牛至挥发油对白假丝酵母菌体外抗菌作用及机制的初步研究北大核心CSCD

目的:探讨牛至挥发油对白假丝酵母菌体外抗菌活性及作用机制。方法:采用打孔琼脂扩散法与微量稀释法测定牛至挥发油对白假丝酵母菌的抑菌活性和最小抑菌浓度(MIC);牛至挥发油处理白假丝酵母菌后,测定真菌碱性磷酸酶(AKP)含量、吸光度,麦角甾醇含量、胞外蛋白含量、线粒体中活性氧(ROS)含量;DAPI染色观察细胞核;结晶紫染色、扫描电镜观察菌体结构。结果:牛至挥发油对白假丝酵母菌的抑菌圈为(24±2)mm;最低抑菌浓度为1.98 mg/mL。形态学观察,牛至挥发油会破坏真菌细胞壁,使菌体扭曲变形,细胞核碎裂,菌液吸光值显著升高(P<0.01);与正常对照组相比,牛至挥发油2 mg/mL能提高菌液AKP含量、胞外蛋白含量、ROS含量,降低麦角甾醇含量(P<0.01)。结论:牛至挥发油可能通过破坏白假丝酵母菌菌体的完整性,以及导致线粒体功能障碍,促使细胞坏死的方式杀灭白假丝酵母菌,抑菌效果良好。具有广阔的应用前景。     

苦瓜素I抑制乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星耐药的研究

目的：研究苦瓜素I （momordicin I,MMI）对人乳腺癌耐多柔比星（doxorubicin,DOX） MCF-7/DOX细胞耐药的影响及其作用机制。方法：MTT比色法检测MMI对MCF-7/DOX细胞的毒性,考察MMI对MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR和western blot方法检测DOX单独以及MMI与DOX联用后,MCF-7/DOX细胞中MDR1在mRNA和蛋白质水平的表达变化;进一步采用实时定量PCR方法检测DOX单独以及MMI与DOX联用后,MCF-7/DOX细胞中与甘油磷脂代谢相关的AGPAT2、CEPT1、CHKA、DGKA、PCYT1A、PLA2G15等基因表达的变化。结果：MMI （12.5,25,50 μg·mL^-1,）可明显抑制MCF-7/DOX细胞的增殖,MMI对MCF-7/DOX细胞的最大无毒浓度为6.25 μg·mL^-1。MMI 6.25 μg·mL^-1与DOX联用后,DOX对MCF-7/DOX细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）下降,MMI使得MCF-7/DOX细胞对DOX的敏感性提高了13.88倍。与DOX 50 μg·mL^-1单独组相比,MMI 6.25 μg·mL^-1与DOX 50 μg·mL^-1联用后,MCF-7/DOX细胞中的MDR1 mRNA显著下调（P<0.05）,MDR1蛋白表达有下降趋势。进一步研究发现MMI 6.25 μg·mL^-1与DOX 50 μg·mL^-1联用可协同下调MCF-7/DOX细胞甘油磷脂代谢相关基因AGPAT2、CEPT1、CHKA、DGKA、PCYT1A、PLA2G15等表达。结论：MMI可增强乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性,抑制MDR1表达,逆转耐药,此作用可能与其抑制甘油磷脂代谢有关。     

欧前胡素逆转A2780/Taxol多药耐药作用及其机制研究

目的:探讨欧前胡素对人卵巢癌耐紫杉醇细胞株A2780/Taxol耐药性的逆转作用及其可能的作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测欧前胡素对人卵巢癌细胞A2780和人卵巢癌耐紫杉醇细胞株A2780/Taxol增殖的影响;观察欧前胡素作用A2780/Taxol细胞24h之后对紫杉醇耐药性的逆转效果;采用高效液相-荧光检测法和Western blot分别对其机制进行研究。结果:A2780/Taxol对紫杉醇耐药倍数为4.34(1.5RI5)倍;不同浓度欧前胡素对Taxol的逆转倍数分别为2.89、3.38、6.76,且呈剂量依赖性增加。不同浓度的维拉帕米及欧前胡素可显著增加A2780/Taxol细胞株内Rho123的蓄积。不同浓度的欧前胡素能够显著下调A2780/Taxol细胞株的P-gp表达量。结论:欧前胡素能够部分逆转A2780/Taxol细胞的耐药性,且其逆转机制可能与降低P-gp的表达量相关。     

基于临床代谢组学与蛋白质组学研究粉葛治疗轻度血脂异常的作用机制

研究粉葛临床上治疗轻度血脂异常潜在的代谢途径和作用靶点。采用UPLC-Q-TOF-MS和EASY-nLC-timsTOF-Pro2技术对轻度血脂异常患者在基线和服药12周后的血浆样品展开代谢组学和蛋白质组学研究。通过多元统计分析比较组间差异,并对轻度血脂异常密切相关的代谢物和蛋白与临床血脂指标分别进行相关性分析,结合基因本体(Gene Ontology, GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析结果,绘制粉葛治疗轻度血脂异常可能的作用途径和靶点。结果显示,粉葛治疗后患者血浆中共有56个差异代谢物和78个差异蛋白产生回调效应,包括脂质和糖代谢相关的蛋白或代谢物(ApoB-100、9,10-DHOME、GAPDH、PGK1、PGAM1、ENO1等)、炎症与氧化应激相关的蛋白或代谢物(氧化磷脂、PLA2G7、LTA4H等)。结果表明,粉葛治疗轻度血脂异常的作用机制可能与下调ApoB-100的过表达、激活PPARα/γ、促进脂肪和甘油的分解、缓解LTB4与氧化磷脂介导的氧化应激密切相关。     

柚皮苷对豚鼠离体气管平滑肌作用的机制研究

目的考察柚皮苷对正常及多种致痉剂诱导的豚鼠气管平滑肌收缩功能的影响及其作用机制。方法采用离体气管恒温灌流的方法,取豚鼠气管,在K-H液中制备豚鼠离体气管环,在其静息张力状态下以及用乙酰胆碱(Ach)、组胺(His)、氯化钙(Ca Cl2)、无钙时Ach诱导细胞内钙释放和高钙时诱发细胞外钙内流条件下,通过BL-420S生物机能实验系统测定其张力的变化,考察柚皮苷对离体豚鼠气管平滑肌张力的影响。结果柚皮苷低剂量浓度(0.0172~0.5504)mmol·L-1时,对静息状态下的豚鼠离体气管平滑肌有一定的收缩作用,高剂量浓度(0.5504~1.3780)mmol·L-1时舒张气管平滑肌,且呈剂量依赖性;使致痉剂Ach、His、Ca Cl2收缩豚鼠离体气管平滑肌的量效曲线非平行性右移,最大效应降低;抑制加入高钙后引发细胞外钙内流导致的收缩。结论柚皮苷舒张气管平滑肌作用机制可能与抑制豚鼠气管平滑肌上M受体、H1受体和阻断Ca2+通道从而抑制细胞Ca2+内流有关。     

黄芪多糖对结肠炎大鼠小肠PP结中T淋巴细胞亚群的调节作用

<正>黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)是黄芪的主要活性成分之一,可有效治疗实验性结肠炎[1],但其能否调节结肠炎大鼠小肠派尔集合淋巴结(peyer’s patch,PP结)中T淋巴细胞亚群水平尚不明确,本实验通过复制实验性结肠炎,观察小肠PP结中T淋巴细胞、CD25+T淋巴细胞与Th17细胞的表达,以明确APS的可能作用机制。1材料1.1动物及分组健康SD大鼠60只,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,♂,体质量(210±10)g,将大鼠随机分为正常组、模型组、APS(低、中、高     

吴茱萸不同入药形式的成分差异

目的分析吴茱萸2种不同入药形式(粉末和水煎液)中化学成分的差异。方法以70%乙醇提取物和水煎液模拟2种入药形式,优选9个代表性化合物(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、金丝桃苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸新碱)作为含有量测定指标,建立UPLC法分析不同入药形式的成分差异。结果 70%乙醇对吴茱萸各类化合物都有较好的提取效率;水煎液对酚酸、黄酮等极性较大的化合物有较好的提取效率,其中隐绿原酸在水煎液中的含有量远高于在醇提物中;生物碱,尤其是喹诺酮类生物碱在水煎液中的转移率很低。结论中医的遣方用药有其科学内涵,应该根据具体功用、安全性等因素选择适当的入药形式。     

蕨类植物中蕨素类成分的研究进展

蕨素类成分是一类具有1H-茚-1-酮母核结构的倍半萜类化合物,在蕨类植物中分布广泛,是该类植物的特征性成分。迄今已报道151个天然蕨素类成分,按其母核的碳原子数目,可分为13碳、14碳和15碳蕨素及蕨素二聚体,主要具有抗肿瘤、抗炎、抗糖尿病等作用。本研究参考相关文献,对蕨素类成分及其药理活性方面的研究进展进行综述,以期为其开发应用提供参考。     

HPLC法同时测定不同产地凤尾草中的3种活性成分

目的建立高效液相色谱法同时测定不同产地凤尾草中的蕨素C-3-O-葡萄糖苷、忍冬苷和野漆树苷3种活性成分的含有量。方法凤尾草甲醇提取液分析采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.15%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长258 nm和350 nm;柱温30℃。结果蕨素C-3-O-葡萄糖苷、忍冬苷和野漆树苷3种活性成分分别在0.025 0~1.60、0.054 0~3.45和0.238~15.2μg的测定范围内表现出良好的线性关系(r0.999),加样回收率分别为101.0%(RSD 1.4%)、101.0%(RSD 1.8%)和101.6%(RSD1.2%)。10个不同来源凤尾草中的蕨素C-3-O-葡萄糖苷最高与最低含有量相差约15倍,忍冬苷含有量相差约8倍,而野漆树苷含有量相差达25倍。结论该方法能同时测定凤尾草中3种活性成分的含有量,而且其药材质量与产地关系较大。     

ICP-MS测定美洲大蠊中5种重金属及有害元素

目的 建立美洲大蠊重金属及有害元素含量的检测方法,并依据国际国内标准进行限量分析。方法 采用ICP-MS技术检测美洲大蠊中Cd、As、Pb、Hg和Cu 5种元素的含量。结果 5种元素在测定范围内线性关系良好(r≥0.999 2),加样回收率在88.5％~117.0％,RSD为0.45％~3.96％。综合国际国内各标准,13批样品不合格率差异较大,在7.69％~100％之间。结论 本实验所述方法可准确测定美洲大蠊中重金属及有害元素含量;其中Cu因限量设定值差异较大超标较为普遍,且多数标准未做要求;Pb限量皆有规定但设定值较宽,可适当调低限度;国际标准中Cd、As和Hg限量与国内标准差别不大,不合格率相近,认为3种元素的限量是可行的。有必要制订美洲大蠊重金属及有害元素限量针对性标准。