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目的:构建带有小鼠分泌型内皮抑素(ssEndostatin)的原核表达载体pNZ44-ssEndostatin并在双歧杆菌中表达Endostatin蛋白方法:利用引物设计软件oligo6.0设计引物,从pcDNA3.1-Egr1-ssEndostatin质粒上PCR扩增得到ssEndostatin基因。经测序证实获得的ssEndostatin基因序列正确后,进行粘端连接,将ssEndostatin基因链接到pNZ44原核表达载体上,构建成pNZ44-ssEndostatin重组载体,PCR、酶切鉴定正确后电转化到双歧杆菌中然后利用ELISA法检测Endostatin表达。结果:测序结果证实ssEndostatin基因序列与Genebank中所公布的一致,说明ssEndostatin基因扩增正确而且构建的质粒pNZ44-ssEndostatin的PCR、酶切鉴定结果与预测的一致,说明重组质粒pNZ44-ssEndostatin构建成功转化后挑取阳性克隆进行菌落PCR证实重组质粒pNZ44-ssEndostatin已戍功转入双歧杆菌中ELISA法检测到转化有重组质粒pNZ44-ssEndostatin的双歧杆菌的菌体内有较高水平的Endostatin表达,且培养48h的表达量较20h的高,有氧条件下表达较缺氧条件下高,但上清中未捡测到。结论:成功地构建了带有分泌信号的小鼠内皮抑素表达载体pNZ44-ssEndostalin,成功转入双歧杆菌中并在菌体中表达,为后续利用双歧杆菌作为工具进行Endostatin基因治疗奠定了实验基础。 相似文献
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一、搞下口罩,在雪花的芬芳中自由呼吸
梅朵给人的第一印象总是弱不禁风,1.73米的身高,体重却总也超不过50公斤。实际上,她也确实弱不禁风。每次寒潮来袭,单位里,最先感冒的总是她。以至于后来她成了单位的“天气预报员”,只要看见她一感冒,同事就调侃“啊!又要变天了。”她也因此得了一个雅称——“林妹妹”。[第一段] 相似文献
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胰岛素可增加葡萄糖的利用,加速葡萄糖的无氧酵解和有氧氧化,抑制糖元分解和糖异生而降低血糖,临床上主要用于胰岛素依赖型糖尿病以及部分非胰岛素依赖型糖尿病的治疗,也可用于细胞内缺钾的治疗。近年来,随着糖尿病患者的增多和治疗方案的逐步成熟,胰岛素用于糖尿病的治疗使用越来越广泛,随之而来的不良反应发生也相应增多。轻微的不良反应能引起患者的局部不适,而严重者甚至导致意识障碍或死亡。因此.减少胰岛素不良反应的发生对提高血糖控制达标率,改善患者的生存质量都有重要的意义。现就近年来在临床上出现较多的不良反应及应对措施概述如下。 相似文献
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<正>1病理烧伤是一种全身性疾病,尤其是大面积烧伤。烧伤治疗,不能仅从创面局部考虑,要从整体论上去考虑疾病的治疗问题,即局部与全身治疗不能分割。在MEBT/MEBO作用下,可以实现创面生理性愈合。如何实现,系统治疗就是保障,没有这个保障,不可能取得良好的治疗效果。之所有强调系统 相似文献
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21世纪的大学生舞蹈美育作为素质教育的最佳形式与内容,主要是通过舞蹈活动来感受美、鉴赏美、创造美的一种教育方式。 相似文献
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