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通过DNA重组技术 ,经亚克隆和克隆过程构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒pAdE1CMV NGF ;制备完整高纯度辅助病毒 pJM1 7。将 pAdE1CMV NGF和 pJM1 7在 2 93细胞中同源重组 ,获得复制缺陷型腺病毒重组体AdE1CMV NGF。梯度系列稀释测得滴度为 4 .6× 1 0 10 PFU/mL。 相似文献
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强直性脊柱炎并发虹睫炎易感性与LMP2和LMP7基因多态性的探讨 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 研究LMP基因多态性与强直性脊柱炎并发虹睫炎发病的关系.方法 应用PCR对正常人和病人进行HLA-B27检测以及LMP2和LMP7扩增.CfoI进行限制性酶切图谱分析.结果 强直性脊柱炎有虹睫炎(AS+AAU)病史以及单纯虹睫炎(AAU)患者LMP2基因BB纯合型较正常人以及强直性脊柱炎(AS)患者明显增高(P<0.05).AS+AAU患者BB型OR=3.6,AAU患者BB型OR=5.83.LMP7基因多态性无明显差别.结论 在我国汉人中,LMP2基因多态性与AS+AAU以及AAU发病存在明显相关关系. 相似文献
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单链抗体基因在大肠杆菌高效表达研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
利用基因工程,将单链抗体(ScFv)基因导入大肠杆菌,如何使其获得高效表达,仍然是目前面临的主要问题。本文就ScFv基因在大肠杆菌中的表达形式、影响表达的主要因素、表达条件的优化选择及其应用前景方面作一综述。 相似文献
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Retroviral vector containing human p16 gene and its inhibitory effect on Bcap -37 breast cancer cells 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 研究p16基因对肿瘤细胞生长抑制及细胞周期阻滞作用。方法 将p16cDNA插入逆转录病毒载体pLXSN构建成p16基因逆转录病毒重组体pLp16SN。利用基因转染方法 ,将pLp16SN及pLXSN导入逆转录病毒包装细胞系PA317细胞 ,获得逆转录病毒。用逆转录病毒感染Bcap 37乳腺癌细胞 ,经G4 18筛选获阳性克隆。利用Northern和Westernblotting方法检测p16基因的表达。检测转基因细胞的生长速度 ,细胞周期及裸鼠成瘤等细胞生物学行为的改变。结果 Northern及Westernblotting显示转染p16基因的Bcap 37细胞p16基因mRNA及蛋白质表达明显增高。此细胞较未转染基因的Bcap 37细胞和转染空载体的Bcap 37细胞生长速度慢 ,G1期细胞比率增高 ,裸鼠接种成瘤体积小。结论 p16基因高表达能够抑制乳腺癌细胞Bcap 37的生长 ,并阻滞细胞从G1期进入S期 相似文献
66.
用差示PCR法筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因 总被引:3,自引:1,他引:2
目的 筛选类风湿性关节炎(RA)滑膜细胞中的高表达基因,以探讨RA滑膜细胞发生肿瘤样增殖和侵蚀软骨的分子机理。方法 以骨性关节炎(osteoarthritis,OA)滑膜细胞作对照,采用差示PCR(differentially display PCR)方法,克隆RA滑膜细胞中高表达的cDNAs片段,经反向点杂交排除假阳性克隆后,将阳性克隆进行基因序列分析,结果共回收76仆差异条带,得到42个有插段的克隆,经反向点杂交后得到22个阳性克隆,对其中19个克隆进行基因序列分析表明,最长片段为501bp长,最短片段为145bp长,大部分在300bp,有13个克隆为已知基因,其中包括组织蛋白酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外都为基因的非编码区,结论 差示PCR方法在筛选差异表达基因方面存在着很大的局限性,组织蛋白酶B可能与RA滑膜细胞的软骨侵蚀性有关。 相似文献
67.
穴位注射在产时镇痛的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨穴位注射用于产时镇痛的效果。方法:将1996年10月-1997年3月分娩的88例产妇随机分为4组:对照组、盐水组、利多组、杜冷丁组,后3组为实验组,均行双合谷穴注药1次。结果:4组镇痛总有效率分别为23.8%、47.8%、38.1%、65.2%。宫口开全时(1)血皮质醇浓度的升高电杜冷丁组、盐水组、利多组,对照组依次增加,有显性差异(P<0.05);(2)孕妇桡动脉血气PCO2值依次升高,但差异无显性(P>0.05),新生儿脐静脉血气PCO2值依次升高,有显性差异(P<0.05)。结论:穴位注射用于产时镇痛,产妇始终处于清醒状态,方法简便易操作、镇痛效果明显。 相似文献
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近年来发现丙型肝炎病毒(HCV)不仅可以感染肝细胞,也可以侵入肝外多种组织和器官,尤其其嗜淋巴细胞性正在引起越来越多的关注。已有研究证明,丙型肝炎病人外周血单个核细胞(PBMC)中既有HCVRNA正链存在,也有负链存在,表明HCV可在PBMC中复制。PBMC?.. 相似文献
69.
目的 探索遗传性进行性无综合征耳聋患者的听功能改变特点。方法 一个常染色体显性遗传进行性无综合征耳聋家系 5 2名成员及听力正常组 15名 ,进行了纯音测试及畸变产物耳声发射 (distortionproductotoacousticemissions,DPOAE)测试。结果 无综合征耳聋家系中 34名成员纯音测试为感音神经性聋 ,其中纯音听阈均值 (puretoneaverage ,PTA)≥ 40dB的 15例 (2 9耳 )DPOAE反应缺失 ,PTA≤ 35dB伴高频下降的 12例 (2 3耳 )DPOAE高频或高、中频振幅下降或缺失 ;2 1名 (42耳 )纯音听阈正常成员中 ,有 12例 (15耳 )DPOAE高频或高、中频振幅下降或缺失。结论 DPOAE能鉴别出耳蜗亚临床的病理改变 ,对该病的早期诊断 ,遗传咨询有指导意义。 相似文献
70.
甲胎蛋白启动子调控表达p53基因的肝癌细胞靶向性基因治疗?… 总被引:7,自引:1,他引:6
目的 利用含有人甲胎蛋白启动子的腺相关病毒载体,构建能在人肝癌细胞株中特异表达目的的基因的质粒。方法 通过设计含有特定酶切点位点的引物,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋启动子(AFP promoter)主列并克琶含有绿色荧光蛋白(GFP报基因的质粒,pRT-UF5上,构建成含报告基因的重组腺相关病毒质粒rAAV-AFP-GFP转染表达AFP的Hep G2细胞株和不表达AFP的293因的质粒rAA 相似文献