STAT3在附子多糖后处理保护缺氧/复氧乳鼠心肌细胞机制中的作用

目的以信号转导子与转录激活子3(STAT3)为切入点,探讨附子多糖后处理对乳鼠缺氧/复氧后心肌细胞的保护机制。方法建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组、附子多糖组、STAT3特异性的阻断剂Stattic加附子多糖组、Stattic组。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,Western blot法分析磷酸化-STAT3(P-STAT3)、细胞色素C(CytC)和Caspase-3的表达,荧光定量PCR检测Bcl-xl mRNA及Bcl-xs mRNA的表达量。结果与缺氧/复氧组相比较,附子多糖后处理可以促进P-STAT3的表达,上调Bcl-xl基因表达而下调Bcl-xs基因表达,阻碍CytC自线粒体的释放及Caspase-3的表达,抑制心肌细胞凋亡发生。而Stattic可以逆转附子多糖后处理对心肌细胞的保护效应及P-STAT3的表达增加。结论附子多糖后处理对缺氧/复氧心肌细胞的保护效应与其激活STAT3、促进抑凋亡蛋白Bcl-xl表达、保护线粒体、阻断细胞凋亡的线粒体通路有关。     

附子多糖保护缺氧/复氧乳鼠心肌细胞及其抗内质网应激的机制研究

目的: 观察附子多糖对缺氧/复氧后心肌细胞的保护,并探讨附子多糖的保护机制是否与其抑制内质网应激反应有关。方法: 建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组(缺氧3 h后复氧6 h)和不同浓度附子多糖(0.1 g/L、1 g/L、10 g/L、20 g/L)+缺氧/复氧组。MTT法测定心肌细胞存活率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,Western blotting分析葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及caspase-12的表达,荧光定量PCR进一步检测CHOP及caspase-12 mRNA表达。结果: 缺氧复氧后,心肌细胞中内质网应激反应标志蛋白GRP78表达增加,内质网应激凋亡相关蛋白CHOP及caspase-12蛋白和mRNA表达亦明显升高。与缺氧/复氧组相比较,附子多糖预处理24 h后可以有效抑制缺氧/复氧引起的GRP78、 CHOP和caspase-12的表达上调,增加心肌细胞的存活率,抑制心肌细胞凋亡的发生。附子多糖的保护效应呈剂量依赖形式,10 g/L剂量时达到峰值。结论: 附子多糖保护缺氧/复氧后心肌细胞的可能机制与其抑制内质网应激所介导的细胞凋亡途径相关。     

四逆汤抗阿霉素性心衰心肌细胞线粒体凋亡机制探讨

目的探讨四逆汤抗阿霉素（ADR）性心衰大鼠心肌细胞凋亡的作用及线粒体机制。方法SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃（3．75g生药／kg/d）,实验结束时留取各组大鼠心肌组织,检测线粒体丙二醛（MDA）含量,MnSOD活性及其肿胀程度;Western blotting检测胞浆中细胞色素C（Cyt-C）、凋亡诱导因子（AIF）表达;比色法测定Caspase-3、Caspase-9蛋白酶的活性;流式细胞术测定心肌细胞凋亡情况。结果四逆汤组可以提高线粒体MnSOD的活性,减少MDA的含量及肿胀程度;有效抑制Cyt—C及AIF蛋白释放及Caspase-9和Caspase-3蛋白酶活性,减少凋亡的发生。结论线粒．体在阿霉素性心衰发病中可能占有重要作用,四逆汤可能是通过减轻线粒体氧化损伤,减少心肌细胞凋亡来保护心肌组织。     

人参皂甙Rg1对体外微环境诱导人骨髓间充质干细胞成血管内皮样细胞分化的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1在体外微环境诱导分化人骨髓间充质干细胞（human mesenchymal stem cells, hMSCs）成血管内皮样细胞的影响。 方法 采用模拟体内微环境的半透膜隔离非接触共培养的方法 体外诱导hMSCs向内皮细胞表型分化, 通过RT-PCR检测内皮细胞标志物血小板内皮黏附分子-1（CD31）、血管性血友病因子（vWF）、血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）mRNA的表达,免疫荧光染色检测CD31蛋白和血管内皮黏附分子-1（VCAM1）的表达。透射电镜观察诱导后细胞的超微结构鉴定诱导细胞的特征,并通过流式细胞仪检测诱导细胞CD31表达百分比。 结果 与成熟内皮共培养的骨髓基质干细胞具有微环境依赖性向内皮分化的能力。细胞培养第2周,开始出现形态学改变,胞体回缩,呈多角形改变。细胞培养第3周,细胞增殖速度明显加快,形态学上呈卵圆形或“铺路石”样改变;在基因水平上,RT-PCR显示经典内皮细胞标志物CD31、vWF、VE-cadherin mRNA的高表达;在蛋白水平上,免疫荧光染色CD31     

冠心病伴抑郁发作血瘀证/痰浊证的相关基因多态性研究

目的:探讨冠心病伴抑郁发作血瘀证和痰浊证与5-HTTLPR、GNβ3C825T、α-ADDUCINGly460Trp基因多态性的关系。方法:选择冠心病伴抑郁发作患者血瘀证115例,痰浊证120例,健康对照者148例,运用多聚酶链式反应技术(PCR)以及限制性内切酶方法检测5-HTT启动子区(5-HTTLPR),GNβ3C825T及ADDUCING460W3种基因多态性,并分析各基因型和等位基因在不同组中的分布频率,并与健康人对照组比较。结果:痰浊证组GNβ3825T等位基因频率与健康人对照组比较分布差异有显著性(χ2=4.568,P=0.033);血瘀证组ADDUCIN460WW基因型和W等位基因分布频率均明显高于健康人对照组,差异有显著性(χ2=12.29,P=0.002;χ2=13.159,P=0.001)。结论:GNβ3C825T可能与冠心病伴抑郁发作痰浊证的遗传机制相关,ADDUCING460W可能是冠心病伴抑郁发作血瘀证的易感基因。     

靶向CD36调控脂质代谢:糖尿病心肌病防治新靶点

脂质代谢异常诱发心肌结构和功能紊乱,进而导致糖尿病心肌病(DCM)的形成,已成为当前DCM研究的热点。CD36是主要的脂质跨膜转运蛋白,参与调节心脏脂质代谢,在DCM导致心肌损伤的分子机制中具有关键作用。本文总结了CD36的结构及其在特定细胞类型中的作用,并进一步探讨CD36在DCM中的病理生理作用,以及CD36作为靶点的潜在药物治疗策略。     

缺血预处理-后处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响

Objective To evaluate the effects of ischemic preconditioning-postconditioning on the intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury in rats. Methods Forty healthy male SD weighing 225-275 g were randomly assigned into 5 groups ( n = 8 each): group I sham operation (group S) ; group II intestinal IR (group IIR); group Ⅲ ischemic preconditioning (group Ipr); group IV ischemic postconditioning (group Ipo); group V Ipr+ Ipo. The rats were anesthetized with intraperitonel 20% urethane 5 ml/kg. Superior mesenteric artery (SMA) was occluded for 60 min followed by 60 min reperfusion. In group S, SMA was isolated but not occluded. In group Ipr, SMA was occluded for 10 min followed by 10 min reperfusion, and the rest procedures were performed using the method described in group IIR. In group Ipo, 60 min ischemia was followed by three 30 s episodes of ischemia at 30 s intervals for reperfusion. In group Ipr+ Ipo, Ipr was performed followed by Ipo and the procedures were performed using the methods described in group Ipr and Ipo. The animals were killed at 60 min of reperfusion. The intestinal tissues were immediately removed for determination of MDA content, SOD and MPO activities and the degree of damage to intestinal mucous membrane was scored according to Chiu score. Arterial blood samples were taken for determination of plasma concentrations of TNF-α and 1L-6. Results Compared with group S, Chiu score, MDA content, MPO activity, and plasma concentrations of TNF-α and IL-6 were significantly increased, whereas SOD activity decreased in the other 4 groups ( P < 0.05). Chiu score, MDA content, MPO activity, and plasma concentrations of TNF-α and IL-6 were significantly decreased, whereas SOD activity increased in group Ipr, Ipo and Ipr + Ipo as compared with group IIR ( P < 0.05). Chiu score and MDA content were significantly lower, whereas SOD activity higher in group Ipr + Ipo than in group Ipr and Ipo ( P < 0.05). No significant differences were detected in the indices between group Ipr and group Ipo ( P > 0.05). Conclusion Ischemic preconditioning-postconditioning can attenuate the intestinal IR injury in rats, and the efficacy is better than that of either Ipr or Ipo alone.     

银杏提取物抗大鼠阿霉素性心衰的作用及机制研究

目的:探讨银杏提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)对大鼠阿霉素性心衰的保护作用及ghrelin多肽机制的研究.方法:Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组,心衰模型组和银杏组.模型组和银杏组尾静脉注射阿霉素(ADR)复制心衰模型,银杏组给予银杏提取物水溶液灌胃(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),3周后测定各组大鼠的心功能;用放免法检测血浆及心肌组织中的ghrelin水平,高压液相法检测心肌组织中的三磷酸腺苷(ATP)与磷酸肌酸(CrP)含量,RT-PCR法检测心肌组织的ghrelin基因表达.结果:与正常组比较,模型组心功能明显降低,银杏组心功能指标较模型组显著改善.模型组血浆中的ghrelin水平明显高于正常组,但心肌组织中ghrelin水平显著低于正常组,心肌组织中的ATP含量及ghrelin mRNA的表达均明显低于正常组.与正常组和模型组比较,银杏组血浆中的ghrelin水平显著增高;心肌组织中的ATP含量及ghrelin mRNA的表达均明显高于模型组,接近正常组.结论:心肌细胞能量代谢障碍是阿霉素性心衰发病的主要原因之一,EGB干预治疗可改善阿霉素性心衰大鼠的心功能及心肌能量代谢,这可能与EGB增强了促能量代谢正平衡的ghrelin多肽的表达与生成有关.     

四逆汤对实验性小鼠心肌I/R时心肌组织HO-1-CO体系的影响

目的从血红素氧合酶-1-CO系统的角度探讨中药复方四逆汤抗心肌缺血再灌注损伤（IRI）的机制。方法48只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注模型组、四逆汤处理组，垂体后叶素联合硝酸甘油复制心肌缺血再灌注模型，采用双波长分光光度法间接测定血浆及心肌组织一氧化碳（CO）浓度、Western blot分析心肌组织血红素氧合酶-1（HO-1）蛋白的表达。结果IR模型组血浆和心肌组织CO浓度明显高于对照组，而四逆汤处理组较模型组又明显增加：Western blot显示模型组、四逆汤组在造模30min后，出现少量HO-1蛋白表达，2-4h达到高峰，至24h仍有少量表达；图像扫描灰度值比较，四逆汤组HO-1蛋白相对表达量在不同的时间点位均高于模型组，约为模型组的1-2.5倍。结论四逆汤能增加HO-1蛋白的表达，促进血红素分解，升高内源性CO浓度，调节血红素氧合酶-1-CO系统，发挥全面的细胞保护作用可能是四逆汤抗心肌IRI的重要机制之一。     

通心络对高血压、高血糖合并高胆固醇血症大鼠动脉的影响及机制

目的 评价通心络对高血压、高血糖合并高胆固醇血症大鼠模型动脉功能的影响及机制.方法 将体重300～400 g的成年自发性高血压大鼠(SHR)32只随机分为普食组(SHR组)、对照组(模型组)、低剂量通心络(0.2 g/kg)干预组(通心络低组)、高剂量通心络(0.8 g/kg)干预组(通心络高组),另取8只正常血压大鼠作为正常组,高脂喂养4周建立动物模型.通心络干预4周后,行主动脉离体血管功能检查,用荧光定量PCR方法测定过氧化物酶体增殖物受体γ(PPAR-γ)mRNA表达.结果 通心络干预后大鼠离体主动脉对乙酰胆碱、硝普钠引起的舒张反应增强,通心络高组对A23187的舒张反应增强(P＜0.05),通心络剂量依赖性增加PPAR-γ基因表达.结论 通心络干预具有保护血管内皮功能及逆转血管平滑肌功能障碍等作用,其机制可能与激活PPAR-γ基因表达有关.