痔上粘膜环切术的临床应用

目的探讨吻合器痔上粘膜环切术㈣治疗环状重度内痔的疗效。方法用PPH治疗环状重度内痔患者23例。结果23例手术时间（含消毒铺巾）为30～60min，4例因荷包缝扎过低而导致疼痛需使用镇痛剂外，其余均无明显痛感。术后脱垂痔核立即消失的18例，92％的患者术后3个月内痔核可以完全消失。术后仅1例有明显便血症状，经药物治疗后症状消失。无术后感染、出血、狭窄、瘘管形成及肛门失禁等并发症发生，患者对此手术的总体满意率达92％。结论PPH治疗环状重度内痔具有安全、有效、手术时间和住院时间短、恢复快等优点。     

皮瓣搭桥术治疗环状混合痔200例疗效观察

目前国内常采用外剥内扎术治疗环状痔，痔核不能一次性切除，常造成肛缘水肿。2001年1月～2003年1月，我们采用内扎外切皮瓣搭桥术治疗环状痔200例，疗效较满意。现报告如下。     

保留齿线悬吊术治疗环状混合痔

目的:探讨保留齿线悬吊术治疗环状混合痔的临床应用价值.方法:72例环状混合痔病人连续进入观察.随机分为两组:保留齿线悬吊术组(即治疗组36例)和外剥内扎法组(即对照组36例).根据治愈率、治愈时间及安全性方面的结果作评价.结果:保留齿线悬吊术组治愈率(88.89%)与对照组(83.33%)相比无显著性差异.治愈时间(18.42±4.67) d VS(22.11±6.01) d,两组有显著性差异;通过测定肛管直肠压力,显示两组手术均较安全.结论:保留齿线悬吊术治疗环状混合痔与外剥内扎术相比,明显缩短术后伤口愈合时间.     

RNA干扰阻断BT／CD28共刺激通路在小鼠心脏移植中的抗排斥作用

目的探讨RNA干扰（RNAi）技术阻断B7／CD28共刺激通路对小鼠异体心脏移植排斥反应的影响及其机制。方法经体外转录合成针对CD80 mRNA和CD86 mRNA序列特异性小片段干扰RNA（siRNA），转染供者骨髓来源的树突状细胞（DC），半定量逆转录聚合酶链反应、流式细胞仪检测DC转染CD80siRNA、CD86siRNA前后CD80 mRNA和CD86 mRNA的表达水平以及细胞表面CD80及CD86的表达情况。在小鼠异位心脏移植前7d，经静脉给受者输注经siRNA干扰后的DC（干扰DC组），同时设立同种异体对照组、环孢素A（CsA）治疗组（术后皮下注射CsA 5mg／d）、同系移植对照组和未干扰DC组（移植前输注未转染DC），观察各组移植心脏的存活时间，对移植物的排斥反应进行病理分级，并测定移植物组织中白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）及IL-10的mRNA表达水平。结果siRNA转染DC后，其CD80 mRNA及CD86 mRNA的表达受到明显抑制，CD80、CD86的阳性率分别由84％和67％下降至35％和30％。与同种异体对照组和未干扰DC组比较，干扰DC组移植心脏存活时间明显延长（P〈0．01），组织排斥反应病理分级显著降低（P〈0．01），移植心脏组织中IL-2 mRNA和IFN-γ mRNA的表达水平明显降低（P〈0．01），而IL-10 mRNA的表达水平明显升高（P〈0．01）。结论利用RNAi敲减供者骨髓来源的DC表面B7分子的表达，以阻断BT／CD28共刺激通路，具有抑制小鼠心脏移植排斥反应的作用，其机理可能是通过诱导T淋巴细胞无能并使T辅助细胞分化向Tn2型方向偏移。     

RNA干扰及其在胶质瘤基因治疗中的应用

RNA干扰（RNA interference。RNAi）是双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）降解特异性靶基因转录出的mRNA。从而抑制靶蛋白表达的现象。自从二十世纪九十年代发现RNAi这一现象以来，RNAi已被广泛应用于研究基因功能、信号转导通路和基因治疗等方面。随着分子生物学、分子遗传学等学科的发展．发现了许多与肿瘤发生、发展和预后密切相关的基因。经过大量临床前期试验表明，针对特异性靶基因的小干扰RNA（short／small interfering RNA．siRNA）治疗胶质瘤是行之有效的。为基因治疗胶质瘤提供了新的思路。[第一段]     

1例先天性环状胰腺手术治疗体会

患儿，女，40d，因频繁哺乳后呕吐入院。患儿出生后阿普加评分正常，有胎便排出，后家属发现其哺乳后不久即呕吐，呕吐物为奶汁及黄色胆汁样物质，在当地治疗无改善，遂来我院。查体：T36．2℃，P110次／min，R40次／min，体重4．5kg，发育正常、营养差，极度消瘦，心肺无异常，腹平软，无腹胀。末触及包块，肠鸣音可。腹平片示胃泡明显、并有双气泡征．     

锌指蛋白A20 RNAi载体的构建及筛选

目的我们前期的实验结果显示A20 mRNA和蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞系（U251、U87、BT325）中高表达，本研究拟构建A20RNAi载体，并检测其对U251细胞A20表达的抑制作用。方法构建三种针对人A20基因的真核干涉表达载体，以脂质体法将其分别转染人脑胶质瘤细胞系U251，以RT-PCR、蛋白印迹法检测各干涉载体对U251细胞中A20mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果成功构建三种针对A20基因的RNAi载体，经RT-PCR、蛋白印迹检测筛选出对A20基因干涉效果最佳的载体，命名为pSilencer3．1-A20R1。结论成功构建A20基因干涉载体，为进一步探讨A20与脑胶质瘤恶性增殖、血管形成以及抗凋亡的关系奠定实验基础。     

RNA干扰技术在以VEGF/VEGFR为靶点的膀胱癌治疗研究中的应用前景

RNA干扰（RNAi）是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象，它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA（dsRNA），该mRNA发生降解而导致基因沉默的现象。利用RNAi技术干涉VEGF表达，达到抑制肿瘤发展和转移的研究已较为广泛。膀胱癌生长、转移不仅有VEGF表达增多，同时发现VEGFR表达亦增高，成为RNAi的新靶点。现主要综述以VEGF/VEGFR为靶点的RNAi技术在膀胱癌治疗研究中的优势、发展前景以及存在问题与对策。     

反义AKT2 RNA抑制U251胶质瘤细胞生长的体内外研究

目的 研究反义AKT2RNA对U251人脑胶质瘤细胞在体内外的生长抑制效用。方法 将逆转录病毒pLXSN为载体的反义AKT2构建体转染U251人脑胶质瘤细胞系，应用蛋白印记确定基因转染前后AKT2的表达水平。流式细胞法与Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转染前后的增殖活性。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导pLXSN、pLXSN-AS-AKT2基因治疗对U251细胞生长抑制作用。在28d的观察期内定期测量皮下肿瘤体积，对肿瘤标本应用免疫组化的方法进行AKT2和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达比较。结果 脂质体介导pLXSN-AS-AKT2可显著抑制U251细胞AKT2表达。与对照组和pLXSN转染组比较，细胞周期分析结果表明AK—AKT2转染组进入S期的细胞数减少了8．5％～8．9％，而进入G0＋G1期细胞则增加了7．9％～8．6％。Matrigel基质生长实验显示对照组和pLXSN转染组细胞呈正常形态贴壁生长，而AS～AKT2转染组细胞不能贴壁生长，呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示pLXSN-AS-AKT2显著抑制皮下肿瘤生长，组织病理学分析显示AS-AKT2转染组AKT2表达下降而GFAP表达上调。结论 体内外实验证明反义AKT2方法在抗胶质瘤增殖方面作用重要，AKT2可作为基因治疗胶质瘤的优选靶标。     

青少年陈旧性Monteggia骨折的治疗

Monteggia骨折,约占前臂骨折的17%,尤以青少年多发。症状轻的青少年Monteggia骨折早期不易发现,漏诊率高,当临床出现肘关节功能障碍,尺骨短缩畸形时,骨折往往进入陈旧期,需手术治疗。本院和浙江大学医学院附属第二医院骨科1998年7月至2000年3月共收治21例,取得相应治疗经验。报告如下。1临床资料1.1一般资料:本组男15例,女6例;年龄5～14岁,平均8.7岁;病史1月～2年6月。损伤原因全系跌伤或车祸。根据Bado分型法,本组Ⅰ型3例,Ⅱ型3例,Ⅲ型14例,Ⅳ型1例。1.2治疗方法:本组均属陈旧性骨折,21例患者全接受切复治疗,术中见尺骨成角畸形者,给予截…