尿液干化学分析干扰因素及排除方法

干化学尿液分析仪是将检测尿中各种成分的试剂固相在纸上作为试纸，采用反射光原理测定试纸颜色变化的仪器，现已被临床广泛使用。它具有操作简便，检测项目多，诊断过筛面大，效率高等明显优点，但其结果易受许多因素的影响。现就尿液干化学分析的干扰因素及排除方法综述……     

心脏术后干扰性房室脱节与房室传导阻滞并存7例报告

房室传导阻滞是临床上常见的一种心脏传导阻滞 ,而干扰性房室脱节则是造成复杂心律失常的原因之一。本文选取 7例心脏手术后病例 ,探讨干扰性房室脱节与房室传导阻滞并存的心电现象。1　临床资料本组男性 4例 ,女性 3例。年龄 1～ 2 2岁 ,平均 8岁 ,均为 2 0 0 0年收治的病人。临床诊断 :室间隔缺损 1例 ,大动脉转位、室间隔缺损、肺动脉瓣狭窄 1例 ,法乐氏四联症 1例、心内膜垫缺损 2例 ,房间隔缺损、室间隔缺损 1例 ,二尖瓣狭窄、室间隔缺损 1例。心电图表现 :术前心电图 :右室肥大 4例 ,完全性右束支传导阻滞 1例 ,心房肥大、右心室肥大 …     

反义：衰而未败

20年来,反义核酸药物的发展非常缓慢,仅有一个反义药物进入市场,其他大部分都在Ⅲ期临床试验中遭遇失败,有关反义新药的申请也很快被FDA驳回。人们开始把目光投向竞争RNA技术平台尤其是小干扰RNA,这是否意味着反义核酸药物没有发展前途了呢?本文就反义药物的发展现状、发展前途以及可能突破现状的切入点作了详细分析,为反义药物的继续发展指出了方向。     

干扰电向量方法治疗颈肩综合症的临床观察

颈肩综合症是临床上常见的软组织损伤疾病之一，它是以颈椎、胸椎等小关节紊乱，骨质增生，或其周围的肌肉、韧带劳损所造成的颈后及肩背部疼痛不适及颈部功能障碍的一系列症候群。我院自2006年应用干扰电向量方法治疗颈肩综合症86例，效果满意，报告如下：     

质粒表达的短发夹状RNA特异性抑制鼻咽癌细胞的增殖

目的观察pmU6-sibclD重组体在细胞内表达的bcl-xL短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)能否特异地抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖.方法将自行构建的表达短发夹状RNA的重组质粒转染到人鼻咽癌CNE-2Z细胞株、卵巢癌HO-8910细胞株和正常人类肝脏L-O2细胞株中,流式细胞仪检测转染率,MTT比色法检测细胞的生长抑制率.结果bcl-xLshRNA能特异地抑制CNE-2Z细胞株的生长增殖,而对正常人类肝脏细胞株的生长增殖和HO-8910细胞中的绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表达无抑制作用.结论pmU6-sibclD重组体在细胞内表达的短发夹状RNA能特异性抑制鼻咽癌细胞的生长增殖,为质粒介导的RNAi技术运用于肿瘤的基因治疗提供一定的理论依据.     

RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。     

清热通痹片治疗类风湿性关节炎

雷公藤治疗类风湿性关节炎（RA）疗效显著,被推荐为治疗RA的二线首选药物[1],已在临床上广泛应用,但其毒副作用常常干扰治疗。我科2007年9月～2008年4月应用低毒高效的清热通痹片治疗RA患者40例,疗效满意,现报道如下。     

RNA干扰抑制PC-3细胞survivin基因表达并诱导细胞凋亡的实验研究

目的:研究RNA干扰抑制人前列腺癌PC-3细胞survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡的效果。方法:设计、构建针对survivin基因的RNAi表达载体,分别以质粒A、B组,阴性序列组和空白对照E组用脂质体法转染PC-3细胞,应用RT-PCR及Western印迹、流式细胞术检测其对survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡的效果。结果:各组细胞survivin蛋白的表达强度分别为(18.94±0.63)%、(16.35±0.23)%、(46.41±0.76)%、(46.20±1.47)%。各组细胞中survivin mRNA的表达强度分别为(27.94±1.43)%、(24.51±1.37)%、(49.46±0.71)%、(48.49±1.32)%。各组细胞凋亡率分别为(12.80±1.33)%、(16.48±1.00)%、(3.03±0.62)%、(2.96±0.41)%。统计学表明构建的两种阳性表达载体均有效抑制了survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡。结论:RNAi可有效抑制PC-3细胞survivin mRNA和蛋白表达,并诱导细胞凋亡。     

运用siRNA建立稳定低表达IGF1R基因的肝癌细胞株的实验研究

目的运用siRNA技术在肝癌细胞株中建立稳定低表达人胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)基因的细胞株。方法构建包含封闭IGF1R基因的真核表达载体pSUPER-IGF1R-siRNA,转染SMMC7721和Hep3B细胞,G418筛选表达稳定的细胞株。通过RT-PCR、Western-blot分析与鉴定IGF1R mRNA和蛋白及cyclin D1、cyclinB1蛋白的表达,并绘制细胞生长曲线。结果在SMMC7721和Hep3B细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株,其生长明显减慢(P<0.05),且其cyclinD1表达亦明显下降(P<0.05)。结论pSUPER-IGF1R-siRNA能抑制SMMC7721和Hep3B细胞的生长。     

白细胞粘附作用对ELISA检测HBsAg干扰现象的探讨

目的 探讨在ELISA检测HBsAg试验中，标本混入WBC后，WBC的粘附现象对试验结果的干扰。方法 观察WBC粘附现象对测定结果的干扰情况，以及血浆中WBC含量与干扰程度的关系，同时采用增加洗涤次数的方法对抗WBC粘附的效果观察。结果 标本混入WBC，WBC在反应板内发生粘附。WBC的中性粒细胞含过氧化物酶对试验结果造成干扰；标本中单位体积WBC含量与WBC的粘附量不成正比，但WBC的有效粘附数与OD值直接相关，粘附量越多，OD值越高；且WBC的粘附经洗涤10次也未能完全洗脱。结论 在ELISA检测HBsAg工作中应注意WBC对试验产生的非特异性干扰，采用多种方法防止WBC的混入。