2002年广东省H3N2亚型流感病毒流行的分子基础

目的 了解广东省2002年H3N2亚型流感病毒流行及抗原性变异情况。方法 用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离，用交叉血凝抑制实验对毒株进行抗原性分析；提取病毒RNA，用一步法RT-PCR扩增血凝素基因(H3A)，产物纯化后，并将其克隆到pMD18—T Vector，进行序列测定和分析。结果 2002年1-10月共获得流感病毒246株，其中H3N2亚型210株，占85．4％，H1N1亚型2株，占0．8％，B型34株，占13．8％；2002年流感流行的高峰是6月；抗原性分析显示，2002年广东省H3N2亚型流感病毒A／粤/236/2002和2001年流行株A／粤／448／2001以及目前国内代表株A／闽／151／2001的抗原比分别是5．6和4．0；其HAl区氨基酸序列和国际代表株A／悉尼／5／97同源性为94．2％，有19个氨基酸差异，其中发生在抗原决定族A、B、E上的有6个，受体结合部有3个。结论 2002年广东省流感病毒以H3N2亚型为主，其流行的分子基础是基因变异导致抗原性发生漂移。     

Detecting pediatric autoimmune neuropsychiatric disorders associated with streptococcus in children with obsessive-compulsive disorder and tics.

BACKGROUND: A subgroup of children with obsessive-compulsive and tic disorders are proposed to have an infectious trigger. The purpose of this study was to investigate the relationship between group A streptococcal titers and symptom fluctuations in children with a clinical course resembling that described for pediatric autoimmune neuropsychiatric disorders associated with streptococcus. METHODS: Twenty-five children with obsessive-compulsive disorder and/or tic disorder were evaluated for neuropsychiatric severity and group A streptococcal antibody titers (streptolysin O, deoxyribonuclease B, and carbohydrate A) at 6-week intervals for > or = six consecutive evaluations (total visits=277). RESULTS: Children with large symptom fluctuations (n=15) were compared with children without dramatic fluctuations (n=10). Co-movements of obsessive-compulsive/tic severity and group A streptococcal antibodies were assessed. In subjects with large symptom changes, positive correlations were found between streptococcal titers and obsessive-compulsive severity rating changes (p=.0130). These subjects were also more likely to have elevated group A streptococcal titers during the majority of observations (p=.001). Tic symptom exacerbations occurred more often in the fall/winter months than spring/summer months (p=.03). CONCLUSIONS: Patients with marked obsessive-compulsive/tic symptom changes may be characterized by streptococcal titer elevations and exhibit evidence of seasonal tic exacerbations.     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

Die doppler-sonographische beurteilung der funktionsfähigkeit extra-intracranieller anastomosen

Zusammenfassung Wir berichten fiber die Doppler-sonographischen Ergebnisse bei 33 Patienten mit einer Anastomose zwischen der A. temporalis superficialis and der A. cerebri media. Die Indikation zur Bypass-Operation beinhaltete rezidivierende TIA oder ein kurz zuvor erworbenes leichtes neurologisches Defizit bei angiographischem Nachweis einseitiger oder beidseitiger tiefer Obliterationen der A. carotis interna und hochgradiger Stenosen oder Verschlüsse im distalen Abschnitt der A. carotis interna bzw. im proximalen Abschnitt der A. cerebri media. Die Funktionsfahigkeit der Anastomose wurde überpriift durch die Berechnung der modifizier ten Pourcelot-Indices (relative enddiastolische Strömungsgeschwindigkeit) der A. temporalis superficialis praeauriculär und am Bohrlochrand Bowie durch den EinfluB der intermittierenden Kompression des den Bypass-versorgenden Gefäßes auf den modifizierten Pourcelot-Index der ipsilateralen A. carotis communis. Bei allen Patienten mit funktionsfahigen Anastomosen, definiert durch einen modifizierten Pourcelot-Index von zumindest 0,20 am Bohrlochrand, kam es zu einer Reduktion dieses Parameters um durchschnittlich 0,08 an der A. carotis communis bei kurzfristiger Kompression des den Bypass-versorgenden Astes. Bei den 18 Patienten mit unilateraler Obliteration der A. carotis interna war der Bypass über-wiegend dann funktionsfähig, wenn die summierten modifizierten Pourcelot-Indices der verbliebenen hirnversorgenden Gefäße um zumindest 10% gegenüber einem vergleichbaren Normalkollektiv reduziert waren. Das Vorhandensein bzw. das Fehlen von Ophthalmica-Kollateralen hatte dabei keinen Einfluß auf den Prozentsatz der funktionsfahigen Anastomosen in diesen Untergruppen. Bei den vier Patienten mit bilateraler Obliteration der A. carotis interna war die angelegte Anastomose in jedem Fall funktionsfähig, während die Hälfte der Patienten mit Stenosen and Verschlüssen im distalen Abschnitt der Carotisstrombahn nur eine ungeniigende Bypass-Funktion zeigten. Die zwei Patienten mit einer Mediahauptstammstenose bzw. -obliteration hatten Indices von 0,45 bzw. 0,46 am Bohrlochrand als Hinweis auf die Funktionstüchtigkeit. Wir Bind der Auffassung, daß man mittels Doppler-sonographischer Kriterien die Funktionsfahigkeit einer Temporalis superficialis-Cerebri media-Anastomose überprüfen kann. Der praeoperativ berechnete summierte modifizierte Pourcelot-Index der verbliebenen hirnversorgenden Arterien kann zumindest bei uni- and bilateraler Internaobliteration als zusatzlicher Parameter herangezogen werden, um die Indikation zur Bypass-Operation zu klären.     

甲肝疾病的调查分析及预防措施

近年来，随着社会的发展、科学的进步，社会人口流动量增大，城市人口相对集中，以及文化、生活习惯的差异，使得传染性疾病呈现上升趋势。为了有效控制传染疾病的发生、发展，为预防控制工作提供一些科学依据，现在对我院3年来的相关病例进行了总结、分析如下。     

溶酶体保护蛋白/组织蛋白酶A基因敲除小鼠听力和耳形态学初步研究

目的研究溶酶体保护蛋白/组织蛋白酶A(protective protein/cathepsin A,PPCA)基因敲除小鼠听功能和耳形态学改变,探讨半乳糖唾液酸沉积症听力损害的病理生理机制。方法应用听性脑干反应(ABR)测试和颞骨连续切片,观察1月和2月龄的PPCA基因敲除纯合子(PPCA-/-)小鼠ABR反应阈和光镜下外耳、中耳及内耳形态改变,并以野生型(PPCA / )小鼠作对照。结果1月龄PPCA-/-小鼠ABR反应阈和耳形态无明显改变;2月龄时,短声和短音8、163、2 kHz反应阈较PPCA / 提高40~45 dB SPL,中耳黏膜增厚、听骨细胞囊泡化、变形和关节腔融合,血管纹增厚、螺旋神经节细胞、螺旋缘纤维细胞、前庭膜、基底膜及沿前庭阶外淋巴隙的间皮细胞囊泡化,但Corti器毛细胞及支持细胞正常。结论溶酶体保护蛋白/组织蛋白酶A缺乏可导致听力损害、中耳及耳蜗形态改变、中耳炎、听骨改变以及耳蜗螺旋神经节、血管纹、螺旋缘、前庭膜和基底膜等细胞的溶酶体储积,可能分别是传导性聋和感觉神经性聋的形成机制。     

INK4A基因及P16蛋白在辐射诱导小鼠白血病模型中的变化

目的 研究INK4A基因及编码的P16蛋白在辐射诱导的小鼠白血病模型中的改变。方法 7.0 Gy ⁶⁰Co γ射线分4次照射BALB/c小鼠建立辐射诱导的小鼠白血病模型; PCR扩增INK4A 基因第1、第2 外显子,检测等位基因纯合性缺失,甲基化敏感酶切PCR 法检测INK4A基因的甲基化发生情况,并应用PCR单链构象多态性分析方法检测碱基突变的发生;Western blot检测P16蛋白含量改变。结果 在21例白血病模型组织中,外显子2缺失5例,4例发生甲基化,有11例蛋白表达明显下降。结论 辐射诱导的小鼠白血病模型发生过程中伴有P16蛋白表达下降, INK4A基因改变以纯合性缺失和甲基化为主。     

狭叶五味子中化合物扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸体外抗乙型肝炎病毒活性研究

目的 研究从狭叶五味子Schisandra lancifolia中分离化合物扁枝杉香豆素(phyllocoumarin)和(-)-表儿茶酸[(-)-epicatechin]的体外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性.方法 为了筛选和确认扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸体外抗HBV活性,以HepG2.2.15细胞为体外研究HBV模型,分别用RPMI 1640完全培养基稀释不同质量浓度的药物作用于细胞,培养3 d后收集上清,采用MTT法检测药物对HepG2.2.15细胞的生长影响和ELISA法检测培养上清中HBsAg和HBeAg的水平,评价扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸对HBsAg和HBeAg的影响.结果 扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸具有一定的体外抗HBV活性,其细胞毒性非常小,CC_(50)均大于200μg/mL.扁枝杉香豆素具有较强的抑制HBsAg和HBeAg分泌作用.阳性对照药物阿德福韦酯也抑制HBVHBsAg和HBeAg分泌,但在相同质量浓度(1.6μg/mL)下其抑制作用较扁枝杉香豆素弱.结论 狭叶五味子中化合物扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸具有一定体外抑制HBV HBsAg和HBeAg分泌的作用,从而起到抗HBV作用.     

Marknagelung bei der Humerusschaftfraktur

Zusammenfassung Die Humerusschaftfraktur ist in 10–18% der Fälle durch primäre Radialisparese kompliziert. Sekundäre Radialisläsionen treten iatrogen bei intramedullären Verfahren in 3%, bei Plattenosteosynthesen in 15,5% auf. In der überwiegenden Mehrzahl der Fälle (80%) ist der Radialisschaden rückläufig. Eine Verletzung der A. radialis ist eher selten; sie erfordert ein offenes Vorgehen mit lokaler Revision des Gefäßes und Frakturversorgung mittels Plattenosteosynthese. Die Marknagelosteosynthese ist bei einfachen, komplexen oder pathologischen Schaftfrakturen primär oder als Verfahrenswechsel nach primärer Fixateuranlage indiziert. Während auch ausgewählte Frakturen im Collum chirurgicum mit einem Nagel versorgt werden können, sind Frakturen im distalen Viertel des Humerus ausgeschlossen. Frakturen bei kleinen Kopffragmenten weisen ein erhöhtes Komplikationsrisiko auf. Zur Vermeidung von Läsionen der Rotatorenmanschette stehen wir der anterograden Nagelung noch zurückhaltend gegenüber. Bei differenzierter Indikationsstellung und Nachbehandlung erwies sich die retrograde Marknagelung als ein schonendes Verfahren mit hohem Patientenkomfort und gutem funktionellem Ergebnis.     

Serum IgA and IgG functional antibodies and their subclasses to Streptococcus pneumoniae capsular antigen found in two aged‐matched cohorts of children with and without otitis media with effusion

Serum IgA and IgG functional antibodies and their subclasses to Streptococcus pneumoniae capsular antigen found in two aged‐matched cohorts of children with and without otitis media with effusion The relationship between acute otitis media and otitis media with effusion (OME) is uncertain and the aetiology of OME is multifactorial. Otitis media with effusion may be an inflammatory condition; both bacteria and viral infections could play a part in this inflammation. The four bacteria Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenza, Staphylococcus aureus and Branhamella catarrhalis cause 60% of the infections whereas S. pneumoniae accounts for up to 35%. IgA provides the dominant surface response to polysaccharide and lipopolysaccharide antigens, of which IgA₂ is the main subclass. Once the mucosa has been breached, most protection is provided by IgG. IgG₂ acts mainly against bacterial capsular antigens. This study looked at two groups of 50 children with and without OME who were aged between 3 and 10 years. The aims were to determine if, firstly, the levels of the serum immunoglobulins were different in the two groups, secondly whether these children made the appropriate antibody response to the capsular antigen to S. pneumoniae (PCP), and finally if there was a delay in the maturity of the IgA response. The total IgG, IgA and all subclass levels were measured using radial immunodiffusion. Levels of functional IgA and IgG were measured using ELISAs (25 patients in each group). The results were analysed with non‐parametric tests. The immunoglobulin levels were within the normal levels for both groups. There were very good correlations between the IgG total anti‐PCP and the IgG₂ anti‐PCP (R > 0.9, p = 0.001). There was a good correlation between the levels of both IgG total and IgG₂ anti‐PCP against IgA total anti‐PCP in both groups (R > 0.85, p > 0.01). This confirms a normal antibody response between both groups of patients. The ages of the controls and patients (50 samples) were correlated with increasing titres of circulating functional antibodies (P = 0.001). This is highly suggestive of a normal age‐related response. In conclusion, the findings were contradictory to our original hypothesis that there is a subtle difference in surface protection between children with and without OME. We believe that a previous history of recurrent acute otitis media is unrelated to the development of OME after 3 years of age.