消黄散对实验性黄疸大鼠NO的影响

目的：观察消黄散对实验性黄疸大鼠NO的影响。方法：采用一次性灌胃异硫氰酸萘酯（ANIT）中毒制备大鼠黄疸模型，不同剂量消黄散为治疗组，与思美泰对照，观察血清NO及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(Tbil)、γ-谷氨酸转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）和肝组织病理变化。结果：消黄散和思泰都能显著改善NO及各项指标，结论：消黄散能降低NO水平，抑制其对肝细胞的毒性作用及其与胆汁淤积的相关关系，促进胆红素的正常代谢。     

DC-SIGNR基因多态性与肝功能和HCV病毒载量的相关性

目的研究丙型肝炎患者DC—SIGNR基因颈区重复序列的遗传多态性分布，探讨DC-SIGNR基因多态性与肝功能及丙型肝炎病毒（HCV）载量的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）技术结合DNA测序对238例丙型肝炎患者DC—SIGNR重复序列多态性进行基因分型和测序分析；同时检测患者的HCV—RNA载量和肝功能。结果DC—SIGNR基因型或等位基因与肝功能的相关性不显著。携带7等位基因的患者，其HCV—RNA载量水平低于携带9等位基因的患者（P〈0．05）。此外7/7组基因型的患者其HCV—RNA载量水平低于9/7组基因型的患者，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。提示HCV更易与携带较长DC—SIGNR等位基因的患者结合。结论DC—SIGNR遗传多态性可能与HCV在个体内的复制有关。但与肝功能不相关。     

庚型肝炎病毒NS5基因重组质粒的构建及在大肠杆菌中的表达

我们对中国南方株ＨＧＶＮＳＳ部分基因进行分子克隆，并将其插人质粒表达载体ＰＱＥ３０．构建重组表达质粒，在大肠杆菌中进行表达。一、材料与方法１．主要试剂：ＡＭｙ-ＲＴ为Ｐｒｏｍｅｇｓ公司产品，限制性内切酶、Ｋｌｅｎｏｗ酶及Ｔ４ＤＮＡ连接自购自ＢＯｅｈｒｉｌｌｕｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司，质粒ｐＵｃｌ吕与＊ＨＳＱ菌由中山医科大学分子医学中心提供，质粒ＰＱＥ３０与Ｍ１５菌由中国军事医学科学院微生物所提供。２．ＨＧＶＮＳＳ的分子克隆与测序：经计算机分析ＨＧＶ基因编码蛋白质阅读框架及抗原表位，选择ＮＳＳ区抗…     

不明病因感染性疾病DNA病毒性病原检测方法的建立

目的建立不明病因感染性疾病DNA病毒性病原的检测方法。方法应用DNaseI-非序列依赖的单引物扩增技术,将患者血清过滤后,经DNase I处理去除血清中内源DNA。Csp6.I酶切病原DNA,加接头分子,并以接头分子为引物非特异扩增病原DNA,测序并进行序列分析。结果DNaseI处理血清中内源DNA不会降解病毒DNA;非序列依赖的单引物扩增血清中外源DNA得到多个DNA片段;将所有PCR产物测序,序列与已知病原DNA序列完全一致。结论应用DNaseI处理及非序列依赖的单引物扩增方法可以检测DNA病毒性病原。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与慢性乙型肝炎病毒感染的关系

目的 探讨调节性T细胞（Treg）在慢性乙型肝炎病毒感染中的免疫调节作用。方法 采用流式细胞术检测慢性活动性肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者、乙型肝炎恢复者及健康对照者外周血CIN^＋T细胞中的CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例。采用免疫组织化学法检测肝组织中Foxp3的表达。统计分析外周血中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数与血清HBeAg和HBVDNA含量的关系。结果 外周血CIN^＋T细胞中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数在慢性活动型肝炎组和乙型肝炎病毒携带组均高于健康对照组（P〈0．05），乙型肝炎病毒携带者组高于乙型肝炎恢复组（P〈0．05）。Foxp3在慢性活动型肝炎组肝组织中的阳性率和阳性细胞数均高于乙型肝炎病毒携带者组（P〈0．05）。外周血HBeAg（＋）患者Treg的比例数高于血清HBeAg（-）患者Treg的比例数（t=1．67．P〈0．05）。患者外周血CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg的比例数与血清HBV DNA含量呈正相关（r=0．56，P〈0．01）。结论 CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞可能与乙型肝炎病毒感染慢性化及乙型肝炎病毒的清除有关。     

DC-SIGNR基因多态性与肝功能和HCV病毒载量的相关性

目的 研究丙型肝炎患者DC-SIGNR基因颈区重复序列的遗传多态性分布,探讨DC-SIGNR基因多态性与肝功能及丙型肝炎病毒(HCV)载量的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术结合DNA测序对238例丙型肝炎患者DC-SIGNR重复序列多态性进行基因分型和测序分析;同时检测患者的HCV-RNA载量和肝功能.结果 DC-SIGNR基因型或等位基因与肝功能的相关性不显著.携带7等位基因的患者,其HCV-RNA载量水平低于携带9等位基因的患者(P＜0.05),此外7/7组基因型的患者其HCV-RNA载量水平低于9/7组基因型的患者,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).提示HCV更易与携带较长DC-SICNR等位基因的患者结合.结论 DC-SIGNR遗传多态性可能与HCV在个体内的复制有关,但与肝功能不相关.     

乙肝病毒外膜大蛋白检测在诊断乙型病毒性肝炎中的临床意义

目的通过检测乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV、DNA、以及乙肝两对半(HBVM),探讨HBV-LP与HBVDNA浓度的相关性.方法共检测354例乙肝患者血清标本,HBV-LP、乙肝前S1蛋白(Pre-SlAg)以及乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBV DNA.结果(1)在290份HBV DNA阳性标本中HBV-LP的阳性率(88.62%)明显高于乙肝病毒前S1的阳性率(48.97%),两者之间差异有显著性(P＜0.05);(2)HBV-LP吸光度值与HBV DNA拷贝数呈正相关性,相关系数r=0.939;(3)在HBeAg阳性和阴性标本中,Pre-SlAg的检出率则明显低于HBV-LP和HBV DNA.结论本研究结果显示HBV-LP与HBV DNA有良好的正相关性,HBV-LP检出与HBV DNA的符合率高于Pre-SlAg,HBV-LP检测可以用于反映乙肝患者病毒复制的血清免疫学指标.     

HBV拉米夫定耐药株多聚酶基因变异的研究

我们采用PCR-RFLP(限制性片段长度多态性分析)检测HBV多聚酶基因YMDD变异,并将其与核苷酸序列测定结果进行比较,现报道如下。     

乙型肝炎病毒核心抗原与前S1抗原融合蛋白诱导小鼠免疫反应的实验研究

采用基因重组技术表达了去除C末端的HBV核心抗原和前S1抗原融合蛋白,经免疫印迹试验表明其具有特异抗原反应 性[1]。进一步用该融合抗原免疫BALB/C小鼠,观察其诱导小鼠特异性体液免疫产生情况。 一、材料与方法 1.重组型HBV核心前S1融合蛋白疫苗(HBV CS1)的     

流式检测CD_(70)~+ CD_(19)~+细胞的表达及其在结核病诊断中的价值

目的初步建立全血细胞中CD+70CD+19的流式检测方法。方法用流式细胞仪检测CD+70CD+19细胞的表达,比较其在肺结核患者(55例)、结核潜伏感染者(27例)及健康对照者(57例)的表达情况。结果结核患者全血中的CD+70CD+19细胞的表达水平明显低于结核潜伏感染组和健康对照组(P0.05)。分别绘制ROC曲线评价CD+70CD+19细胞的诊断效率,在分辨结核病人和健康者时,敏感性92.7%特异性89.5%;在分辨结核病人和潜伏感染者时,敏感性85.5%特异性79.2%。结论 CD+19B细胞CD+70的表达适用于肺结核的诊断及结核潜伏感染者的早期诊断。