慢性移植物抗宿主病狼疮样肾炎小鼠模型的研制

目的研制可诱导的、耗时较短的慢性移植物抗宿主病(GVHD)狼疮样肾炎小鼠模型。方法无菌分离母体DBA/2小鼠淋巴细胞,注入雌性(C57BL/10R×DBA/2)F1杂交鼠。观察16周。结果注射后8周模型小鼠以肾小球细胞增生为主要特征,未见蛋白尿及间质损害;注射后12周以大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿及高脂血症为其主要症状,病理以肾小球系膜增宽、基底膜节段性增厚、肾间质细胞浸润为特点;至注射后16周则以肾功能损害为主要改变,病理以肾小球基质大量增生,肾间质纤维化为主要特征。血清学示抗dsDNA抗体阳性,免疫荧光示免疫球蛋白及补体沿系膜(IgM)和毛细血管(IgG、C     

颗粒膜蛋白的表达与狼疮肾炎的关系研究

目的 了解血浆黏附分子颗粒膜蛋白（ＧＭＰ－１４０）水平及其在肾组织的表达与狼疮肾炎（ＬＮ）活动、肾脏病理及痛功能损害的关系。方法 用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定血浆ＧＭＰ－１４０水平,并用免疫组织化学染色法,观察正常肾和狼疮组织ＧＭＰ－１４０表达。结果 ＬＮ患者较正常人以及活动ＬＮ较非活动ＬＮ,血ＧＭＰ－１４０水平显著升高;ＬＮ肾组织ＧＭＰ－１４０表达较正常肾组织明显增强,且狼疮肾组织ＧＭＰ－     

狼疮肾炎患者肾组织CD40及其配体表达的免疫组织化学分析

目的　探讨CD40 CD40配体 (CD40L)相互作用在狼疮肾炎 (LN)发病机制中的可能作用。方法　用免疫组织化学方法对 2 0例LN患者肾组织CD40和CD40L的表达进行检测 ,并对其与肾脏病变的相关性进行分析。结果　Ⅲ、Ⅳ型LN肾组织CD40表达较正常对照组显著上调 (P <0 0 1) ,除系膜细胞、内皮细胞和肾小管上皮细胞CD40表达增强外 ,还出现CD40阳性的间质浸润细胞。Ⅲ、Ⅳ型LN患者肾组织CD40L表达亦显著增强 (P <0 0 1) ,其分布范围与CD40一致。Ⅱ、Ⅴ型LN患者肾组织CD40表达范围和强度与正常肾组织大致相似。LN肾组织CD40表达与病变活动指数相关 (r =0 78,P <0 0 1)。结论　CD40 CD40L在肾脏局部的相互作用可能在LN发生和发展中起重要作用。     

核因子—kB在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的：了解狼疮疮肾炎（ＬＮ）肾组织中核因子（ＮＦ）－ｋＢ的表达并探讨其与ＬＮ肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法以ＮＦ－ｋＢ亚基Ｐ６５单抗为抗体,采用微波免疫组织化学染色（ＡＰＡＡＰ法）检测ＬＮ肾组织ＮＫ－ｋＢ表达,并进一步分析其与肾小球内Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达、ＬＮ活动指数、肾脏病理和功能损害的关系。结果狼疮肾炎肾组织中ＮＦ－ｋＢ表达较正常肾组织显著增高,以ＷＨＯⅣ型为最显著。ＮＦ－ｋＢ在肾小球和肾     

急性心肌梗死猝死者心肌细胞凋亡与p53蛋白和Bcl2蛋白表达

目的 :探讨 p5 3和 Bcl 2蛋白在急性心肌梗死 (AMI)猝死者心肌细胞凋亡中的作用。方法 :用凋亡原位末端标记检测 (TU NEL)法检测 2 0例 AMI猝死者和 10例心脏正常车祸死亡者心肌细胞凋亡 ,用免疫组化法检测 p5 3和 Bcl 2蛋白在心肌细胞中表达水平 ,并探讨其相互关系。结果 :AMI猝死者梗死区心肌细胞凋亡数为 (5 5 7.95± 144 .10 )个 / 10 0 0个 ,明显高于正常对照组 (34.30± 2 0 .6 8)个 / 10 0 0个 (P<0 .0 5 ) ;猝死者梗死区心肌细胞中 p5 3蛋白表达阳性细胞数为 (4 41.6 5± 131.6 8)个 / 10 0 0个 ,明显高于正常对照组 (2 0 .2 0±2 6 .2 7)个 / 10 0 0个 (P<0 .0 5 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的正相关性 (r=0 .6 5 5 3,P<0 .0 0 2 ) ;Bcl 2蛋白表达阳性细胞数为 (36 .2 5± 43.17)个 / 10 0 0个 ,明显低于正常对照组 (10 0 .10± 71.34)个 / 10 0 0个 (P<0 .0 5 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显负相关性 (r=- 0 .810 3,P<0 .0 0 1) ;梗死区心肌细胞内 p5 3与Bcl 2蛋白表达数之间呈明显的负相关性 (r=- 0 .80 78,P<0 .0 0 1)。不同支数冠状动脉病变猝死者梗死区心肌细胞的凋亡数 1支者 (5 0 6 .38± 175 .88)个 / 10 0 0个 ,2支者 (5 5 4.38± 92 .15 )个 / 10 0 0个 ,3支者 (6 6 8.2     

腹膜透析液对腹膜间皮细胞凋亡与增殖的影响

目的　探讨PD 2腹膜透析液 (腹透液 )在体内对腹膜间皮细胞凋亡和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法　在正常二级SD大鼠上建立腹膜透析模型 ,用不同浓度的PD 2腹透液灌注腹腔 ,二次 /天 ,2 0ml/次 ,生理盐水作对照。透析第 8周后杀检 ,取腹膜用LSABkit和TUNELkit作免疫 凋亡双重染色。结果　腹透液显著诱导腹膜间皮细胞凋亡 ,以高渗糖腹透液尤为显著 ,不同浓度腹透液对PCNA影响则不同 ,透析液诱导的凋亡与PCNA表达之间无相关性 ,但与腹透液浓度正相关 ,PCNA表达则与腹透液浓度负相关。结论　腹透液可诱导腹膜间皮细胞凋亡 ,并影响PCNA表达 ,其作用与腹透液浓度不同而异。     

CD3单抗和淋巴细胞功能相关抗原-1对狼疮肾炎外周血单个核细胞的共刺激作用

目的：探讨CD3单抗（mAb)和淋巴细胞功能相关抗原－1单抗（LFA－1mAb)对狼疮肾炎（LN）患者外周血单个核细胞（PBMC）的共刺激作用。方法：2例LN患者被分为活动期（n=14)和非活动期（n=15)，以12例健康献血员为对照，观察CD3mAb或（和）LFA－1mAb共刺激及阻断1－磷酯酰肌醇3－激酶（PI3－K）对体外培养96h后PBMC增生和IL－2产生的影响。PBMC提取采用Ficoll密度梯度离心法，细胞增生实验采用^3H-TdR掺入法，IL－2测定采用ELISA法。结果：PBMC培养96h后，自然生长的LN非活动期和活动期PBMC ^3H-TdR掺入量和IL－2合成与正常对照无明显差异（P值均＞0或0．05）；与自然生长的PBMC相比，CD3mAb单独处理增加了LN非活动期（P值均＜0．05）和活动期（P值均＜0．05）PBMC^3H-TdR掺入量和IL－2合成。而单独CD3mAb对正常对照PBMC^3H-TdR掺入量和IL－2合成没有影响（P值均＞0．05）。与CD3mAb单独处理组相比，CD3mAb和LFA－1mAb共刺激均增加了LN活动期（P值均＜0．05）和非活动期（P值均＜0．05）及正常对照（P值均＜0．05）PBMC ^3H-TdR掺入量和IL－2合成；与对照组相比，CD3mAb和LFA－1mAb共刺激后活动期（P值均＜0．01）和非活动期（P值均＜0．01）PBMC^3H-TdR掺入量和IL－2合成均增加，但活动期效应明显强于非活动期（P＜0．01）。PI3－K特异抑制剂Wortmannin(WT)的加入明显抑制了CD3mAb和LFA－1mAb共刺激诱导的PBMC增生和IL－2的分泌效应（P＜0．01，P＜0．01）。结论：CD3和FLA－1对狼疮肾炎PBMC具有共刺激作用，这种共刺激作用可能参与了狼疮肾炎T、B细胞的异常活化，阻断共刺激传递信号分子PI3－K则能抑制CD3和LFA－1介导的共刺激作用。     

68例狼疮肾炎的肾小管间质病变探讨

目的探讨肾小管间质病变（ＴＩＬ）在狼疮肾炎（ＬＮ）的意义。方法分析了６８例ＬＮ资料，并对其中４２例作了较长期的随访。结果ＬＮ的ＴＩＬ发生率为７５％，ＴＩＬ明显者，肾小管功能显著下降，血肌酐、尿蛋白水平明显增加（Ｐ＜００１），肾小管间质与肾小球急、慢性病理改变之间均显著相关（Ｐ＜００１），同时，存在明显ＴＩＬ者，其生存率及肾存活率有下降趋势。结论ＴＩＬ与肾小球病变呈平行的正相关关系，且对ＬＮ预后有一定的影响。     

以cDNA为内参标RT-PCR定量检测心肌细胞内p53和Bcl-2基因mRNA表达量的方法研究

目的 :探讨 p5 3和 Bcl 2基因在急性心肌梗死时心肌细胞中 m RNA表达量的检测方法。方法 :用以c DNA为内参标的逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 p5 3和 Bcl 2基因的 m RNA表达量。结果 :p5 3基因 m RNA表达量〔m RNA/总 RNA(ng/ g)〕依次为 :冠脉结扎后 4小时组 (5 76 4 8.78± 19776 .96 ) ng/ g>结扎后 6小时组 (339.0 6± 10 4 .11) ng/ g>结扎后 3小时组 (16 5 .4 4± 33.36 ) ng/ g>结扎后 2小时组 (88.2 5±16 .6 5 ) ng/ g>未结扎 (0 )组 (3.16± 0 .6 9) ng/ g和结扎后 1小时组 (16 .37± 2 .73) ng/ g、8小时组 (2 3.13±7.0 3) ng/ g、 12小时组 (6 .75± 2 .86 ) ng/ g,P均 <0 .0 5 ;Bcl 2基因 m RNA表达量〔m RNA/ g总 RNA(ng/ g)〕:冠脉结扎后 3小时组 (4.5 3± 1.5 9) ng/ g、 4小时组 (0 .0 2± 0 .0 1) ng/ g和 6小时组 (3.4 6±0 .39) ng/ g<结扎后 2小时组 (5 2 .4 8± 14 .18) ng/ g、8小时组 (5 9.2 4± 2 .91) ng/ g<结扎后 1小时组 (77.2 0±12 .4 8) ng/ g和未结扎 (0小时 )组 (81.77± 9.6 2 ) ng/ g<结扎后 12小时组 (99.6 0± 4 .71) ng/ g,P均 <0 .0 5。该种方法能对不同的样本检出不同量的 m RNA含量 ,其特异性强 ,且能检出 0 .0 2 ng/ g的 m RNA含量 ,敏感性高。结论     

免疫学指标在狼疮肾炎中的临床意义

目的 探讨免疫学指标在狼疮肾炎（LN）中的诊断价值。方法 将547例系统性红斑狼疮（SLE）患者分为三组：A组以肾脏受累的临床表现为主；B组以SCE活动的人身表现为主；C组为缓解期。对自身抗体及补体进行比较。结果 在LN和活动性SLE中，自身抗体及补体各成分各有不同特点。结论 C3、C4以及抗dsDNA是判断LN及SLE活动重要指标，抗Sm特异性强，不随治疗而消失，可作记性抗体。Rnp、Rip与肾损害无明显关系。