非小细胞肺癌EGFR突变检测的研究和应用进展

近年来,靶向小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI）在表皮生长因子受体（EGFR）突变的晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的治疗中得到了广泛应用。对EGFR突变情况进行检测成为晚期NSCLC个体化治疗的重要前提。目前,EGFR突变的检测方法仍以组织检查为金标准,同时,细胞学及外周血EGFR突变检测亦得到良好发展。对EGFR突变水平进行定性及定量测定,可较为方便地预测EGFR-TKI的疗效,监测疾病的进展,并可较早地发现EGFR-TKI获得性耐药。本文对EGFR突变的定性及定量检测技术的应用进展作一综述。     

代谢组学方法分析肺癌患者血清和尿液小分子代谢产物的初步研究

背景与目的肺癌是当今世界各国最常见的恶性肿瘤之一。目前尚没有寻找到理想的用于肺癌诊断的肿瘤标志物,因而尝试用各种新方法来探索新的生物学标志物已成为肺癌研究的热点。本研究采用代谢组学技术对肺癌患者和其它肺部疾病患者血清及尿液中的小分子代谢物质进行分析,以寻求潜在的肺癌肿瘤标志物。方法运用气相色谱/质谱法(gas chromatography/mass spectrometry,GC/MS)对19例肺癌与15例其它肺部疾病患者的血清及尿液样本进行代谢组学分析,采用正交偏最小二乘判别分析法(orthogonal to partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)进行建模,运用两样本的t检验寻找两组间差异性代谢产物。结果检测到血清中代谢产物共57种,尿液中代谢产物共38种,多变量统计结果显示肺癌患者与其它肺部疾病患者的代谢谱有明显差异,根据t检验结果寻找到血清相关的差异代谢产物13种,尿液相关的差异代谢产物7种。结论利用代谢组学方法能区分肺癌与其它肺部疾病患者,其结果在分子水平辅助肺癌的诊断、未来作为新技术应用于肺癌的诊断有一定的前景。     

单核苷酸多态性与小细胞肺癌的研究进展

目的:基于目前多种基因的单核苷酸多态性(SNPs)在小细胞肺癌(SCLC)中的研究进展,进一步探讨基因的SNPs对SCLC易感性、化疗疗效及预后的影响.方法:应用PubMed和万方期刊全文检索系统,以“小细胞肺癌,单核苷酸多态性”等为关键词,检索2006-2011年发表的相关文献.共检索到258文献条.纳入标准:1)SNPs与SCLC易感性;2)SNPs与SCLC化疗疗效;3)SNPs与SCLC预后.根据纳入标准,共纳入分析文献39篇.结果:单核苷酸多态性是第3代分子遗传标志,SNPs决定基因的功能单位和人群遗传变异的内在特征,它反映了个体表型、疾病易感性和对药物、环境因子反应的差异.近年来国内外许多学者研究表明,许多基因位点的SNPs与SCLC的易感性、化疗疗效及预后相关,这些SNPs主要发生于DNA修复基因、致癌物质代谢基因、癌基因、抑癌基因、凋亡相关基因和药物代谢相关基因等.随着第2代高通量测序方法的应用,不仅能对高频和低频乃至稀有变异进行检测,还能发现新的突变位点,将在一定程度上推动SNPs的研究.结论:SNPs在SCLC的易感性、化疗疗效及预后的研究中发挥着潜在的重要的作用.     

小鼠肺部肿瘤集聚髓源性抑制细胞实验研究

目的观察髓源性抑制细胞（MDSCs）在荷瘤小鼠肺部组织的表达情况。方法取12只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只。实验组：将体外培养的3LL细胞（0.3×106个）注射入小鼠尾静脉,成瘤后3周取小鼠肺组织,酶消化肺组织,制备肺组织单细胞悬液,采用流式细胞术检测MDSCs（GR1-FITC、CD11b-PE双染阳性）的表达量。对照组：在小鼠尾静脉注射PBS,其余步骤同实验组。结果实验组小鼠肺部组织高表达免疫抑制细胞MDSCs（GR＋CD11b＋双阳性）,表达量为（19.92±6.08）%;对照组MDSCs表达量为（7.06±2.67）%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论肺癌小鼠的肺组织高表达免疫抑制细胞MDSCs。     

小鼠肺部肿瘤集聚髓源性抑制细胞实验研究

目的 观察髓源性抑制细胞(MDSCs)在荷瘤小鼠肺部组织的表达情况.方法 取12只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只.实验组:将体外培养的3LL细胞(0.3×106个)注射入小鼠尾静脉,成瘤后3周取小鼠肺组织,酶消化肺组织,制备肺组织单细胞悬液,采用流式细胞术检测MDSCs(GR1-FITC、CD11b-PE双染阳性)的表达量.对照组:在小鼠尾静脉注射PBS,其余步骤同实验组.结果 实验组小鼠肺部组织高表达免疫抑制细胞MDSCs(GR+CD11b+双阳性),表达量为(19.92±6.08)%;对照组MDSCs表达量为(7.06±2.67)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.001).结论 肺癌小鼠的肺组织高表达免疫抑制细胞MDSCs.     

可手术非小细胞肺癌多学科治疗对预后因素的影响

背景与目的：肺癌为当前最常见的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占绝大多数，而且大部分在诊断时已属晚期，对Ⅲ期估计不能全部切除的NSCLC，通过新辅助化疗可以使原发肿瘤缩小，提高手术切除率，消灭微小转移，延长NSCLC患者的生存率。所以本文目的在于探讨先化疗后手术对NSCLC预后因素的影响。方法：回顾性收集我院1995年-1997年先化疗后手术的Ⅰ-Ⅲ期NSCLC住院病例98例，其中Ⅰ期35例、Ⅱ期21例、Ⅲ期42例，手术前先进行1和2周期化疗的分别为83例和15例，化疗方案为MVP、MOP或MAP等，化疗缓解率（RR），部分缓解（PR）45例，稳定（SD）53例，手术方式为肺叶切除或全肺切除，分站摘除所有肉眼可见的胸内淋巴结，手术病理提示鳞癌35例、腺癌48例、混合型9例、其他6例，术后化疗2—3个周期（1996年后Ⅰ期NSCLC术后未作化疗）。对先化疗后手术的98例NSCLC患者的临床资料，随访5年以上，运用Kaplan—Meier生存曲线分析，Log Rank检验和Cox多因素分析，对影响预后的因素进行单因素和多因素分析。结果：98例先化疗后手术NSCLC患者的中位随访时间为41．2月，其中36例存活，62例死亡。98例NSCLC患者的1年、3年、5年生存率分别是88．78％、49．63％、18．46％；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期5年生存率分别为33．23％、20．26％、5．52％（P=0．0002）；N0、N1、N2组5年生存率分别为35．49％、19．08％、4．90％（P=0．0004）。先化疗后手术NSCLC总分期越晚预后越差；术前末次化疗距手术时间为1月内预后好；全肺切除较肺叶切除预后差；肺门固定较肺门活动预后差；胸内淋巴结（＋）预后差，N1较N0预后差，N2较N1预后更差；其它预后不良因素包括肿块侵犯大血管、脏器、胸壁、心包，术中出血量≥400ml，腺癌；化疗后肿块纤维化预后好。本组结果还显示：术前化疗2周期较术前化疗1周期预后好；肿瘤坏死和术后未行化疗者预后差。结论：影响先化疗后手术NSCLC患者的预后因素为：总分期、术前末次化疗距手术时间、术式、肺门活动度、胸内淋巴结、肿块侵犯部位、术中出血量、病理类型及肿瘤纤维化。术前化疗次数、肿瘤坏死和术后化疗亦可能是先化疗后手术NSCLC预后的影响因素。     

可手术切除的Ⅲ期非小细胞肺癌预后因素临床分析

目的 探讨新辅助化疗对手术切除的Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)预后因素的影响.方法 回顾性分析先化疗后手术的43例Ⅲ期NSCLC患者的临床资料,随访5年以上,运用Log-Rank分析和Cox单、多因素分析,对影响预后的因素进行单因素和多因素分析.结果 43例先化疗后手术Ⅲ期NSCLC患者的1、3、5年生存率分别为81.40%、27.91%、9.30%.Cox单因素分析结果显示影响先化疗后手术Ⅲ期NSCLC预后因素为总分期、术式、切端及术式、肺门、肿瘤大小、输血量和术后化疗周期数.Cox多因素分析结果显示影响先化疔后手术Ⅲ期NSCLC预后因素为肿瘤大小和术后化疗周期数.肿块≤3 cm和术后化疗＞4个周期患者预后好.结论 肿瘤大小和术后化疗周期数为影响先化疗后手术Ⅲ期NSCLC患者重要的预后因素.肿瘤小、术后化疗周期数多的患者预后好.对于临床估计患者的生存时间、提供最佳的治疗方式、改善预后具有重要意义.     

非小细胞肺癌中蛋白激酶C-α的表达及其意义

目的:探讨蛋白激酶C-α(protein kinase C-α,PKC-α)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞株中表达的意义。方法:应用免疫组织化学SP方法检测NSCLC组织芯片中PKC-α蛋白的表达,其中肿瘤组织160例,癌旁组织40例,Ⅰ期91例,Ⅱ～Ⅲ期69例;应用反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测NSCLC细胞株A549、耐顺铂A549(A549-DDP)、H460及H1299等细胞株中PKC-αmRNA的表达;应用Western印迹法检测上述细胞株中PKC-α蛋白的表达。结果:PKC-α蛋白在160例NSCLC组织中的表达率为53.1%(85/160),癌旁组织中的表达率为7.5%(3/40),差异有统计学意义(P<0.01);PKC-α蛋白的表达在不同病理类型之间(腺癌、鳞癌及细支气管肺泡癌)的差异无统计学意义(P>0.05);与患者的性别、年龄等因素亦无明显相关性;而与NSCLC,特别是腺癌的临床分期、淋巴结是否转移相关(P<0.05);与腺癌的分化程度相关(P<0.05),但与鳞癌的分化程度无明显相关性;在NSCLC细胞株A549、A549-DDP、H460及H1299中均存在PKC-αmRNA及蛋白的表达,其中以A549-DDP细胞株的表达水平为最高。结论:在NSCLC组织及细胞株中存在PKC-α的表达;PKC-α蛋白表达在NSCLC特别是腺癌的浸润、转移和发展中具有重要作用;在多种NSCLC细胞株中PKC-α的表达水平存在一定差别。     

肺癌患者血清C反应蛋白检测与预后关系的探讨

目的:探讨肺癌患者血清CRP与其病理特点以及预后的关系。方法:2001年1月～2002年12月本院105例Ⅲ和Ⅳ期未手术肺癌患者,治疗前1周和治疗后4周左右,同时检测血清CRP和CEA,对可能影响预后的因素进行分析。结果:肺鳞癌基线血清CRP为24.57±33.38,高于肺腺癌10.11±18.35和小细胞肺癌8.12±10.32;治疗前、后血清CRP变化与生存相关(P<0.05),治疗前、后血清CRP和CEA联合检测结果与生存情况密切相关(P<0.01)。Cox多因素分析提示治疗后CRP变化和化疗次数与患者的预后相关。结论:血清CRP可以作为肺癌诊断分型和判断预后的一项参考指标。