真菌源性CD::UPRT联合基因治疗脑胶质瘤的实验研究

目的研究5-FC/CD：：UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6的杀伤效应。方法扩增yCD：：UPRT融合基因并构建含yCD：：UPRT基因的重组表达载体；载体转染包装细胞PT67,所获重组病毒转染胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆；用MTT法检测不同浓度5-FC对CD：：UPRT转基因细胞的杀伤效应。结果PCR法扩增出全长CD：：UPRT基因,经测序证实序列正确,重组逆转录病毒表达载体pLXSN-yCD：：UPRT经双酶切获目的条带,载体转染包装细胞获重组逆转录病毒(滴度达3．5×10~6CFU/ml)并转染C6,经筛选获得转基因阳性克隆C6-yCD：：UPRT细胞株,检测显示该细胞株有效表达目的基因。当5-FC终浓度≥10μmol/L时,实验组与对照组的细胞增殖力出现显著差异(P＜0．01),5-FC作用96h后电镜观察到凋亡小体。结论5-FC/yCD：：UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6有明显的杀伤作用。     

可有效抑制HIV的抗体结构已被确定

由来自于Scripps研究所和其他几个研究机构的研究人员联合组成的研究小组近日确定一种罕见的人类中和抗体的结构；该抗体可有效地抑制人免疫缺陷病毒,即HIV。     

热休克对肝癌细胞HSP70、gp96表达的影响及与细胞周期关系

与肿瘤免疫密切相关的热休克蛋白（HSPs）主要有HSP70和gp96。因可诱导特异性抗肿瘤反应成为近期热点，不断有临床治疗试验报道。目前HSPs作用精确分子机制还不明确；特别是gp96，除发现其“管家”作用。还发现它在先天和获得性免疫中发挥重要调节作用。我们在不同条件下对BeL-7402肝癌细胞株的HSP70、gp96进行单项及共同表达的研究，结合细胞周期进行分析，对于HSP70、gp96表达，两者表达关联性，及其表达与细胞周期的关系进行了探讨。     

利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子—2（IGF—2）

目的；研制有生物活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子－2（rhIGF-2)。方法：将14kD hIGF-2前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒（BmNPV)转移载体pBakPAK8中，经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后，通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF-2。以BmNPV/IGF-2感染5龄家蚕幼虫，分别在蚕染后24，48，72，96，108，120h提取家蚕血淋巴液，以ELISA法测定不同时家蚕血中IGF－2浓度，采用Westernblot分析鉴定IGF－2免疫学活性，MTT法观察其对NIH3T3细胞增殖的影响。结果：ELISA测定显示，BmNPV/IGF-2感染家蚕幼虫96h后IGF－2表达率最高，每毫升血淋巴中约含IGF－2 14μg，Western-blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成7.0kD成熟hIGF-2，并对NIH3T3细胞具有良好促增殖效应，其促细胞生长能力明显优于来源于E.coli的IGF－2标准品。结论；本研究实现具有免疫学活性及生物学活性的rhIGF-2在家蚕杆状病毒表达系统的高效表达。     

X—刀治疗脑胶质瘤的临床研究

1995年10月～1996年12月，我们利用X-刀对74例脑胶质瘤进行大剂量单次照射治疗与小剂量分次照射治疗对比，并进行前瞻性研究，探讨两者对脑胶质瘤的疗效。回临床资料三．l一般资料本组74例中男49例，女25例；年龄6～79岁，平均43．8岁。大脑半球胶质瘤40例，小脑胶质瘤15例，丘脑胶质瘤7例，脑干胶质瘤9例，松果体区胶质瘤2例，脑胶质瘤病1例。肿瘤直径12～69mm，平均38．smm；体积5．1～115．scm’，平均39．Zcm’。1．2临床表现颅内压增高6例，癫清发作14例，运动障碍20例，感觉障碍Ic例，精神症状5例，共济失调5例，颅神经麻痹8例，内…     

胰液、胆汁内引流预防胰腺吻合口漏22例

本组共22例。其中男17例，女5例。年龄32～74岁，平均49．7岁。临床诊断：壶腹癌8例，胆管下端癌7例，十二指肠癌2例，胰头癌5例。施保留幽门胰十二指肠切除术17例，非保留幽门胰十二指肠切除术5例。手术方法：本组均按Child法进行消化道重建。均经小肠系膜根部后方十二指肠水平段切除后坠道提取空脑进行胰腺空肠套人式吻合，套入深度2cm。胰空肠后壁吻合3层．保证空肠壁与胰腺紧密贴合．不留腔隙。选择一根约30cm长的细硅胶管，与胰管口径匹配．该管一端剪2～3个侧孔，插入胰管     

HPV16的自然变异及其生物学行为

长期以来，人们一直以为ＨＰＶ是相当稳定的病毒，近年来发现其在自然界中存在着变异。不同地区、不同种族人群中ＨＰＶ１６变异不同，ＨＰＶ１６变异后明显影响其生物学行为。本文仅就ＨＰＶ１６变异及其生物学特性作一简单的综述。     

国产rhGH的免疫原性及其对临床疗效的影响

目的　通过测定生长激素缺乏症 (GHD)患儿用国产重组人生长激素 (recom bined hum angrowth horm one,rh GH)治疗时血清生长激素抗体 (GH- Ab)水平及其结合特性 ,探讨 rh GH的免疫原性及其对疗效的影响。方法　对 6 1例 (男 49例 ,女 12例 ) GHD患儿用国产 rh GH治疗 ,每晚睡前皮下注射 rh GH 0 .1IU /kg共6个月 ;用放射免疫法测定治疗期间患儿血清 GH- Ab水平和滴度 ,并计算抗体结合容量、亲和常数 (Ka)。结果　48%患儿 (2 9/6 1)用药后 3个月血清 GH - Ab呈阳性至试验结束时仍未消失 ,其中 2 0例抗体为弱阳性 (结合率 <10 % ) ,9例呈强阳性 (结合率 >15 % ) ;5 2 %患儿 (32 /6 1)治疗期间抗体为阴性 ;血清 GH- Ab的结合容量、Ka及滴度均为低水平 ,分别为 (0 .1～ 4.8) pmol/L、(1.7× 10 7～ 6 .5× 10 8) L /mol和 1∶ 4～ 1∶ 8。GH- Ab阳性患儿治疗后的身高、身高增长速率及身高落后于正常 SD值的变化与同期阴性者比较无统计学差异 (P>0 .0 5 )。结论　本试验所用国产 rh GH对 GHD患儿身高增长具有确切的促进作用 ,其免疫原性所导致产生的 GH - Ab未对患儿体格线性增长产生负性影响     

用荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体方法的建立

用荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体方法的建立郑履康邓丽霞张桥本课题由国家自然科学基金３９４７０６０８与中华医学基金（ＣＭＢ）资助中山医科大学遗传毒理研究室（广州５１００８９）已知非整倍体与流产、畸形及肿瘤的发生均有关系。为此，我们在国外研究基础上...     

腺病毒介导的HSV—tk基因治疗大鼠脑胶质瘤实验研究

目的：带有ＨＳＶ－ｔｋ基因的重组腺病毒（ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ）结合核苷类似物（ＮＡ）治疗大鼠Ｃ６脑胶质瘤。方法：用Ｘ－ｇａｌ染色测定ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ转染大鼠Ｃ６胶质瘤细胞的效率。用ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ／ＡＣＶ、ＧＣＶ离体及活体治疗大鼠Ｃ６胶质瘤。结果：ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ感染Ｃ６细胞效率达１００％，ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ感染Ｃ６细胞，在病毒感染复数为１０００时，ＧＣＶ和ＡＣＶ半致死剂量分别为３μｇ／ｍｌ和２０μｇ／ｍｌ，Ａｄ－ＨＣＭＶ－ｔｋ／ＡＣＶ治疗大鼠Ｃ６胶质瘤模型，大鼠生存期超过９０天，而对照组分别为１７．０±１．６天（生理盐水组）、１４．５±１．３天（ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ组），Ｐ＜０．００１。结论：重组腺病毒对靶细胞感染效率可达１００％，ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ用ＧＣＶ的杀伤Ｃ６胶质瘤细胞比ＡＣＶ强，而ＨＳＶ－ｔｋ／ＡＣＶ用腺病毒介导治疗大鼠脑肿瘤疗效显著。