HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定对婴儿乙型肝炎疫苗无/弱应答的影响

目的 检测新生儿外周血干扰素-γ（IFN-γ）和白介素-10（IL-10）含量,探讨HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定对婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗无/弱应答的影响。方法 采用双向性队列研究方法,选择2011年7月至2013年1月在太原市第三人民医院产科分娩的321对HBsAg阳性孕妇及新生儿,根据HBsAg阳性孕妇妊娠中晚期替比夫定服用情况将其分为服药组和未服药组,对新生儿全程接种乙肝疫苗并随访至12月龄。采用电化学发光法（ECLIA）和荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）分别检测母亲、新生儿及婴儿外周血HBV血清学标志物与HBV DNA,ELISA检测新生儿外周血IFN-γ、IL-10含量。结果 乙肝疫苗无/弱应答率为17.99%。非条件logistic回归显示,HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定是婴儿乙肝疫苗无/弱应答的保护因素（aRR=0.119,95%CI：0.014~0.974）;以新生儿血清IFN-γ、IL-10含量中位数为界分为高含量组与低含量组,研究发现服药组发生新生儿血清IFN-γ、IL-10高含量的可能性较大（aRR=8.684,95%CI：1.977~38.140;aRR=5.330,95%CI：1.278~22.236）,新生儿血清IFN-γ、IL-10高含量组发生乙肝疫苗免疫无/弱应答的可能性较小（aRR=0.300,95%CI：0.105~0.857;aRR=0.104,95%CI：0.030~0.354）。结论 HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定发生婴儿乙肝疫苗无/弱应答的可能性较小,其可能通过促进新生儿IFN-γ和IL-10分泌来降低婴儿乙肝疫苗无/弱应答发生风险。     

新生儿HBV血清标志物及免疫状态与乙型肝炎疫苗无/弱应答的关系

目的 探讨新生儿HBV血清标志物及免疫状态对乙型肝炎（乙肝）疫苗无/弱应答的影响。方法 选择2011年7月至2013年7月太原市第三人民医院妇产科HBsAg阳性孕产妇及其足月新生儿386对,按我国0-1-6月免疫接种程序对新生儿进行乙肝疫苗接种并随访至12月龄。采用化学发光法检测孕产妇、新生儿及其12月龄（婴儿）的外周血HBV血清标志物HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc水平;利用流式细胞术及ELISA检测新生儿及婴儿的外周血TLR3蛋白表达量及T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、树突状细胞（DCs）数量和Th1/Th2型细胞因子水平。结果 新生儿HBV血清标志物以“HBeAg⁺抗-HBe⁺”、“HBsAg⁺HBeAg⁺抗-HBe⁺”、“HBsAg⁺”和“HBV血清标志物全阴,HBVM^-”为主;“HBeAg⁺抗-HBe⁺”模式下婴儿乙肝疫苗无/弱应答率为5.2%,低于其他3种模式的20.0%、40.0%和22.5%。4种主要HBV血清学模式下婴儿的CD₄⁺ T淋巴细胞和CD₈⁺ T淋巴细胞数量、新生儿及婴儿IL-6水平差异有统计学意义。“HBeAg⁺抗-HBe⁺”模式下新生儿及婴儿的IL-6水平均高于“HBVM^-”模式;新生儿及婴儿的IL-6水平均与抗-HBs水平呈正相关;血清IL-6水平>1 112.0 pg/ml的新生儿发生乙肝疫苗无/弱应答的风险下降了61.4%（OR=0.386,95% CI：0.266～0.561,P<0.001）。结论 新生儿“HBeAg⁺抗-HBe⁺”模式及高水平IL-6者的乙肝疫苗无/弱应答率较低,新生儿各血清学标志物组合模式与免疫状态的关系有待进一步研究。     

体外活化TLR3对HBV宫内感染新生儿免疫状况的影响

目的:通过体外活化Toll样受体3(TLR3),探索将Poly I:C(免疫佐剂)作为TLR3配体提高HBV宫内感染者TLR3蛋白含量,进而通过改变HBV宫内感染者DCs细胞及B细胞百分比,提供改善机体免疫状态的可能性。方法:采用面对面问卷调查方法连续收集152对HBsAg阳性孕妇及其新生儿流行病学资料,并采集新生儿脐血及股静脉血。分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时荧光定量PCR检测新生儿出生24 h内外周血乙肝病毒标志物及HBV DNA含量,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(CBMCs)以进行体外培养,经HBV与Poly I:C刺激后,流式细胞术(FCM)检测新生儿CBMCs的TLR3蛋白含量及DCs细胞、B细胞的百分比。结果:HBV非宫内感染的TLR3蛋白含量在经HBV以及PolyI:C+HBV后呈现下降趋势。而HBV宫内感染组呈现先下降后升高的趋势。HBV非宫内感染组与宫内感染组CBMCs经PolyI:C+HBV刺激活化后,两组TLR3蛋白含量、mDC、pDC比例差异均无统计学意义(t=0.11,P=0.91;t=0.46,P=0.64;t=0.21,P=0.23);而两组B细胞百分比差异有统计学意义(t=2.36,P=0.02)。HBV宫内感染组经Poly I:C+HBV刺激后与非宫内感染组经HBV刺激后的B细胞百分比比较差异亦有统计学意义(t=2.45,P=0.02)。结论:Poly I:C作为免疫佐剂一定程度上提高HBV宫内感染者的TLR3蛋白水平,使宫内感染组的TLR3蛋白水平逐渐接近于非宫内感染组,进而改变CBMCs中DCs细胞及B细胞百分比含量,为改善HBV宫内感染新生儿的免疫状况使其接近非宫内感染者水平提供可能。     

乙肝孕妇分娩方式与新生儿HBV宫内感染关系

目的 探讨乙型肝炎孕妇分娩方式与新生儿乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的关系.方法采用问卷调查方式收集HBsAg阳性孕妇分娩方式等资料,用酶联免疫吸附试验检测孕妇和新生儿出生24h内外周血乙肝病毒标志物,实时荧光定量PCR检测母亲和新生儿外周血HBV DNA含量.结果新生儿HBsAg阳性者101例,HBVDNA阳性者30例,二者任一项阳性者113例,宫内感染率为9.5％(113/1 191);孕妇分娩时选择阴道产582例,剖宫产609例,2组宫内感染率差异有统计学意义(x2= 18.563,P=0.001);孕妇血清HBeAg和HBV DNA均阴性、HBeAg阳性而HBV DNA阴性、HBeAg和HBV DNA均阳性时,阴道分娩组和剖宫产组新生儿宫内感染率差异均有统计学意义(x2值分别为7.382、4.919、5.364,均P＜0.05);HBsAg阳性孕妇HBV DNA含量≤103和105 ～ 107 copies/mL时的分娩方式与宫内感染均有关(x2值分别为10.777、8.450,均P＜0.05).结论分娩方式与新生儿HBV宫内感染有关,HBsAg阳性孕妇选择剖宫产可能有利于降低HBV宫内感染率.     

HBsAg阳性母亲新生儿树突状细胞数量变化的影响因素

目的 探讨HBsAg阳性母亲新生儿树突状细胞(DC)数量变化的影响因素.方法 收集2011年7月至2012年3月在太原市第三人民医院妇产科分娩的HBsAg阳性孕妇及其新生儿60对.流式细胞术测定新生儿DC亚群数量,化学发光免疫试验检测母亲及新生儿出生24 h内、主被动免疫前的外周血HBV血清学标志物,荧光定量PCR检测HBV DNA.两组样本比较采用两独立样本秩和检验中的Mann-Whitney检验和t检验,相关分析采用Spearman秩相关分析和卡方检验.结果 60名新生儿中,5名为HBsAg阳性、HBV DNA阴性;60例HBsAg阳性孕妇中,HBeAg阳性21例,HBV DNA阳性29例.HBV宫内感染组新生儿外周血髓样DC (mDC)、浆细胞样DC(pDC)与非感染组比较,差异无统计学意义(Z=-0.535,Z=-0.027;均P＞0.05).母亲HBeAg阳性与新生儿HBeAg阳性密切相关(Pearson列联系数为0.928,P＜0.01).HBeAg阳性和HBeAg阴性母亲所生新生儿外周血mDC分别为0.60±0.57和0.87±0.58(Z=-2.085,P＜0.05).HBV DNA阳性母亲所生新生儿外周血mDC、pDC与HBV DNA阴性者比较,差异无统计学意义(均P＞0.05);母亲外周血HBV DNA＞1×107拷贝/mL与≤1×103拷贝/mL比较时,其新生儿外周血pDC明显下降(0.30±0.18比0.64±0.55,t=-2.996,P=0.005).结论 母亲HBeAg阳性可能使新生儿mDC数量下降,而HBV DNA＞1×10 7拷贝/mL时,可能会使新生儿pDC数量减少.     

HBsAg阳性母亲HBeAg状态和分娩方式对HBV宫内传播的影响及交互作用

目的 了解HBsAg阳性母亲HBeAg状态与分娩方式对新生儿HBV宫内传播的影响及交互作用。方法 采用病例对照研究的方法,选择2011年7月至2013年1月在太原市第三人民医院妇产科分娩的344对HBsAg阳性孕妇及其新生儿,收集其一般人口学特征及分娩情况等资料,采用电化学发光法(ECLIA)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分别检测母亲及新生儿血清HBV标志物与HBV DNA,根据新生儿是否有HBV宫内传播分为病例组(42例)和对照组(302例)。采用单因素χ²检验和非条件logistic回归分析,探讨母亲HBeAg状态和分娩方式对HBV宫内传播的影响及交互作用。结果 344例HBsAg阳性母亲新生儿HBV宫内传播率为12.21%(42/344),母亲HBeAg阳性和阴性两组新生儿HBV宫内传播率分别为18.52%(30/162)和6.59%(12/182),阴道产和剖宫产两组新生儿HBV宫内传播率分别为22.22%(34/153)和4.19%(8/191)。非条件logistic回归分析显示,HBeAg阳性母亲所生新生儿发生HBV宫内传播的风险是HBeAg阴性母亲所生新生儿的3.003倍(OR=3.003,95%CI:1.368~6.593),分娩方式为阴道产时新生儿发生HBV宫内传播的风险是剖宫产的7.333倍(OR=7.333,95%CI:3.108~17.302)。母亲HBeAg状态和分娩方式存在相加交互作用,其超额相对危险度(RERI)、交互作用归因比(AP)和交互作用指数(SI)分别为14.229(95%CI:-8.479~36.938)、0.587(95%CI:0.271~0.903)和2.579(95%CI:1.100~6.047),但不存在相乘交互作用(OR=1.084,95%CI:0.720~1.632)。结论 母亲HBeAg阳性和阴道产可能是新生儿HBV宫内传播的危险因素,母亲HBeAg状态与分娩方式存在相加交互作用。建议HBeAg阳性母亲行剖宫产的方式结束分娩。     

C基因型HBV变异与宫内传播的关系

目的:分析携带C基因型HBV的母亲病毒基因组变异情况,探讨其与HBV宫内传播的关系。方法:选取2011-2013年在太原市第三人民医院产科住院的399对携带HBV的母亲及其新生儿,通过问卷调查和病历查阅获得母亲及其新生儿基本情况。采用荧光定量PCR和电化学发光法分别检测母亲及其新生儿血清HBV DNA及HBV血清学标志...     

HBV宫内感染新生儿外周血调节性T细胞表达

目的 探讨CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg)在乙肝病毒(HBV)宫内感染新生儿外周血中的表达和意义。方法 选择乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇及其分娩新生儿79例,用酶联免疫吸附试验检测孕妇和新生儿外周血HBV标志物,实时荧光定量PCR 检测母亲和新生儿外周血 HBV DNA 含量,用流式细胞仪检测新生儿外周血CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg水平。结果 宫内感染HBV新生儿外周血CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg占CD4⁺T细胞比例分别为(10.57±2.25)%和(1.67±0.37)%,均高于未感染新生儿,差异有统计学意义(P<0.05),随产妇HBV DNA载量增加,新生儿外周血CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg增加,CD4⁺CD25⁺ Treg比例高于阴性组(P<0.05);CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg均与产妇HBV DNA载量呈正相关(r=0.430、0.409,P<0.05)。结论 Treg可能通过抑制机体细胞免疫反应影响乙肝病毒清除,新生儿HBV宫内感染可能与Treg表达上调有关。     

HBsAg阳性孕妇新生儿HBV宫内感染的影响因素研究

目的探讨HBsAg阳性孕妇新生儿发生HBV宫内感染的相关影响因素。方法以太原市第三人民医院产前检查并分娩的HBsAg阳性孕妇及其新生儿为研究对象,收集HBsAg阳性孕妇一般情况(年龄、文化程度)、分娩前HBIG注射史、家人HBV感染史、乙肝病毒标志物以及新生儿出生24小时内的乙肝病毒标志物的资料。以新生儿是否发生HBV宫内感染将379例HBsAg阳性孕妇分为两组,HBV宫内感染组36例,非HBV宫内感染组343例,进而分析HBsAg阳性孕妇的一般情况、家人感染HBV史、HBV复制状态、HBV血清标志物阳性模式及HBIG注射史与新生儿HBV宫内感染的关系。结果 (1)单因素分析显示:HBV宫内感染组与非HBV宫内感染组的HBsAg阳性孕妇年龄、HBV复制状态、HBV血清标志物阳性模式的差异均有统计学意义(P<0.05),而两组间HBsAg阳性孕妇文化程度、家人HBV感染史和HBIG注射史的差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)多因素Logistic回归分析显示:HBsAg阳性孕妇的年龄(OR=0.398,95%CI0.159～0.996)与HBeAg和HBV DNA双阳性(OR=2.539,95%CI 1.233～5.227)被引入回归方程。同时分析HBsAg阳性孕妇HBV DNA含量分级与HBV宫内感染关系的结果显示其差异有统计学意义(χ2=10.983,P=0.004),且进行趋势卡方分析后,显示HBV DNA拷贝数在>106时,HBV宫内感染率明显上升。结论 HBsAg阳性孕妇年龄(>30岁)是HBsAg阳性孕妇HBV宫内感染的保护因素,而血清HBeAg和HBV DNA均为阳性和HBVDNA拷贝数>106时,其发生HBV宫内感染的可能性较大。     

白介素-6和白介素-12在HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答中的作用

目的 探讨白介素-6（IL-6）和白介素-12（IL-12）在HBsAg阳性母亲婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫应答中的作用。方法 收集91例HBsAg阳性孕妇足月分娩的新生儿并对其随访至12月龄。采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和化学发光免疫试验（CLIA）检测新生儿及婴儿外周血HBV DNA及HBV血清学标志物;利用ELISA检测新生儿及婴儿外周血IL-6和IL-12的水平。结果 91例婴儿中,乙肝疫苗无/弱应答率为35.16%（32/91）。无/弱应答组在新生儿期和婴儿期IL-6水平均低于强应答组,而IL-12水平均高于强应答组,差异均有统计学意义（均P<0.01）。从新生儿期到婴儿期,无/弱应答组及强应答组的IL-6水平均升高,而IL-12水平均降低,其变化在两组间差异均有统计学意义（均P<0.01）。进一步分析发现,婴儿抗-HBs水平与新生儿期及婴儿期IL-6呈正相关（r_s=0.70、0.79,均P<0.01）,与IL-12呈负相关（r_s=-0.71、-0.72,均P<0.01）。从新生儿期到婴儿期,IL-6升高程度与婴儿抗-HBs水平呈正相关（r_s=-0.74,P<0.01）,IL-12的降低程度与婴儿抗-HBs水平存在负相关（r_s=-0.42,P<0.01）。新生儿期和婴儿期IL-6与IL-12间均呈负相关（r_s=-0.68、-0.70,均P<0.01）。结论 IL-6可能促进HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答,而IL-12则可能抑制免疫应答,IL-6与IL-12共同影响HBsAg 阳性母亲婴儿对乙肝疫苗的免疫应答。