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雷帕霉素靶蛋白反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达 总被引:5,自引:2,他引:3
目的构建雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的反义RNA真核表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)功能的影响。方法提取人VSMC总RNA,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)扩增mTOR基因cDNA序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1,转染VSMC,Westernblot法检测反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果经RT-PCR获得664bp产物,T载体克隆后,酶切确定该片段为mTOR基因cDNA,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR,测序证明序列正确后转染VSMC,证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达,转染72h的mTOR蛋白产物表达抑制率达82%,S期细胞由15%降低为7%,凋亡细胞增至9%。VSMC增殖过程在Gx/Go期→S期受阻。结论成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体。 相似文献
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目的探讨急性高血压性脑出血患者细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在血肿周围脑组织和正常脑组织中的表达及其意义。方法选择30例行开颅手术治疗的急性高血压性脑出血患者,采用免疫组化技术检测ICAM-1在血肿周围脑组织及正常脑组织中的表达。结果实验组血肿周围脑组织可见ICAM-1的表达水平上调,其表达水平明显高于正常脑组织的表达水平(P<0.01)。神经元和血管内皮细胞共同表达ICAM-1,且神经元表达较明显。结论ICAM-1在人类高血压性脑出血血肿周围脑组织的表达水平上调,其表达上调可能参与了血肿周围脑组织的白细胞浸润,最终引发炎性反应和继发性脑损伤。 相似文献
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目的探讨诱导性一氧化氮合酶(iNOs)在颅内囊性动脉瘤瘤壁中的表达及其意义。方法应用免疫组化染色和原位杂交染色技术检测iNOS在颅内囊性动脉瘤和正常动脉血管壁组织中的表达。结果所有脑动脉瘤标本中均可见iNOS表达,而正常脑动脉标本中则未见其表达:iNOS阳性表达部位主要在动脉瘤壁外膜和中膜的炎症浸润区的炎症细胞(如淋巴细胞、单核巨噬细胞)的胞浆内。结论动脉瘤的发生可能与局部iNOS过度表达,继而合成大量的NO有关。 相似文献
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E. Drakaki E. Borisova M. Makropoulou L. Avramov A. A. Serafetinides I. Angelov 《Skin research and technology》2007,13(4):350-359
BACKGROUND/PURPOSE: Laser-induced autofluorescence spectroscopy provides excellent possibilities for medical diagnostics of different tissue pathologies including cancer. However, to create the whole picture of pathological changes, investigators collect spectral information from patients in vivo or they study different tumor models to obtain objective information for fluorescent properties of every kind of healthy and diseased tissue. Therefore, it is very important to find the most appropriate, and close to the human skin, animal samples from the fluorescence point of view, which will allow the extrapolation of the animal data to human spectroscopic diagnostics. METHODS: In the present work, we examined the autofluorescence properties of different animal skin tissues, which are considered as the most common skin models. A nitrogen laser was used as an excitation source. Samples of healthy mouse, chicken and pig skin in vivo and/or ex vivo were studied and were compared with results obtained from investigations of healthy human skin in vivo. RESULTS AND CONCLUSION: Specific features of the recorded spectra are discussed and the possible origin of the obtained fluorescence signals is proposed. Quantitative evaluation of data extrapolation for each skin type is also depicted. 相似文献
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目的 对核工业地质勘查计量站的 8个圆柱型环境电离辐射体源和两个本底模型上方不同高度处的空气吸收剂量率进行较为准确的定值。方法 采用蒙特卡罗软件MCNP ,对上述环境电离辐射体源和本底模型上方的空气吸收剂量率进行了模拟计算 ,采用 1台高气压电离室剂量率仪对各环境电离辐射体源和本底模型上方不同高度处的空气吸收剂量率进行了实测 ,模拟计算结果与实测结果以及其他工作者过去所作的剂量率测量和计算结果进行了比较。结果 MC模拟计算值与其他工作者得到的空气吸收剂量率理论值吻合较好 ,最大偏差小于 10 % ,一般偏差小于±5 %。结论 只要各种输入参数准确 ,采用MC模拟计算 ,可以得到辐射体源和本底模型上方不同高度处较准确 (3%不确定度 )的空气吸收剂量率模拟计算值。 相似文献
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李剑锋 《世界中西医结合杂志》2008,3(3):165-166
肠易激综合征(IBS)是一组持续存在或反复发作的临床症候群,主要症状有腹痛、腹胀、排便习惯改变和大便性状异常、黏液便等,经检查排除可引起这些症状的器质性疾病。临床分为肝木乘脾型腹泻、脾胃虚弱型腹泻、脾肾阳虚型腹泻、肝郁脾虚型便秘四型,根据临床辨证分别施以不同治法,不同方药治疗,有显著疗效。同时,教育患者平时养成良好的饮食卫生习惯,不饮生水,不食生冷瓜果,忌食辛辣、油腻、肥厚之品,保持心情舒畅,怡情悦志,注意保暖,可加强疗效,防止复发。 相似文献
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70.
目的:探讨胰腺癌与癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的改变及其蛋白表达的特点,以及其与胰腺癌发生发展的关系。方法:分别采用免疫组化SP法及甲基化特异PCR(MSP)检测46例人胰腺癌和癌旁组织中p16基因表达及其甲基化的水平,并结合临床资料进行分析。结果:胰腺癌中p16蛋白表达率为41.3%(19/46),而癌旁组织表达率为95.7%(44/46),两者有差异显著性(P<0.01)。p16蛋白阳性的19例胰腺癌标本中均未检出基因甲基化;p16蛋白缺失的27例标本中有18例检出基因甲基化,甲基化率为39.1%。p16基因甲基化与蛋白缺失有明显关系(P<0.05)。p16基因表达及其启动子区甲基化的发生率与胰腺癌的大小,患者性别﹑年龄的差异无显著意义(P>0.05),但与组织分化程度﹑淋巴结转移﹑PTNM分期有显著意义(P<0.05)。结论:p16基因启动子的异常甲基化可影响p16蛋白的表达,它们与胰腺癌的发生发展有关;p16甲基化和蛋白表达可能成为胰腺癌诊断及预后的候选标志物之一。 相似文献