卡托普利迟释型缓释片体外释放和体内吸收相关性研究

 目的卡托普利迟释型缓释片的体外释放和体内吸收的比较。方法以0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为释放介质,转速 100 r·min^-1,在预定时间取样,HPLC测定卡托普利迟释型缓释片的体外释放度。给Beagle犬交叉服用单剂量卡托普利迟释型缓释片(CDSR)和普通缓释片(CSR),定时抽取血样,采用柱前衍生-固相萃取-HPLC测定血浆样品中卡托普利浓度,以Wagner-Nelson法计算药物的体内吸收百分数。结果迟释型缓释片在体外释放3 h开始起释,5 h时累积释放率仅10％,而普通缓释片1 h即释放20％。Beagle犬服用迟释型缓释片后2 h内血浆中未检测到药物,3～5 h时血药浓度达最大;而普通缓释片服用 0.5 h后血浆中即可检测到药物,1～3 h时血药浓度达最大。结论卡托普利迟释型缓释片的体外释放和体内吸收有一定相关性。     

脂质组分对阳离子脂质体介导的基因转染的影响

 目的研究阳离子脂质体膜的组分对细胞摄取和基因转染的影响。方法以十八酰胺(SA)、3β[N-(N′,N′-二甲基氨基乙基)氨甲酰基-胆固醇(DC-Chol)、卵磷脂(SPC)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)等为膜材,制备阳离子脂质体。用流式细胞仪测定不同阳离子脂质体对细胞摄取荧光标记寡核苷酸(FAM-ODN)的效率,结合荧光显微镜观察报告基因(pEGFP-N1)编码的绿荧光蛋白(GFP)表达的情况。结果不同阳离子脂质对细胞摄取产生截然不同的效果,DC-Chol/SPC脂质体对细胞摄取ODN的促进作用显著高于SA/SPC脂质体;而中性脂质对基因表达有重要影响,DC-Chol/DOPE脂质体的转染效率优于DC-Chol/SPC脂质体。结论通过药剂学的处方筛选,可以提高阳离子脂质体作为非病毒载体的性能。     

大肠杆菌T蛋白的聚合状态分析

 目的解析大肠杆菌T蛋白的四级结构。方法利用分段克隆法克隆表达了T蛋白及其两个独立结构域分支酸变位酶(CM,T/1-94)和预苯酸脱氢酶(PDH,T/93-373),再利用SDS-PAGE测得变性条件下T蛋白、CM和PDH的M_r分别为42×10³,11×103和32×10³,HPLC测得天然条件下CM和PDH的M_r分别为25×10³和63×10³,再用化学交联法分析聚合状态。结果显示T蛋白、独立结构域CM和PDH均为二聚体。结论说明大肠杆菌T蛋白二聚体是通过CM与CM、PDH与PDH相连的。     

黄芩苷对小鼠脑片和大鼠皮质神经元缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用

 目的在离体水平,探讨黄芩苷对缺氧缺糖/再灌注(OGD/RP)诱导的脑片及神经元损伤的保护作用及机制。方法小鼠离体脑片OGD/RP模型中,以2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)产物白评价脑片活性;原代培养大鼠皮层神经元OGD/RP模型中,以噻唑蓝(MTT)还原和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定神经元活性变化,用2,7-二氯荧光素二乙酸盐(DCF-DA)测定细胞内自由基水平。观察不同时间给予黄芩苷对损伤的保护作用。结果在脑片,全程给药和OGD时给予黄芩苷0.01～1μmol·L^-1,再灌注时给予黄芩苷0.1～1μmol·L^-1,可显著减轻损伤。在神经元,全程给予黄芩苷0.1～1μmol·L^-1可减轻神经元损伤,并降低神经元内自由基水平升高。结论黄芩苷对OGD/RP损伤有浓度依赖性保护作用,再灌注时给药亦有效,其作用至少部分与抗自由基有关。     

大肠杆菌T蛋白的聚合状态分析

 目的解析大肠杆菌T蛋白的四级结构。方法利用分段克隆法克隆表达了T蛋白及其两个独立结构域分支酸变位酶(CM,T/1-94)和预苯酸脱氢酶(PDH,T/93～373),再利用SDS-PAGE测得变性条件下T蛋白、CM和PDH的M_r分别为42×10³,11×10³和32×10³,HPLC测得天然条件下CM和PDH的M_r分别为25×10³和63×10³,再用化学交联法分析聚合状态。结果T蛋白、独立结构域CM和PDH均为二聚体。结论说明大肠杆菌T蛋白二聚体是通过CM与CM、PDH与PDH相连的。     

麦当乳通颗粒对哺乳期大鼠的催乳作用

目的研究麦当乳通颗粒对哺乳期大鼠的催乳作用。方法哺乳期大鼠灌胃给予不同剂量的麦当乳通颗粒后，观察其泌乳量、乳腺组织形态、血清泌乳素水平和垂体嗜酸性细胞数量的变化，以及对乳鼠生长的促进作用。结果麦当乳通颗粒可促进乳腺腺泡腔及导管扩大增生，减少乳腺小叶间脂肪结缔组织，明显增加垂体嗜酸性细胞数量和血清泌乳素水平，从而显著增加母大鼠的泌乳量，并显著提高其所喂养的仔鼠体重。结论麦当乳通颗粒对哺乳期大鼠有明显的催乳作用。     

肠道菌群对菊花提取物的代谢作用

目的观察和比较人、大鼠、B eag le犬及家兔肠道菌群对菊花提取物(Chry santhem um m orif olium ex tracts,CM E)的代谢作用。方法采用人、大鼠、B eag le犬及家兔的新鲜粪便37℃厌氧培养,经醋酸乙酯提取后采用RP-HPLC及LC-M S方法对代谢成分进行分离和定性、定量分析。结果CM E容易被肠道菌群代谢,0.5 h后样本中能检测出较高浓度代谢物;经LC-M S检测,主要的代谢物为木犀草素和芹菜素;随着代谢时间的延长,两者均出现降解代谢的现象,24 h后几乎检测不到这两种代谢物;且人、大鼠和B eag le犬肠道菌群对CM E的代谢较快,而家兔肠道菌群对CM E的代谢过程比较平缓。结论在离体条件下,CM E可以被人、大鼠、B eag le犬及家兔的肠道菌群代谢,主要的代谢物为木犀草素和芹菜素。     

TRAIL蛋白与顺铂协同诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子（INF）相关凋亡诱导配体（TRAIL）蛋白和顺铂联合应用对人横纹肌肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法将不同浓度的TRAIL作用于培养的人RD横纹肌肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪检测细胞凋亡和Fas蛋白表达的方法，观察其对横纹肌肉瘤细胞的作用，及其与顺铂协同作用的效果和机制。结果TRAIL浓度为1．0、10．0、100．0ng／ml时，细胞毒性指数分别为18．9％、20．8％和43．5％；顺铂浓度为1．0、5．0、10．0μg／ml时，细胞毒性指数分别为9．8％、23．4％和37．1％。而浓度为100ng／ml的TRAIL与浓度为5μg／ml的顺铂联合作用时，细胞毒性指数明显增加达66．4％，结合FCM分析显示联合应用提高了Fas蛋白的表达，与细胞凋亡率增加相一致。结论TRAIL和顺铂均能有效诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡，联合应用具有明显的协同效果。     

粗吻海龙中总甾体的含量测定

目的 测定粗吻海龙非皂化物中总甾体类化合物含量。方法 经Liebermann-Burchard试剂显色后，采用可见-分光光度法进行定量分析。结果 线性范围0.2-2.5mg，r=0.9998，高中低浓度日内精密度分别为0.44%,0.47%,0.96%，日间精密度分别为1.30%,0.33%,0.75%，高中低浓度回收率分别为97.69%,98.91%，96.67%。结论 本法简单方便，结果准确，适合海龙中总甾体类化合物定量分析。     

CyclinE1、CyclinE2在低浓度MNNG诱发的FL细胞中的表达研究

目的研究低浓度N-甲基-N＇-硝基-N-甲基亚硝基胍对人羊膜FL细胞的细胞周期基因表达的影响。以助于阐明MNNG引起细胞应答反应的机制。方法用实时荧光定量PCR方法，检测FL细胞在1．0μmol／LMNNG处理后细胞周期基因CyclinE1及CyclinE2基因表达的改变，数据用ABI公司的SDS2．1软件分析。结果MNNG处理后，细胞周期基因CyclinE1及CyclinE2表达显著上调（P〈0．05）。结论低浓度MNNG攻击可使人羊膜FL细胞周期发生异常。