用和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的影响。结果:补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌耐药细胞有一定的杀伤作用，能增强顺铂（DDP）对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用，显著降低MRP的表达（P＜0.01），但对维拉帕米（VRP）的协同逆转作用不明显。结论:补肾化瘀解毒方药物血清具有增效和耐药逆转作用，其机制可能与其抑制肺癌耐药细胞MRP的表达有关。     

鼻咽癌患者树突状细胞对EBV特异性细胞毒T细胞的免疫反应

目的：用负载EB病毒抗原LMP-2表位肽段的鼻咽癌患者树突状细胞（DC）诱导自身CD8^＋T细胞，观察其细胞毒性T细胞的免疫应答能力。方法：在体外分离并诱导成熟HLA—A2基因型鼻咽癌患者自身的DC，分别负载EB病毒抗原LMP-2的HIA—A2限制型两个表位肽段CLGGLLTMV（CLG）和LTAGFIFL（LTA）后，诱导自身CD8^＋T细胞，培养2周后，运用酶联免疫斑点法（Elispot）和HLA-肽四聚体法（Tetramer）检测诱导后T细胞的免疫应答情况。结果：经DC抗原呈递后分泌IFN-γ的CLG和LTA特异性CD8^＋T细胞数，分别为（42．67±33．79）个／孔和（25．67±18．25）个／孔，而呈递前分别为（2．67±1．97）个／孔和（5．33±1．86）个／孔。两者IFN-γ^＋CD8^＋T细胞数均有明显增加（P〈0．05）。CLG和LTA肽段特异性细胞毒性T细胞（CTL）的中位数在呈递前分别为0．135％和1．14％；呈递后则为1．045％和1．945％。两者较呈递前均明显增加（P〈0．05）。结论：负载EB病毒抗原LMP-2表位肽段的DC诱导鼻咽癌患者自身CD8^＋T细胞，可产生特异性CTL，对鼻咽癌患者的免疫治疗具有潜在的应用价值。     

在动态模拟体液中致密CaP陶瓷表面形貌对类骨磷灰石层形成的影响研究

磷酸钙陶瓷植入体内后其表面类骨磷灰石层的形成是诱导成骨的先决条件。本实验在模拟体液 (Simu-lated body fluid,SBF)以人体骨骼肌组织的正常生理流率 (2 ml/ 10 0 m l· min)下 ,研究在动态 SBF中致密磷酸钙陶瓷表面形貌对类骨磷灰石层形成的影响。结果表明 :在生理流速条件下 ,材料的粗糙表面有利于类骨磷灰石层的形成 ,加大 SBF中 Ca2 +、HPO4 2 -离子浓度 ,类骨磷灰石层的形成速度加快。本研究进一步证实了材料的几何形貌对类骨磷灰石形成的影响 ,加深了对磷酸钙陶瓷在体内诱导成骨机理的理解     

本刊加入“万方数据——数字化期刊群”的声明

1临床资料患者,女性,56岁,因“反复上腹部隐痛不适10余年”2006年8月15日住院治疗,无恶心、呕吐,无便血、黑便病史,病程内无体重减轻;无恶性肿瘤家族史。入院前多次纤维胃镜检查慢性浅表性胃炎。药物治疗慢性胃炎效果不明显。住院期间再次胃镜检查,胃窦部小弯侧见一隆起3mm×2mm黄色小结节,胃镜取标本病理提示:胃窦类癌(癌细胞较小、多边形呈巢状结构,核为椭圆形,有空泡状物质,胞浆较空为嗜酸性颗粒,特殊染银(+)。电镜下发现细胞内有神经内分泌颗粒)。术前准备,肝肾功能正常,尿中5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic,HIAA)在正常数值范围…     

Ad5F35-LMP2重组腺病毒免疫效果的研究

目的了解含有EB病毒潜伏膜蛋白2的非复制型重组腺病毒(Ad5F35-LMP2),免疫恒河猴的特异性细胞和体液免疫的效果。方法分别使用高剂量(1.5×1010TCID50/只)、中剂量(1.5×109TCID50/只)、低剂量(1.5×108TCID50/只)Ad5F35-LMP2重组腺病毒,同时设对照组(PBS4.0ml/只)。肌内注射免疫恒河猴,每个月一次,共免疫3次,第0、4、8、12周时使用Elispot方法检测猴外周血EBV-LMP2细胞毒性T细胞应答,同时应用免疫酶方法检测血清中LMP2抗体。结果3个剂量Ad5F35-LMP2腺病毒免疫恒河猴均可以诱导出有效的细胞免疫应答及一定的抗体应答,免疫应答水平的高低与病毒剂量的高低有一定的关系,较高剂量产生的细胞及体液免疫应答水平比低剂量的高。结论Ad5F35-LMP2非复制型重组腺病毒疫苗可以有效的诱导恒河猴产生EBV-LMP2特异性细胞和体液免疫反应。     

可溶性HLA-G1与NK-92细胞表面ILT2及KIR2DL4受体相互作用的研究

 目的 探讨可溶性 HLA-G1（sHLA-G1）对人 NK-92 细胞杀伤活性的抑制与细胞表面免疫球蛋白样转录分子 2（ILT2）和杀伤细胞免疫球蛋白样受体 2DL4（KIR2DL4）受体的关系。 方法 ①通过原核表达技术获得 sHLA-G1 重组蛋白（重组蛋白），并采用蛋白质印迹法进行鉴定。②取 NK-92 细胞，加入终浓度 20 μg/ml 的重组蛋白分别培养 10、30 min，再分别加入抗 HLA-G1/G5、抗ILT2 和抗 KIR2DL4 抗体，采用流式细胞术检测各组 NK-92 细胞表面 sHLA-G1 和 ILT2、KIR2DL4 受体表达阳性率；以 NK-92 细胞单独培养作为对照组。③以人白血病 K562 细胞为靶细胞，以经不同方式处理的 NK-92 细胞为效应细胞，效靶比为5:1，共同培养 2 h，采用流式细胞术检测 NK-92 细胞对 K562 细胞的杀伤率。NK-92 细胞处理方式为单纯重组蛋白处理（分别加入终浓度为 0、10、20 μg/ml 的重组蛋白培养 30 min）和表面受体封闭 + 重组蛋白处理（分别加入抗 ILT2、抗 KIR2DL4、抗 LT2 + 抗 KIR2DL4 抗体培养 30 min，再分别加入终浓度为 0、10、20 μg/ml 的重组蛋白培养 30 min）。 结果 ①蛋白质印迹分析表明所获重组蛋白为带有组氨酸标签的特异蛋白。②NK-92 细胞与 20 μg/ml 重组蛋白共培养 30 min 后，sHLA-G1 表达阳性率明显高于而 ILT2、KIR2DL4 受体表达阳性率均明显低于对照组（均 P < 0.05）。③以终浓度 0、10、20 μg/ml 的重组蛋白处理的 NK-92 细胞对 K562 细胞的杀伤率分别为 39.79% ± 2.00%、27.79% ± 0.75%、21.36% ± 0.67%（两两比较，均 P < 0.01）；单独封闭 ILT2 受体，杀伤率分别为 23.09% ± 1.63%、21.13% ± 0.38%、18.42% ± 0.47%（两两比较，均 P < 0.01）；单独封闭 KIR2DL4 受体，杀伤率分别为 30.74% ± 0.44%、26.03% ± 0.38%、21.15% ± 0.35%（两两比较，均 P < 0.01）。 结论 sHLA-G1 通过与 NK-92 细胞表面 ILT2 和 KIR2DL4 受体直接结合而抑制 NK-92 细胞的杀伤活性。     

巨噬细胞炎症蛋白1-α、解整合素样-金蛋白酶8、12 和CD68蛋白在颌骨巨细胞病变及长骨骨巨细胞瘤中的表达

目的检测巨噬细胞炎症蛋白1-α(MIP-1α)、解整合素样-金属蛋白酶(ADAM)8、12和CD68在颌骨巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的表达,探讨其在这两种巨细胞病变中的多核巨细胞发生中的作用.方法采用免疫组织化学SP法检测24例颌骨中心性巨细胞病变,24例长骨骨巨细胞瘤石蜡组织中的MIP-1α、ADAM8、ADAM12和CD68蛋白的表达.结果 MIP-1α在24例颌骨中心性巨细胞病变和24例长骨骨巨细胞瘤中的血管、类骨质和新骨形成区中强表达,而在多核巨细胞和圆形单核细胞中为阴性;ADAM8、ADAM12和CD68在颌骨中心性巨细胞肉芽肿和长骨骨巨细胞瘤中几乎所有多核巨细胞和部分圆形单核基质细胞均为阳性.结论颌骨中心性巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的多核巨细胞可能由CD68+的圆形单核基质细胞融合而成,这些圆形单核细胞可能是由骨微环境中的趋化因子,募集外周血中循环的单核细胞到病变局部分化而成的具有破骨细胞前体细胞性质的细胞,继而在某些融合蛋白作用下发生融合,成熟为多核破骨样巨细胞.     

实验性过敏性哮喘豚鼠外周血液淋巴细胞β肾上腺素能受体系统的变化

在建立外周血液淋巴细胞β受体测定法的基础上,动态地观察了实验性过敏性哮喘豚鼠外周血液淋巴细胞中β受体最大结合容量(Bmax)、cAMP含量,以及血浆中儿茶酚胺(CA)含量的变化,发现它们都呈明显的时相性改变。通过分析它们发生的时间过程和相互关系,认为:在过敏性哮喘时所观察到的淋巴细胞β受体Bmax值的降低,乃是高水平内源性儿茶酚胺所致受体失敏的结果;并对所观察到的变化的意义作了初步探讨。     

小鼠β_2m反义核酸重组荧光蛋白表达载体的构建及表达研究

本研究应用分子生物学技术 ,构建小鼠 β2 m反义核酸重组荧光蛋白表达载体pEGFP β2 mAN ,经过酶切、PCR鉴定 ,以及序列分析证实克隆的正确性。然后用脂质体转染NIH3T3细胞 ,经过RT PCR及Westernblot检测 ,观察重组质粒对细胞β2 mmRNA和蛋白表达的影响 ,同时在荧光显微镜下直接观察细胞转染的结果。结果证明pEGFP β2 mAN已成功导入NIH3T3细胞中 ,且有效表达 ,在荧光显微镜下可见梭形绿色荧光细胞 ;与同步转染的小鼠 β2 m正、反义核酸表达载体pcDNA3 β2 mSN、pcDNA3 β2 mAN的转染结果一起进行分析 ,转染pcDNA3 β2 mSN细胞的 β2 mmRNA和蛋白表达水平升高 ,而转染pcD NA3 β2 mAN和pEGFP β2 mAN的细胞 β2 mmRNA和蛋白表达水平降低。小鼠 β2 m反义核酸重组荧光蛋白表达载体pEGFP β2 mAN的转染结果显示 :它不但可以降低NIH3T3细胞 β2 m基因的表达 ,而且为观察脂质体转染效果提供了直观、即时的方法