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目的探究苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2 心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法(1)体外
培养大鼠H9c2 心肌细胞,采用MTT 法评价不同浓度的异丙肾上腺素(0.625、1.25、2.5、5、10 μmol·L-1)和不
同浓度的苦瓜皂苷L(1.625、3.125、6.25、12.5、25.0 μg·mL-1)对心肌细胞活力的影响。(2) 采用异丙肾上腺素
诱导心肌细胞肥大模型。实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L 干预组和苦瓜皂苷L 单独组。分别通过细胞
拍照结合ImageJ 软件测量、荧光定量PCR 法考察苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表
面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC 及α-SKA 表达的影响。在此基础上,选择参与甘油磷脂代谢的
酶VI 组磷脂酶A2(PLA2G6)、二酰甘油激酶ζ(DGKZ)、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1(GPCPD1)为指标,评价苦
瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3 种酶基因表达的影响;进一步以PLA2G6 和DGKZ 蛋白为指
标,采用Western Blot 法考察苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达的影
响。结果(1)与正常组比较,异丙肾上腺素(0.625~10 μmol·L-1)和苦瓜皂苷L(1.625~25 μg·mL-1)对心肌细胞
活力没有明显影响(P>0.05)。本研究选用异丙肾上腺素10 μmol·L-1 和苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 进行实验。
(2)与正常组比较,模型组心肌细胞表面积增加(P<0.05),心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA 表
达上调(P<0.05),PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达上调(P<0.05),PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达增加
(P<0.05);与模型组比较,苦瓜皂苷L 干预组能够降低心肌细胞表面积(P<0.05),下调心肌肥大相关胚胎基
因ANP、β-MHC、α-SKA 表达(P<0.05), 下调PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达(P<0.05), 降低
PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达(P<0.05)。结论苦瓜皂苷L 可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,可能与
其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6 和DGKZ 的表达有关。 相似文献
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