Quantitation of dolastatin-10 using HPLC/electrospray ionization mass spectrometry: application in a phase I clinical trial

A highly sensitive and specific assay for the quantitation of the anticancer agent dolastatin-10 (DOL-10) in human plasma is described. The method was based on the use of electrospray ionization-high-performance liquid chromatography/mass spectrometry (ESP-LC/MS). The analytical procedure involved extraction of plasma samples containing DOL-10 and the internal standard (DOL-15) with n-butyl chloride, which was then evaporated under nitrogen. The residue was dissolved in 50 μl mobile phase and 10 μl was subjected to ESP-LC/MS analysis using a C₁₈ microbore column. A linear gradient using water/acetonitrile was used to keep the retention times of the analytes of interest under 5 min. The method exhibited a linear range from 0.005 to 50 ng/ml with a lower limit of quantitation (LLQ) at 0.005 ng/ml. Absolute recoveries of extracted samples in the 85–90% range were obtained. The method's accuracy (≤5% relative error) and precision (≤10% CV) were well within industry standards. The analytical procedure was applied to extract DOL-10 metabolites from samples obtained following incubation of the drug with an activated S9 rat liver preparation. Two metabolic products were detected and were tentatively identified as a N-demethyl-DOL-10 and hydroxy-DOL-10. Structural assignments were made based on the fragmentation patterns obtained using the electrospray source to produce collision-induced dissociation (CID). The method was also applied to the measurement of DOL-10 in the plasma of patients treated with this drug. Preliminary investigation of the pharmacokinetics suggested that drug distribution and elimination may be best described by a three-compartment model with t_1/2α = 0.087 h, t_1/2β = 0.69 h and t_1/2γ = 8.0 h. Plasma clearance was 3.7 l/h per m². Received: 17 March 1997 / Accepted: 13 June 1997     

针刺对单纯性肥胖症患者TNF-α和Resistin水平的影响

目的:明确针刺治疗单纯性肥胖的机理,为治疗的客观化提供依据。方法:取足阳明胃经穴位梁丘、丰隆、天枢施泻法,足太阴脾经穴位箕门、腹结、大横、阴陵泉、血海施以补法,同时配以任脉穴位下脘、中脘平补平泻,治疗单纯性肥胖患者,并与正常人进行对照研究。观察单纯性肥胖患者治疗前后的体重指数(BMI)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、抗肿瘤坏死因子(TNF-α)、抵抗素(Resistin)、空腹血糖(FBG)的变化。结果:单纯性肥胖患者不同程度地存在胰岛素抵抗,其TNF-α、Resistin血浆浓度较正常对照组明显升高,且与胰岛素抵抗指数存在一定的相关性;经过针刺治疗,患者的胰岛素抵抗状况得以改善,TNF-α、Resistin浓度明显降低。结论:针对单纯性肥胖脾虚、胃热、痰结病机选穴的针刺治疗通过降低可溶性TNF-α、Resistin浓度,影响糖与脂的代谢,改善患者的胰岛素抵抗状态,起到治疗单纯性肥胖的作用。     

慢性肾功能衰竭血液透析前后血清TGF-α和IGF-Ⅱ水平变化

目的探讨慢性肾功能衰竭患者血液透析前后TG F-α和IG F-Ⅱ含量变化与血液透析的关系。方法采用放射免疫分析法,检测45例慢性肾功能衰竭血液透析患者和30名正常人TGF-α和IG F-Ⅱ水平,并进行相关分析。结果患者血清TG F-α含量显著低于正常对照组(P<0.01),而透析后显著高于透析前(P<0.01);IG F-Ⅱ含量显著高于正常对照组(P<0.01),而透析前后无显著性差异(P>0.05)。患者12h尿液中TG F-α和IGF-Ⅱ含量均显著高于正常对照组(P<0.01和P<0.05)。结论TGF-α和IGF-Ⅱ两种多肽生长因子参与了机体自稳功能的调节,在慢性肾功能衰竭患者血液透析过程中,TG F-α和IGF-Ⅱ水平变化起着重要的病理生理作用。     

荧光分光光度法检测裸鼠移植瘤组织中阿霉素浓度

目的建立裸鼠移植瘤组织中阿霉(Dox)素浓度的荧光分光光度法检测方法。方法建立KB、KBv200细胞裸鼠移植瘤模型,经鼠尾静脉给予不同剂量阿霉素,3h后,处死裸鼠,分离及匀浆肿瘤组织,用含0.3mol·L-1HCl的60%乙醇抽提,离心取上清液,用荧光分光光度计在λex/em为470/590nm测定其荧光值,通过标准曲线方程计算阿霉素浓度。结果样本扫描未见杂峰,日内精密度<6.4%,日间精密度小于5.7%,阿霉素于肿瘤组织匀浆中抽提回收率>75.9%,KB细胞移植瘤组织中阿霉素浓度为KBv200的2.53～4.54倍。结论本方法专属性高,快速、简便,结果准确可靠,适用于裸鼠移植瘤组织中Dox药代动力学研究。     

电喷雾离子化多级质谱对几种氨基糖苷类抗生素特征碎片的分析

应用电喷雾离子化多级质谱法分析几种含2-脱氧链霉胺的氨基糖苷类抗生索的碎片离子，并对它们的裂解规律进行分析归纳。除其它特征碎片离子峰外，所有测试样品的质谱图中都存在质荷比为163．1的归属于2-脱氧链霉胺的碎片离子峰。这些裂解规律可应用于微生物新药筛选中早期快速鉴别含2-脱氧链霉胺的氩基糖苷类抗生索，对氨基糖苷类抗生索的生产、质量监控以及在环境和食品中的微量检测也有指导意义。     

水中砷、汞的双道原子荧光测定法

目的 探讨水中砷、汞的双道原子荧光测定法。方法 酸性条件下，砷、汞能同时与新生态氢气生成氢化物，采用氢化物原子荧光光度法进行测定，砷、汞灯电流均为80mA，砷的主一辅电流之比为50：30，采用1％硼氢化钾的0．2％氢氧化钠溶液作为还原剂。结果 砷在0-10μg／L内线性良好，r=0．9999，相对标准偏差为2．0％-5．3％，回收率为84％-113％。汞在0-5μg/L内线性良好，r=0．9993，相对标准偏差为1．9％-5．7％，回收率为84％-107％。结论 该方法灵敏度高，操作简便快捷，结果准确可靠，可同时测定水中砷和汞。     

液相色谱-离子阱质谱联用法建立留坝西洋参药材特征图谱研究

目的建立留坝西洋参药材皂苷成分的特征图谱。方法通过固相萃取小柱预处理样品,电喷雾质谱正离子模式全扫描法检测。结果从西洋参药材总提物的正离子全扫描总离子流图中选择了3个具有代表性的强峰,建立了西洋参药材皂苷成分的特征对应图谱。结论该方法有较好的重现性,能准确分析、鉴别西洋参药材。     

八味地黄汤各药味对附子生物碱影响的电喷雾质谱研究

目的以八味地黄汤为研究对象,考察各药味对附子生物碱的影响规律,揭示附子配伍组方的科学内涵,为科学阐释八味地黄汤配伍规律提供化学依据。方法利用电喷雾质谱技术分别对八味地黄汤,附子加山茱萸、山药、肉桂、丹皮、泽泻、地黄、茯苓共煎液以及次乌头碱加山茱萸、山药共煎液进行系统考察。结果次乌头碱加山药、山茱萸,附子加山药等共煎液中次乌头碱含量较高;八味地黄汤、附子加山茱萸共煎液中次乌头碱含量较低;肉桂、丹皮、泽泻、地黄、茯苓等对附子生物碱的影响不明显。结论八味地黄汤中乌头碱和中乌头碱水解和溶出比较完全,次乌头碱的含量较少,次乌头碱的减少是由于水解以及溶出受到抑制导致。其中山茱萸对制附子起减毒作用,其减毒机制主要是抑制了制附子中次乌头碱的溶出。而山药则能导致附子毒性增加。     

氢化物发生--原子荧光光谱法测定铅的研究(Ⅰ)铁氰化钾试剂的影响

〔目的〕研究HCl -K3[Fe(CN) 6 ] -KBH4 体系氢化物发生———原子荧光光谱法测定铅时 ,铁氰化钾试剂质量对分析性能的影响。〔方法〕观察铁氰化钾空白溶液荧光信号的变化 ,研究空白荧光信号产生的原因及降低的方法。〔结果〕证实铁氰化钾试剂中杂质铅是导致试剂空白溶液荧光信号产生的原因之一。〔结论〕分析纯铁氰化钾中含有杂质铅 ,给分析过程中带入的偶然误差是产生噪声的离散源 ,影响检出限。活性碳可有效吸附分离铁氰化钾试液中的铅 ,降低空白溶液的荧光信号 ,改善分析方法检出限     

气相色谱-质谱联用法分析角叉菜中的化学成分

为探讨角叉菜生物活性物质，分别采用氯仿：甲醇混合溶剂和乙醇以不同方式对角叉菜进行提取，用气相色谱-质谱联用仪分析了提取物的化学组成及其相对含量。