假单胞菌发酵制备精氨酸脱亚胺酶

采用假单胞菌（Pseudomonas sp．）发酵制备精氨酸脱亚胺酶，优化发酵培养基配方及培养条件，以葡萄糖为碳源，酵母膏和蛋白胨为氮源，30℃振荡培养20h时，发酵液中精氨酸脱亚胺酶的酶活力可达2．17u／ml。向HepG2肝癌细胞培养液中加入酶粗品0．5u／ml，对肿瘤细胞的生长抑制率为93．4％。     

抗生素的不良反应

抗生素是指某些微生物(细菌、真菌、放线菌等)在其生活过程中产生的具有抗病原体作用和其他活性的一类物质.抗生素的生产除了从微生物的培养液中提取以外,还用半合成或合成法制造.自青霉素应用于临床至今,已发现数千种抗生素,常用于临床的有近百种.抗生素挽救了无数生命,但其在临床应用也引发了一些不良反应[1].抗生素药物不良反应的临床危害后果是严重的.     

广金钱草根腐病病原生物学特性研究

目的:研究温度、pH、培养基、碳源和光照对广金钱草茄病镰刀菌生长、产孢以及孢子萌发的影响。方法:设置不同处理,每处理接3个平板,每项实验重复3次。结果:茄病镰刀菌生长温度范围为12～37℃,最适为20～30℃。茄病镰刀菌在pH3.0～14.0范围内均能生长,最适pH为9.0～11.0。PDA、PSA、OMA和Czapek培养基对茄病镰刀菌生长影响不显著,但对孢子萌发率有较大影响,在Czapek培养液中孢子萌发率最高。不同碳源Czapek培养基上茄病镰刀菌生长和孢子萌发率明显不同,以蔗糖和麦芽糖为碳源的培养基菌落扩展最快,其次是葡萄糖和乳糖,果糖最差,同时以果糖、葡萄糖、麦芽糖和蔗糖为碳源的Czapek培养液孢子萌发最高,而乳糖较低。光照对茄病镰刀菌菌丝生长没有影响,但有利于产孢。     

Ang Ⅱ诱导的心肌肥大中c-fos,c-jun mRNA表达变化及丹参酮ⅡA的影响

目的:在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞c-fog,c-junmRNA表达变化及丹参酮ⅡA的影响.方法:取12只1 d龄新生Wistar乳鼠,进行心肌细胞培养,分为正常对照组,AngⅡ(10-6 mol·L-1)组,AngⅡ(10-6mol·L-1)+丹参酮ⅡA(10-8g·L-1)组,AngⅡ(10-6mol·L-1)+缬沙坦(10-mol·L-1)组,丹参酮ⅡA(10-1g·L-1)组,缬沙坦(10-6mol·L-1)组.相差显微镜测量心肌细胞大小,[3H]一亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率;RT-PCR检测心肌细胞c-fog,c-jun mRNA的表达.结果:在培养液中加入AngⅡ作用30 min后,心肌细胞c-fos,c-jun mRNA的表达显著增强(P<0.01);AngⅡ作用24 h后,AngⅡ组心肌细胞蛋白质合成速率较对照组明显增加(P<0.01);AngⅡ持续作用7 d后,AngⅡ组心肌细胞直径较对照组显著增大(P<0.05).采用丹参酮ⅡA或缬沙坦干预,二者可抑制AngⅡ诱导的c.fog,c-jun mRNA的表达增强(P<0.01)、心肌细胞蛋白质合成速率的增加(P<0.01)及心肌细胞直径增大(P<0.05).结论:丹参酮ⅡA可通过抑制AngⅡ诱导的心肌细胞c-fos,c-jun的表达增强,减轻心肌肥大.     

蜕膜细胞条件培养液中TNF-α及EGF对卵巢癌细胞侵袭基因uPA/PAI-1表达的影响

目的 研究蜕膜细胞条件培养液(decidual cell conditioned media,DCM)中肿瘤坏死因子(TNF-α)及表皮生长因子(EGF)对卵巢癌细胞株(COC1)侵袭基因尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)/纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)表达的影响.方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取蜕膜细胞条件培养液(DCM),分别将加有TNF抗体及EGF抗体的DCM处理卵巢癌细胞株(COC1),利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭基因uPA/PAI-1的表达进行分析.结果 COC1表达PAI-1,不表达uPA.与DCM组比较,TNF-α抗体组可以使COC21 PAI-1mRNA的表达上调,二者之间差异有显著性(P＜0.01).与DCM组比较,FGF抗体组PAI-1mRNA的表达不明显,呈下调的趋势,二者之间亦差异有显著性(P＜0.01).结论 早孕DCM中TNF-α降低了DCM抑制COC1纤溶酶原系统作用的能力;而EGF增加了DCM的上述能力.同时说明纤溶酶原系统在COC1的侵袭能力方面不起主导作用.     

人视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜干细胞生物学特性的影响

目的观察人胚视网膜色素上皮细胞条件培养液(HRPE-CM)对人胚视网膜干细胞(HRSCs)体外生物学特性的影响。方法利用HRPE-CM模拟体内环境,分为对照组、表皮生长因子(EGF) 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)组和HRPE-CM组。体外培养HRSCs,通过细胞计数方法比较不同环境条件对HRSCs体外生物学特性的影响,并进一步鉴定其神经干细胞特性。结果与对照组比较,HRPE-CM对HRSCs有明显的促增殖作用(P<0.01);与EGF bFGF组相比较,HRPE-CM的促增殖作用也更为强大(P<0.01)。在HRPE-CM中培养的原代和子代HRSCs均表达Nestin,具有自我更新能力和多向分化潜能。结论HRPE-CM对HRSCs的增殖能力具有明显的促进作用,并且能很好地维持其神经干细胞特性。     

正常骨髓基质细胞促进ATRA分化HL-60细胞的研究

目的 研究正常骨髓基质细胞(BMSCs)对全反式维甲酸(ATRA)诱导分化HL-60细胞的影响及其可能机制.方法 体外分离培养BMSCs,与HL-60细胞共培养.ATRA诱导悬浮的HL-60细胞分化,检测甲基蓝四氮唑(NBT)还原率,流式细胞仪测定CD11b、CD33抗原表达.结果 BMSCs与HL-60细胞共培养体系中,悬浮的HL-60细胞NBT还原率由原单独ATRA诱导分化的(84.36±4.22)%升高到(93.23±2.66)%(P＜0.05);CD11b表达由(65.97±3.18)%增至(90.54±0.97)%(P＜0.01);CD33表达由(78.79±0.83)%降至(52.25±2.21)%(P＜0.01).而基质细胞条件培养液(SCM)共培养体系中以上指标的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 BMSCs增强ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用,并非通过分泌可溶性细胞因子,而可能是通过BMSCs与HL-60细胞间的相互作用,从而起到促进作用.     

人TNFα基因转染的人肝癌细胞稳定高表达克隆SMMC7721-TNF体外抗瘤活性及其可能机制的初步研究

应用逆转录病毒载体介导人TNFα基因感染人肝癌细胞株SMMC7721，经G418筛选获得一稳定高表达SMMC7721-TNF，观察SMMC7721-TNF细胞及其培养液上清对SMMC7721和BEL7404肝癌细胞的抗瘤效应，结果表明SMMC7721-TNFα细胞本身对两种细胞均无明显的杀伤作用，但其培养液上清对这两种细胞均具有明显的抑制作用，     

在应用生物反应器培养人参不定根中氧气、二氧化碳和乙烯对植物生长和生物活性物质产生的作用

关于水飞蓟素生物合成及其调节的研究鲜有报道。鉴于钙在水飞蓟Silybum marianum L.Gaertn细胞体系中具负相调节的作用,以及为进一步证实钙离子对水飞蓟素可能的调节作用,作者将不同的钙效应物加至水飞蓟细胞培养物中进行研究。将该植物胚轴在含有Murashige和Skoog介质(含有30g     

自体胸腔积液上清作为培养液对肿瘤浸润淋巴细胞生长的影响

目的：观察自体胸腔积液上清作为培养液对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)生长的影响．方法：恶性胸腔积液中的TIL经贴壁法分离后，分别采用含有细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、CD3单克隆抗体(OKT3)及植物血球凝集素(PHA)的自体胸腔积液上清及含10％人AB型血清的RPMIl640进行培养，比较两种培养液对TIL的增殖速度、培养前后免疫表型变化和对自体肿瘤细胞的杀伤活性。结果：培养2周，经统计学比较发现，自体胸腔积液上清作为培养液对TIL的生长速度、免疫表型和对自体肿瘤细胞杀伤活性的影响与应用含10％人AB型血清的RPMIl640培养液培养无差异。结论：自体胸腔积液上清作为培养液培养TIL是可行的。为自体TIL疗法治疗恶性胸腔积液提供理论基础。