成骨分化的骨髓间充质干细胞的免疫原性

目的:骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSC)具有多向分化潜能,又因其低免疫原性,成为细胞移植治疗的良好选择。本实验室前期实验表明猪MSC具有低免疫原性和免疫调节作用,而猪MSC在人体内微环境中,将自动分化。本试验研究猪MSC在体外诱导分化后是否还能维持其低免疫原性,仍具有免疫调节作用。方法:MSC细胞从近交系版纳微型猪骨髓中分离获得,转入SV40基因,进行永生化。再用β-甘油磷酸钠、地塞米松、抗坏血酸磷酸盐等体外诱导其分化为成骨细胞,以未分化MSC为对照,用RT-PCR法检测分化MSC的主要组织相容性抗原(swine lymphocyte antigen classⅠ、classⅡ,SLAⅠ、SLAⅡ)的表达情况,用单向混合淋巴细胞反应(MLR)的方法检测分化MSC是否仍不能引起人外周血淋巴细胞(human peripheral blood lymphocyte,hPBL)的增殖反应。结果:RT-PCR结果显示未分化MSC只有SLAⅠ表达;分化MSC既有SLAⅠ,也有SLAⅡ的表达,但很低。这一结果支持MSC的低免疫原性特性。混培结果也显示分化猪MSC与未分化猪MSC一样都不引...     

蛇伤检测方法的研究进展

毒蛇咬伤多见于热带、亚热带和温带。治疗毒蛇咬伤的特异性药物是抗蛇毒血清。只有作出正确的诊断之后，才能选用适当的抗蛇毒血清，从而获得理想的疗效。目前，蛇伤诊断主要依靠病史和临床表现。但多数蛇伤患者的病史不详且症状复杂，使得蛇伤的临床诊断比较困难。通过蛇毒检测进行实验诊断也就成为提高蛇伤治疗效果的根本保证。经过多年的研究，蛇伤诊疗研究者们已经建立了多种有价值的免疫诊断技术。本文就蛇毒检测的国内外相关研究进展作一简述．     

铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析

目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（pepc）基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法 基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。     

复方参萸胶囊质量标准研究

目的建立复方参萸胶囊的质量标准。方法对制剂中的吴茱萸、丹参采用薄层色谱法进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱法对吴茱萸碱和吴茱萸次碱进行含量测定。结果薄层色谱斑点清晰、分离效果好、专属性强。吴茱萸碱在0.010 84～0.216 8μg,吴茱萸次碱在0.009 68～0.193 6μg范围内线性关系良好,平均回收率:吴茱萸碱为100.24%,RSD为0.35%,吴茱萸次碱为99.68%,RSD为0.42%。结论该方法准确,简便,稳定性和重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定猪血浆及组织中盐酸克仑特罗的含量

目的 建立猪血浆及组织(肌肉、肝脏、肾脏)中盐酸克仑特罗含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:ODS C18(150mm×4.6mm×5 μm);流动相:0.01 mol·L-1磷酸二氢钠水溶液-甲醇(体积比65:35);流速:1 mL·min-1;检测波长:243 nm;柱温:25℃,样品提取液为0.5%...     

岩白菜素药源植物资源研究进展

岩白菜素具有镇咳祛痰的功效,作为传统用于治疗呼吸系统疾病的特效药,市场需求量大。目前已有20科37属88种植物均含有岩白菜素的研究报道,其中虎耳草科鬼灯檠属、岩白菜属、落新妇属,紫金牛科紫金牛属植物较为普遍,西南鬼灯檠、羽叶鬼灯檠和岩白菜是提取岩白菜素的主要植物资源,含有3.0%以上的岩白菜素。我国西南和西北地区是岩白菜素药源植物资源的主要分布区,但近年来野生资源迅速减少,有必要开展主要药源植物的保护与繁育及种植研究。     

中国近交系猪到人异种移植靶抗原研究

目的　研究人血清对近交系猪组织的结合情况及猪组织内 α-半乳糖残基 (α- Gal)的分布。方法　采取近交系中国版纳小耳猪 4头及近交系五指山猪 1头的心、肝、脾、肺、肾、胰、小肠、胸腺、皮肤、淋巴结及各级血管组织 ,分别以中国正常人 A、B、O和 AB型血清及 BSI- B4为一抗或亲和物 ,用亲和免疫组织化学方法观察各型人血清对上述各组织的结合和组织内 α- Gal的分布情况。并用 α-半乳糖基酶 (α- GT)消化后 ,重复上述实验。结果　两种近交系猪组织的血清结合及 α- Gal分布情况相似。A、B、O和 AB型血清与被测两种猪的各部位组织结合无明显差异 ,主要为各级血管内皮细胞及部分实质细胞。BSI- B4与血清结合的部位相似。软骨、外周神经、肌肉未见血清及 BSI- B4结合。经 α- GT消化后 ,人血清和 BSI- B4与两种猪组织的结合反应除少数部位存在差异外 ,反应消失。结论　对猪进行基因改造时可不考虑其抗原强弱及分布问题。α- Gal是近交系猪的主要靶抗原 ,但不排除存在 α- Gal以外的靶抗原 ,通过对近交系猪基因改造克服排斥反应是较好的策略。     

粉防己碱纯化工艺研究

使用AKTAexplorer中压制备色谱仪自动进行凝胶筛选和条件优化，开发出两步层析法纯化粉防已碱的生产工艺，第一步用Sepharose SP HP离子交换介质从粉防己酸f生浸提液中直接捕捉粉防己碱，第二步用Source 15RPC中压反相层析介质进行精细纯化，该工艺成功获得纯度98．6％的粉防已碱，回收率为80.5％。     

进口带鱼检出异尖线虫幼虫

随着改革开放的深入,我省与周边国家的经贸来往较多,带鱼,这种来自孟加拉湾的海洋鱼类,也成为普通人家的餐桌菜。1994年4月6日,笔者对来自孟加拉湾的进口带鱼进行抽检,找到一种呈乳白色的小线虫。     

豆腐果苷抗抑郁活性的研究

目的:探讨豆腐果苷的抗抑郁作用。方法:60只昆明种小鼠,雄性,随机分为6组,每组10只。分别为豆腐果苷四种剂量组(20、30、40、50mg·kg~(-1)),阳性对照组盐酸丙米嗪(IMI,45 mg·kg~(-1)),空白对照组(蒸馏水),各组分别灌胃相应药物。观察6min,小鼠悬尾实验记录后5min内给药组和对照组小鼠累计不动时间,小鼠强迫游泳实验记录后4min内给药组和对照组小鼠累计不动时间。采用小鼠悬尾实验及小鼠强迫游泳实验方法研究豆腐果苷的抗抑郁作用。结果:在小鼠悬尾实验和小鼠强迫游泳实验中,与空白对照组比较,豆腐果苷在30mg·kg~(-1)剂量下能明显缩短小鼠的悬尾不动时间(P0.05),在30、50 mg·kg~(-1)剂量下能明显缩短小鼠强迫游泳的不动时间(P0.05)。结论:豆腐果苷在行为绝望动物模型中呈现抗抑郁作用。