外周血单个核细胞TLR3信号通路活化在重组乙型肝炎表面抗原免疫应答中的作用

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体3(TLR3)信号通路的活化在重组HBsAg(rHBsAg)免疫应答中的作用及机制。方法收集13名健康献血者外周血制备血液制品时滤除的白细胞, 分离培养PBMC后分别给予TLR3激动剂聚肌苷酸-聚胞苷酸(Poly I:C组)及PBS(对照组)处理, 48 h后收集部分细胞, 采用流式细胞术检测TLR3信号通路蛋白水平;在活化(Poly I:C组)/未活化(对照组)TLR3信号通路后, 采用rHBsAg处理两组PBMC 72 h, 采用流式细胞术检测PBMC中树突状细胞(DC)、T、B淋巴细胞及其亚群比例。采用配对t检验、配对资料的符号秩和检验和典型相关分析进行统计学分析。结果 Poly I:C组PBMC TLR3信号通路中TLR3蛋白阳性细胞百分比(19.21%)、TLR3蛋白表达量(8 983.95)、NF-κB蛋白的表达量(26 193.13)、磷酸化NF-κB(pNF-κB)蛋白阳性细胞百分比(13.73%)及其占NF-κB的比例(16.03%)、磷酸化IRF3(pIRF3)蛋白阳性细胞百分比(12.64%)及其占IRF3的比例(...     

HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定对婴儿乙型肝炎疫苗无/弱应答的影响

目的 检测新生儿外周血干扰素-γ（IFN-γ）和白介素-10（IL-10）含量,探讨HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定对婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗无/弱应答的影响。方法 采用双向性队列研究方法,选择2011年7月至2013年1月在太原市第三人民医院产科分娩的321对HBsAg阳性孕妇及新生儿,根据HBsAg阳性孕妇妊娠中晚期替比夫定服用情况将其分为服药组和未服药组,对新生儿全程接种乙肝疫苗并随访至12月龄。采用电化学发光法（ECLIA）和荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）分别检测母亲、新生儿及婴儿外周血HBV血清学标志物与HBV DNA,ELISA检测新生儿外周血IFN-γ、IL-10含量。结果 乙肝疫苗无/弱应答率为17.99%。非条件logistic回归显示,HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定是婴儿乙肝疫苗无/弱应答的保护因素（aRR=0.119,95%CI：0.014~0.974）;以新生儿血清IFN-γ、IL-10含量中位数为界分为高含量组与低含量组,研究发现服药组发生新生儿血清IFN-γ、IL-10高含量的可能性较大（aRR=8.684,95%CI：1.977~38.140;aRR=5.330,95%CI：1.278~22.236）,新生儿血清IFN-γ、IL-10高含量组发生乙肝疫苗免疫无/弱应答的可能性较小（aRR=0.300,95%CI：0.105~0.857;aRR=0.104,95%CI：0.030~0.354）。结论 HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定发生婴儿乙肝疫苗无/弱应答的可能性较小,其可能通过促进新生儿IFN-γ和IL-10分泌来降低婴儿乙肝疫苗无/弱应答发生风险。     

HBsAg阳性母亲HBV感染状况与婴儿乙肝疫苗无/弱应答的关系

目的 分析HBsAg阳性母亲HBV感染状况与婴儿乙肝疫苗无/弱应答的关系。方法 2011年6月至2013年7月采用前瞻性研究的方法选择225对HBsAg阳性母亲及其新生儿作为研究对象,新生儿按0-1-6免疫接种程序接种乙肝疫苗并随访至婴儿1周岁,采用电化学发光免疫分析法和荧光定量PCR检测母亲及婴儿外周血HBV血清学标志物和HBV DNA载量。结果 HBsAg阳性母亲共检测出6种HBV感染模式,常见模式"HBsAg（+）、HBeAg（+）、抗-HBc（+）"（模式一）与" HBsAg（+）、抗-HBe（+）、抗-HBc（+）"（模式二）所占比例最多（92.5%,208/225）;母亲HBV感染为模式一时,婴儿乙肝疫苗无/弱应答率（11.3%）低于母亲HBV感染为模式二时的婴儿无/弱应答率（23.4%）,差异有统计学意义（χ²=4.80,P=0.029）,随着母亲HBeAg水平的升高,婴儿乙肝疫苗无/弱应答率呈现下降趋势（χ²=4.86,P=0.028）;经非条件logistic回归模型控制其他因素影响后结果显示,母亲HBeAg与降低婴儿乙肝疫苗无/弱应答发生风险有关（OR=0.598,95%CI：0.378~0.947）;HBsAg阳性母亲HBV DNA阳性率为54.2%,未发现母亲HBV DNA阳性与其婴儿乙肝疫苗无/弱应答率有关（χ²=0.22,P=0.640）。结论 HBsAg阳性母亲HBV感染模式以"HBsAg（+）、HBeAg（+）、抗-HBc（+）"与"HBsAg（+）、抗-HBe（+）、抗-HBc（+）"模式为主,且该2种模式下婴儿乙肝疫苗免疫应答情况有所不同;母亲HBeAg可能是其婴儿乙肝疫苗无/弱应答的保护因素;尚未发现HBsAg阳性母亲HBV DNA与婴儿乙肝疫苗无/弱应答有关联。     

白介素-6和白介素-12在HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答中的作用

目的 探讨白介素-6（IL-6）和白介素-12（IL-12）在HBsAg阳性母亲婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫应答中的作用。方法 收集91例HBsAg阳性孕妇足月分娩的新生儿并对其随访至12月龄。采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和化学发光免疫试验（CLIA）检测新生儿及婴儿外周血HBV DNA及HBV血清学标志物;利用ELISA检测新生儿及婴儿外周血IL-6和IL-12的水平。结果 91例婴儿中,乙肝疫苗无/弱应答率为35.16%（32/91）。无/弱应答组在新生儿期和婴儿期IL-6水平均低于强应答组,而IL-12水平均高于强应答组,差异均有统计学意义（均P<0.01）。从新生儿期到婴儿期,无/弱应答组及强应答组的IL-6水平均升高,而IL-12水平均降低,其变化在两组间差异均有统计学意义（均P<0.01）。进一步分析发现,婴儿抗-HBs水平与新生儿期及婴儿期IL-6呈正相关（r_s=0.70、0.79,均P<0.01）,与IL-12呈负相关（r_s=-0.71、-0.72,均P<0.01）。从新生儿期到婴儿期,IL-6升高程度与婴儿抗-HBs水平呈正相关（r_s=-0.74,P<0.01）,IL-12的降低程度与婴儿抗-HBs水平存在负相关（r_s=-0.42,P<0.01）。新生儿期和婴儿期IL-6与IL-12间均呈负相关（r_s=-0.68、-0.70,均P<0.01）。结论 IL-6可能促进HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答,而IL-12则可能抑制免疫应答,IL-6与IL-12共同影响HBsAg 阳性母亲婴儿对乙肝疫苗的免疫应答。     

HBsAg阳性母亲HBeAg和新生儿调节性T淋巴细胞关系及对HBV宫内传播的影响

目的 探讨HBsAg阳性母亲的HBeAg与新生儿CD₄⁺CD₂₅⁺Foxp3⁺调节性T淋巴细胞（Treg）含量的关系以及对增加新生儿HBV宫内传播发生风险的影响。方法 选择太原市第三人民医院妇产科分娩的270对HBsAg阳性母亲及其新生儿,收集一般人口学特征及分娩情况等资料,采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）和化学发光免疫试验（CLIA）检测母婴外周血HBV DNA及HBV血清学标志物;流式细胞术（FCM）检测新生儿外周血Treg等免疫细胞含量。结果 母亲HBeAg阳性是HBV宫内传播的危险因素（OR=4.08,95% CI：1.89~8.82）;母亲HBeAg阳性者新生儿Treg含量高于阴性者（Z=2.29,P=0.022）;按母亲HBeAg滴度分为5组,各组间新生儿Treg、HBeAg及母亲HBV DNA随母亲HBeAg滴度增高呈上升趋势,差异均有统计学意义（χ²=18.73,P<0.001;χ²=181.60,P<0.001;χ²=183.09,P<0.001）。偏相关分析中控制母亲HBV DNA以及新生儿HBeAg后,母亲HBeAg与新生儿Treg呈正相关（r_s=0.19,P=0.039）。新生儿Treg与浆细胞样树突状细胞（pDC）、CD₄⁺T淋巴细胞含量为负相关（r_s=-0.21,P=0.017;r_s=-0.23,P=0.009）。结论 HBsAg阳性母亲的HBeAg可能通过上调新生儿Treg含量,影响树突状细胞和效应T淋巴细胞的功能及其对HBV的免疫应答,从而增加新生儿发生HBV宫内传播的风险。     

HBsAg阳性母亲所生婴儿乙型肝炎疫苗无/弱应答的影响因素研究

目的 探讨HBsAg阳性母亲所生婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗无/弱应答的影响因素。方法 收集2011年7月至2013年1月在太原市第三人民医院妇产科分娩的HBsAg阳性母亲及其新生儿286对,按我国0-1-6月免疫接种程序对新生儿进行乙肝疫苗接种并随访至12月龄。检测母亲、新生儿及婴儿外周血HBV血清标志物及HBV DNA;探讨HBsAg阳性母亲所生婴儿乙肝疫苗无/弱应答的影响因素。结果 286例婴儿中,乙肝疫苗无/弱应答率为18.53%（53/286）。非条件logistic回归显示,母亲HBV DNA ≥ 1×10⁷ copies/ml时其婴儿发生乙肝疫苗无弱应答的风险是HBV DNA阴性的2.592倍（OR=2.592,95%CI：1.121~5.996）;分娩方式为阴道产时其婴儿发生乙肝疫苗无/弱应答的风险是剖宫产的1.932倍（OR=1.932,95%CI：1.021~3.654）。二者既不存在相乘交互作用（OR=1.055,95%CI：0.209~5.321）,也不存在相加交互作用（RERI=1.617,95%CI：-4.038~7.272;AP=0.364,95%CI：-0.527~1.225;SI=1.195,95%CI：0.270~13.135）。将母亲HBV DNA分组后,剖宫产与阴道产对婴儿发生乙肝疫苗无/弱应答之间差异无统计学意义。结论 HBsAg阳性母亲HBV DNA ≥ 1×10⁷ copies/ml时,其婴儿易发生乙肝疫苗无/弱应答。