中西医在临床检验诊断学的结合位点

<正>医学的发展促使临床检验诊断学突飞猛进,时代的进步也对传统中医学提出了更高的要求。临床检验诊断学尽管源于西医,但在中医诊疗中的作用亦愈发凸显,二者关系日臻密切。本文从临床检验视角考量中西医结合形式,系统分析中西医在临床检验诊断学的结合位点。1互补性结合临床检验诊断学具有微观性、实     

补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症TRPV1及其致敏因子NGF的影响

目的研究补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)简称内异症,瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ(transientreceptor potential vanilloid receptor 1,TRPV1)及致敏因子神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的影响,以探讨补肾温阳化瘀方治疗EMT疼痛的作用机制。方法将近交系BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、孕三烯酮组,每组15只。观察各组扭体反应,并采用酶联免疫法(ELISA)检测血清NGF的含量,采用免疫组化SP法及Western blot法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白的表达,采用Real-time PCR方法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组血清NGF含量显著高于假手术组(P0.01),且与小鼠扭体次数呈正相关(r=0.574,P0.01);与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组血清NGF含量显著下降(P0.05);模型组子宫NGF、TRPV1蛋白及NGF、TRPV1 mRNA表达均高于假手术组(P0.01)。与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白表达均显著降低(P0.01),NGF、TRPV1 mRNA以中药高剂量组下降最为明显(P0.01)。子宫及异位灶NGF与TRPV1蛋白及mRNA表达均呈正相关(P0.01)。结论 TRPV1及致敏因子NGF共同参与了EMT疼痛的发生;补肾温阳化瘀方可通过降低NGF对TRPV1的上调作用从而发挥抑制EMT疼痛的作用。     

补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡中ADAM8 及 ADAMTS-1 影响的比较

目的?探讨补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡中去整合素-金属蛋白酶8（ADAM8）和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）表达的影响。方法?机械法分离昆明乳鼠窦前卵泡，随机分为空白组、正常组、补肾组、疏肝组，空白组不加血清，正常组加入正常大鼠血清，体外培养12天；补肾组加入补肾调经Ⅱ号方高剂量大鼠含药血清，疏肝组加入逍遥丸高剂量大鼠含药血清体外培养11天。11天时补肾组和疏肝组分别改为补肾调经Ⅲ号方高剂量和逍遥丸低剂量大鼠含药血清体外培养1天。培养12天加入人绒毛膜促性腺激素（hCG）后0、8、12、16 h采用RT-PCR法检测各组卵泡和卵丘卵母细胞复合体（COCs）中ADAM8、ADAMTS-1 mRNA表达，细胞免疫荧光染色法比较各组ADAM8、ADAMTS-1蛋白表达。结果?加入hCG后0、8、12、16 h，各组ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白的表达逐渐升高，各时间点空白组与正常组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与本组0、8 h比较，补肾组12、16 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与本组0 h比较，疏肝组8 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与空白组和正常组比较，补肾组与疏肝组8、12、16 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高，8 h疏肝组高于补肾组，12 h补肾组高于疏肝组（均P<0.05）。补肾组ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白的表达高峰高于疏肝组（P<0.05）。结论?补肾调经方和逍遥丸均可通过增强ADAM8和ADAMTS-1的蛋白溶解作用，使卵泡壁破裂而诱发排卵，补肾法诱发排卵的作用优于疏肝法。     

基于网络药理学探讨藿香正气方治疗妊娠期新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的?采用网络药理学方法分析藿香正气方治疗妊娠期新型冠状病毒肺炎的作用机制，探究其多成分—多靶点—多通路的相关关系。方法?运用中药系统药理学分析平台（TCMSP）筛选藿香正气方中的活性成分，SwissTargetPrediction服务器收集成分靶点，人类基因数据库（GeneCards）获取妊娠期新型冠状病毒肺炎靶点，将成分靶点与疾病靶点映射，获取共有靶点。STRING数据库构建蛋白互作（PPI）网络，用Cytoscape3.3.0软件进行拓扑参数分析，得到核心靶点，并构建“药物—成分—靶点—疾病”网络。DAVID数据库对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果?筛选得到藿香正气方中84个活性成分，1 007个成分靶点，疾病靶点236个，两者交集靶点72个。涉及丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、白细胞介素6（IL-6）、MAPK3、MAPK8、肿瘤坏死因子（TNF）、表皮生长因子受体（EGFR）、IL-2等31个核心靶点。GO富集分析显示448个条目，主要集中于细胞凋亡的调控、氧化应激反应、对细胞因子刺激的反应等过程。KEGG富集分析有52条通路，主要参与Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、ErbB信号通路、血管内皮生长因子（VEGF）信号通路和癌症、免疫、凋亡等相关通路调控。结论?藿香正气方的有效成分可通过作用于MAPK1、IL-6、MAPK3、MAPK8、TNF、EGFR等靶点调节多条信号通路，发挥对妊娠期新型冠状病毒肺炎的治疗作用。     

加减温经汤对月经病实寒证患者血清NO/ET-1及TF/TFPI的影响

正寒邪是月经病常见的致病因素之一,寒主收引、主凝滞,故寒客冲任、血海瘀滞可导致痛经、月经后期、经血量少等病症。临床流行病学的相关调查表明,在经龄女性中,寒凝血瘀发病率达36%以上[1]。笔者应用加减温经汤治疗月经病实寒证取得较好的临床效果,拟通过检测月经病实寒证患者血清一氧化氮(nitric oxide,NO)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和组织因子(tissue factor,TF)、组织因子途径抑制物(tissue     

补肾调经方通过有氧糖酵解促进控制性超促排卵小鼠囊胚发育的实验研究

目的?观察补肾调经方对囊胚质量的影响及与有氧糖酵解相关基因表达的关系。方法?将100只动情周期正常的费城癌症研究所（ICR）雌性小鼠按照随机数字表法分为4组，分别为正常组、模型组、补肾低剂量组、补肾高剂量组，每组25只。除正常组，其余各组小鼠建立控制性超促排卵模型。正常组及模型组雌鼠每日上午 9：00灌胃蒸馏水，补肾低、高剂量组雌鼠每日上午9：00灌胃补肾调经方低、高剂量（2.6、5.2 g/mL），连续 10 日。模型组及补肾低、高剂量组于第 11 日下午 16：00 同时腹腔注射孕马血清促性腺激素（PMSG）10 IU/只，48 h 后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）10 IU/只；正常组于第11日下午16：00 腹腔注射生理盐水 0.1 mL。连续3个周期，每次间隔4天。模型组及补肾低、高剂量组均在控制性卵巢刺激（COS）第 3 次腹腔注射 HCG 后（下午 16：00）立即与雄性小鼠合笼。正常组在动情期第 3 次腹腔注射生理盐水后（下午 16： 00）立即与雄性小鼠合笼。次日清晨检查阴栓，见栓的雌鼠记为妊娠。妊娠第4天（注射HCG后96 h）在体式显微镜下取出囊胚，观察囊胚质量并计数，计算优质囊胚率；免疫荧光染色、实时荧光定量PCR检测囊胚中的乳酸脱氢酶（LDH）、M2-型丙酮酸激酶（PKM2）、葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PDH）、单羧酸转运蛋白4（MCT4）蛋白及mRNA的表达。结果?与正常组比较，模型组的囊胚数量增加（P<0.05），优质囊胚率降低（P<0.05），囊胚G6PDH、PKM2、LDH、MCT4蛋白及mRNA表达均降低（P<0.05）；与模型组比较，补肾低、高剂量组的优质囊胚率升高（P<0.05），囊胚G6PDH、PKM2、LDH、MCT4蛋白及mRNA表达均升高（P<0.05）。结论?补肾调经方可增加超促排卵小鼠囊胚数量，提高小鼠囊胚质量，促进胚胎植入，其机制可能与上调有氧糖酵解改善早期胚胎能量代谢有关。