腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

CD10表达在甲状腺滤泡性癌和滤泡型乳头状癌诊断中的作用

目的研究CD10表达在甲状腺滤泡性癌和滤泡型乳头状癌诊断中的作用。方法收集70例甲状腺良、恶性病变组织，其中包括15例滤泡性腺瘤、15例腺瘤性甲状腺肿、30例乳头状癌（包括9例滤泡型乳头状癌）和10例滤泡性癌，采用免疫组织化学方法检测CD10在上述组织中的表达。结果9例滤泡型乳头状癌中，7例表达CD10（77．8％），10例滤泡性癌中8例表达CD10（80．0％）；CD10在非滤泡型乳头状癌、滤泡性腺瘤、腺瘤性甲状腺肿和正常甲状腺组织中均不表达。结论对CD10表达的检测有助于对甲状腺滤泡性癌和滤泡型乳头状癌的诊断。     

真菌源性CD::UPRT联合基因治疗脑胶质瘤的实验研究

目的研究5-FC/CD：：UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6的杀伤效应。方法扩增yCD：：UPRT融合基因并构建含yCD：：UPRT基因的重组表达载体；载体转染包装细胞PT67,所获重组病毒转染胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆；用MTT法检测不同浓度5-FC对CD：：UPRT转基因细胞的杀伤效应。结果PCR法扩增出全长CD：：UPRT基因,经测序证实序列正确,重组逆转录病毒表达载体pLXSN-yCD：：UPRT经双酶切获目的条带,载体转染包装细胞获重组逆转录病毒(滴度达3．5×10~6CFU/ml)并转染C6,经筛选获得转基因阳性克隆C6-yCD：：UPRT细胞株,检测显示该细胞株有效表达目的基因。当5-FC终浓度≥10μmol/L时,实验组与对照组的细胞增殖力出现显著差异(P＜0．01),5-FC作用96h后电镜观察到凋亡小体。结论5-FC/yCD：：UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6有明显的杀伤作用。     

激素替代治疗对绝经后Ⅱ型糖尿病和高血压患者肾脏微血管病变的影响

目的 :探讨激素替代治疗对绝经后Ⅱ型糖尿病和高血压患者肾脏微血管病变的影响。方法 :36例患有Ⅱ型糖尿病和高血压的绝经后妇女随机分为治疗组和安慰剂组各 18例 ,采用双盲法予口服克龄蒙或安慰剂 1片 /日 ,共 4 5个周期 ,测量用药前后各参数值并进行比较及线性相关分析。结果 :治疗组用药前后 2 4小时尿蛋白定量由 ( 0 4 45± 0 0 36 )g降到 ( 0 36 1± 0 0 32 ) g(P <0 0 1) ,内生肌酐清除率由 ( 92 0± 5 2 )ml/min增到 ( 99 1± 4 8)ml/min (P <0 0 5) ,空腹血糖由 ( 7 0 2± 0 4 3)mmol/L降到 ( 6 55± 0 31)mmol/L(P <0 0 5) ,血清总胆固醇由 ( 6 6 6±0 2 8)mmol/L降到 ( 5 71± 0 71)mmol/L(P <0 0 1) ,血压无明显改变。 2 4小时尿蛋白定量和内生肌酐清除率与其他参数间无显著相关性。安慰剂组用药前后各项指标无明显改变。结论 :激素替代治疗对绝经后Ⅱ型糖尿病和高血压患者肾脏微血管病变有改善作用     

Multiple sclerosis patients have reduced HLA class II-restricted cytotoxic responses specific for both measles and herpes virus

It has been previously demonstrated that the generation of measles virus (MV)-specific cytotoxicity (CTL) is reduced in patients with multiple sclerosis (MS). By contrast, CTL specific for influenza virus (FLU) and mumps virus is normal. It is uncertain if reduced CTL is limited to MV in MS patients, or if reduced CTL may be found to other viruses as well. Since MV-specific CTL is predominantly restricted by HLA class II molecules, while FLU-specific and mumps-specific CTL have large HLA class I-restricted components, reduced MV-specific CTL may reflect a broader reduction in HLA class II-restricted CTL in patients with MS. To examine this question we studied the generation of CTL specific for herpes simplex virus type I (HSV). HSV-specific CTL, like MV-specific CTL is predominantly restricted by HLA class II molecules. We found that patients with MS had reduced generation of CTL to both MV and HSV. Most, but not all patients who had reduced generation of CTL to one virus also had a similar impairment with respect to the second virus. Some patients, however, had a reduction in the generation of CTL only to MV or to HSV. These findings extend our earlier observations regarding reduced MV-specific CTL in patients with MS to a second HLA class II-restricted virus, HSV. Such a reduction may reflect discrete impairments in immune function to separate viruses, possibly those that are associated with viral persistence, or may reflect a more generalized defect in HLA class II-restricted CTL.     

强直性脊柱炎患者外周血CD62P的表达

目的探讨剖宫产指征的变化情况，分析影响剖宫产率的因素。方法 回顾性分析1393例剖宫产患者的临床资料。结果2年的平均剖宫产率为66．7％，其中2004年的剖宫产率为59．9％，2005年的剖富产率为72．2％，差异有统计学意义（P〈0．05）。剖宫产率的主要影响因素依次为社会因素（29．43％）、胎儿宫内窘迫（25．13％）、胎位异常（9．62％）、巨大胎儿（7．25％）、中至重度妊娠高血压综合征（6．25％）。结论剖宫产率的上升不只是一个纯医学问题，社会因素使剖宫产指征相对扩大，只有合理掌握剖宫产指征，通过医患双方、社会的共同努力，才能更好地降低剖宫产率。     

红细胞调控白细胞免疫功能新的自然实验研究体系

目的用血液免疫反应路线图实验体系评估红细胞在白细胞免疫活性中的作用。方法将0·3ml血浆加入0·2ml全血细胞悬液(全血细胞组)或0·2ml白细胞悬液(白细胞组)中,37℃温育1h,用免疫酶联法测定IL-8和IL-12水平,流式细胞仪测定白细胞膜CD4、CD8、CD35和CXCR4表达量。结果全血细胞组IL-8和IL-12水平(分别为5·96±4·26、9·84±2·23ρB·pg-1·ml-1)明显低于白细胞组(分别为15·09±9·86、13·59±3·69ρB·pg-1·ml-1,P<0·05),淋巴细胞CD4、CD35、CXCR4表达量(分别为37·79±12·00、154·66±70·00、34·40±20·45)明显高于白细胞组(分别为18·54±11·32、83·26±35·99、16·69±11·09,P<0.01),粒细胞CD35表达量(603·63±257·64)明显高于白细胞组(384·86±174·16,P<0.01)。成人全血细胞组淋巴细胞和粒细胞CD35和CXCR4表达量明显高于脐血全血细胞组(P<0·05或P<0·01)。结论红细胞是白细胞(包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、树突状细胞、粒细胞等)免疫功能的调控者和指导者,脐血红细胞免疫调节功能明显下降;本研究为红细胞免疫调控活性测定提供了新的近似自然的方法。     

调节性CD4+T细胞在大鼠自发肝移植耐受中的作用

目的 探讨在肝移植的自发耐受模型中，调节性CD4^＋T细胞的免疫抑制作用机制。方法 利用近交系大鼠从Lewis（LEW）到Wistar Furth（WF）的肝移植组合，对移植后不同时期的宿主注射抗CD4的单克隆抗体（Anti-CD4mAb），然后抽血检测丙氨酸氨基转氨酶（ALT）的动态变化；并结合细胞毒性T淋巴细胞（CTL）试验了解宿主脾细胞中T细胞亚群的动态改变。结果 对肝移植自然生存的宿主注射Afiti—CD4mAb后，术后第21天、42天均能够诱导出肝损害（排斥反应），但第56天、100天以上的则未能诱导出来，且该损害能被抗CD8单克隆抗体阻断。另外CTL试验显示宿主的脾细胞中，初始型CTL前体细胞在移植56d后未能检测出来。结论 在自发性肝耐受模型中。宿主术后早期存在由CD4^＋T细胞介导的下调原始效应性T细胞的作用机制。