应用胶原凝胶构建组织工程化皮肤的研究

目的探讨以胶原凝胶为支架材料构建组织工程化皮肤的可行性。方法体外分离、培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞;利用自制的胶原蛋白制成胶原凝胶作为组织工程支架材料;在成功构建人工真皮的基础上种植表皮细胞,构建复合人工皮肤;采用HE染色与免疫组织化学的方法对复合人工皮肤进行组织学检测。结果HE染色可见,构建的复合人工皮肤具有表皮和真皮双层结构;免疫组织化学染色显示,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和层粘连蛋白阳性,在形态结构上与正常皮肤相似。结论培养的人表皮细胞和成纤维细胞种植于胶原凝胶支架上,气-液界面培养可构建出具有类似正常皮肤结构的组织工程化皮肤。     

强脉冲光对大鼠皮肤胶原蛋白影响的定量分析

目的　定量分析强脉冲光对大鼠皮肤胶原蛋白含量的影响,进一步明确强脉冲光在治疗皮肤光老化中的作用机制。方法　选择15只SD大鼠,每只选3个部位用强脉冲光治疗,采用同一治疗参数,能量密度34J/cm2 ,分为3个脉冲,脉宽各为4ms、5ms、6ms,脉冲延时为2 0ms及2 5ms。分别切取治疗后第1、3、5、7、15、30天皮肤和未治疗部位皮肤,进行组织学观察。结果　治疗后,第1、3、5、7天皮肤胶原蛋白染色与未治疗部位比较无明显差别,第15天强于未治疗部位,第30天明显强于未治疗部位,免疫组化染色Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多(P <0 .0 0 1)。结论　强脉冲光治疗大鼠皮肤后可引起胶原含量的增加,在实验基础上为强脉冲光的临床应用提供了理论依据。     

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杏丁注射液对慢性肾衰竭患者血清LN和Col-Ⅳ的影响

目的:观察杏丁注射液治疗慢性肾衰竭(CRF)患者的临床疗效及其机制。方法:将60例慢性肾衰竭患者随机分为治疗组与对照组,在常规治疗的基础上,治疗组予杏丁注射液静脉滴注,对照组予丹参注射液。检测两组治疗前后的血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血红蛋白(Hb)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、24h尿蛋白定量(24hupq)、血钾、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ),并分析其对临床症状的影响。结果:治疗组患者Scr、BUN、24hupq、LN、Col-Ⅳ水平明显降低,疗效优于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:杏丁注射液有改善肾功能、减轻肾纤维化的作用。     

NO2和LPG燃烧产物对大鼠肺脂质过氧化,胶原含量和尿HOP的影响

本研究分别观察了ＮＯ２染毒和ＬＰＧ燃烧产物自然暴露对Ｗｉｓｔａｒ雄性成年大鼠肺脂质过氧化、肺胶原含量和尿ＨＯＰ排泄的影响及其相互关系。结果发现７．５２ｍｇ／ｍ＾３的ＮＯ２对三者均有一定影响，染毒剂量不同大鼠尿ＨＯＰ排泄也有相应的变化。尿ＨＯＰ的变化早于肺胶原含量，且两者有一定的相关关系。ＬＰＧ燃烧产物暴露期间，尿ＨＯＰ含量一直高于对照组，但未见肺胶原含量的变化，８周时尿ＨＯＰ与肺脂质过氧化物之间有     

肾小球肾炎系膜增殖和基底膜组成变化的相关研究

应用免疫组织化学方法检测了随机选择的９５例肾小球肾炎的Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白。结果表明，两种抗原的表达和定位可分为单纯基底膜型和系膜，基底膜复合型，墓产殖明显的肾小球肾炎的Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白阳性表达明显多于系统膜无增殖和轻微增殖的肾小球肾炎。     

膀胱癌基底膜层粘蛋白,胶原蛋白Ⅳ与纤维连接蛋白分布表达的？…

目的 探讨膀胱癌基底膜中层粘蛋白，胶原蛋白Ⅳ与纤维连接蛋白分布表达的相关性。方法 用免疫组织化学方法测定３５例膀胱移行上皮癌和３例低分化鳞状上皮癌肿瘤组织基底膜层粘蛋白（ＬＮ），胶原蛋白Ⅳ（ＣｏｌⅣ）和纤维连接蛋白（ＦＮ）含量与分布，结果病理级别高，浸润性生长的膀胱移行上皮癌，基底膜ＬＮ，ＣｏｌⅣ和ＦＮ一样，阳性染色少，分布不连续，反之，病理级别低，非浸润性生长的肿瘤，基底膜ＬＮ，ＣｏｌⅣ也和Ｆ     

有骨髓间充质干细胞附着的聚乳酸-羟基乙酸共聚物-Ⅰ型胶原蛋白支架补片在大鼠腹股沟疝模型中的应用

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)覆膜聚乳酸-羟基乙酸共聚物-Ⅰ型胶原蛋白支架(PLGA-collagenⅠ)补片对腹股沟疝的修补效果。方法首先,制备PLGA-collagenⅠ补片;然后提取大鼠骨髓间充质干细胞,并制作腹壁缺损大鼠模型。将覆膜有骨髓间充质干细胞的组织工程补片(实验组)和无细胞组织工程补片(对照组)分别植入腹股沟。ELISA检测IL-6和IL-10。免疫组化检测巨噬细胞表面抗原,分析炎性反应。HE染色观察补片中自身组织的再生情况和材料降解状态。用扫描电子显微镜观察腹膜的完整性。免疫组化检测新生血管状态。Masson三色染色检测胶原蛋白纤维的形成。结果 1周后,实验组和对照组的巨噬细胞在补片上的浸润均显著增加(P0.05)。1个月后,炎性反应逐渐消退,巨噬细胞数量减少(P0.05)。长期实验表明,BMSCs补片能促进胶原纤维的合成,促进血管再生,修补腹壁损伤。实验组和对照组的大鼠腹壁无肿胀,大鼠健康。术后1、2和6个月进行组织形态学观察和SEM电子显微镜检查。带有BMSCs的PLGA-collagenⅠ补片可促进细胞浸润,血管生成和组织再生,且降解速度更快。6个月后,种植有BMSCs的补片几乎完全降解,没有种植细胞的PLGA-collagenⅠ补片被降解成碎片,并作为异物留在体内。结论植入BMSCs的PLGA-collagenⅠ组织工程材料能更快速可靠的修补疝缺损,达到治疗腹股沟疝的目的。     

葡甘聚糖-胶原蛋白-壳聚糖共混膜(I)

用溶液共混法制备了葡甘聚糖-胶原蛋白-壳聚糖(KCCS)共混膜。并用FT-IR,X-RD,SEM及透光率表征了膜的结构,同时测试了膜的抗张强度、断裂伸长率、吸水率、透水汽性、渗透性和吸附性。结果表明:共混膜中葡甘聚糖、胶原蛋白及壳聚糖之间存在着强烈的相互作用和良好的相容性,三者共混明显改善了纯聚合物和二元膜的性能。以共混膜为载体培养内皮细胞,发现共混膜具有良好的细胞相容性,预示着共混膜可作为潜在的组织工程支架材料。     

抗人Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

用人Ⅳ型胶原蛋白免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，克隆了一组分泌抗人Ⅳ型胶原蛋白的杂交瘤细胞株，并且对其中的Ａ２、Ａ４、Ａ５、Ｂ３和Ｅ２进行了鉴定。其抗体亚类分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２和ＩｇＧ１。其亲和力常数Ｋａｆｆ＝６．６×１０８Ｍ（－１）～６．０×１０（１０）Ｍ（－１）。它们均能特异性地识别人Ⅳ型胶原蛋白。