克里米亚-刚果出血热研究状况与进展

克里米亚-刚果出血热（Crimean Congo hemorrhagic fever，CCHF）（在中国称新疆出血热）因感染CCHF病毒引起，是中国目前已经发现的4种虫媒病毒性传染病之一。CCHF病毒经蜱传播，是自然界中尚未引起人们注意的在蜱→非人类脊椎动物→蜱之间循环的地方性动物传染病。人被带病毒蜱叮咬、接触感染动物内脏和皮毛、密切接触患者及其分泌物和排泄物等而感染本病。临床表现除具有一般病毒性出血热的基本特点外，以消化道出血、鼻腔出血、皮肤黏膜出血点和出血斑为特征。有关CCHF病毒的传播和致病机理及其基因结构和遗传变异的研究，使本病的病原特点、传播和流行分布得到进一步阐明。     

狂犬病病毒致病机制研究概况

狂犬病病毒（RV）是一种高度嗜神经性病毒，由RV引发的狂犬病通常是一种急性致死性神经系统损伤性疾病。RV通过周围神经末梢和中枢神经系统（CNS）的神经元进行病毒的复制和传播。绝大多数狂犬病例CNS病理学表现为急性脑脊髓炎，常常没有显著的显微镜下改变，脑部可以轻度肿胀，脑膜和脑实质血管轻度充血并伴有少量炎症细胞浸润，这也是其他急性病毒性脑炎常见的共同表现。     

甲型H1N1流感若干共同关注的问题

今年3月18日,墨西哥首次报道了人感染甲型H1N1流感病毒,很快这种疾病就从美国与墨西哥交界处往世界蔓延,全球立刻拉响了甲型H1N1流感警钟[甲型H1N1流感,原称人感染猪流感,WHO于2009年4月30日更名为A(H1N1)流感,我国相继更名为甲型H1N1流感].     

帕金森病相关蛋白α-共核蛋白的可溶性表达、纯化及抗体制备

目的 利用分子克隆接术在愿核细胞中表达α-共核蛋白（SNCP），并制备免多克隆抗体。方法 从人神母经细胞SH-SY5Y细胞中提取总RNA，逆转录成cDNA。利用PCR技术扩增获得SNCP的cDNA序列，测序正确后克隆至pQE-30-GST表达载体上，在大肠埃希菌中表达GST-SNCP融合蛋白。融合蛋白纯化后免疫新西兰大白兔，制备特异性抗血清，并对该抗体进行检测。结果 琼脂糖凝胶电泳显示获得SNCP cD-NA序列为420bp。SDS-PAGE和Western blot分析，表达的融合蛋白呈可溶性，相对分子质量约为45000。以其为抗原制备的SNCP抗血清的ELISA效价达到1：32000，并且该抗体可与BALB/c小鼠脑组织中内源性SNCP发生特异性反应。结论 人SNCP可在原核细胞中可溶性表达。用表达的蛋白制备获得特异性较好的SNCP抗血清，为进一步了解SCNP的结构和功能以及在中枢神经系统退行性疾病的作用提供了必要的实验基础。     

人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究

目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切入位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×103左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。     

重组风疹病毒外膜蛋白E1的表达及其在血清学中的初步应用

目的 在大肠埃希菌中表达重组风疹病毒外膜蛋白E1,用其作为包被抗原,建立一种用于诊断风疹病毒感染的ELISA检测方法 .方法 通过基因重组的方式构建表达质粒并在大肠埃希菌中表达风疹病毒外膜蛋白E1,蛋白纯化后作为包被抗原,用ELISA的方法 检测世界卫生组织(WHO)的风疹检测质控血清以及来自广西桂林的未知血清样本.结果 采用WHO用于风疹检测的质控血清对所表达的重组抗原的抗原性进行鉴定,通过试验,特异性、敏感性均为100%.用表达的抗原对来自我国广西的200份未知血清样本进行风疹病毒外膜蛋白抗体的检测,阳性率为93%,与文献报道的我国其他地区风疹病毒抗体阳性率基本一致.结论 通过实验我们表达了具有良好抗原性的风疹病毒外膜蛋白E1,为进一步研究风疹病毒感染的实验室诊断技术奠定了基础.     

流感病毒RNA聚合酶蛋白PB1在小鼠中可诱导亚型间交叉免疫保护

目的探索流感病毒RNA聚合酶PB2和PB1亚基作为实验性流感疫苗候选抗原的可能性.方法以复制型质粒（pSCA）为载体分别构建表达甲1型和甲3型流感PB2和PB1的复制型DNA疫苗,免疫小鼠后分别用甲1型流感病毒（A/PR/8/34）进行鼻腔攻击,观察针对不同亚型流感病毒的复制型DNA疫苗的免疫保护效果.结果本实验所构建的复制型DNA疫苗在真核细胞中均可表达外源基因;本实验采用的复制型质粒载体（pSCA）与传统质粒载体（pcDNA3）在诱导小鼠产生抗体方面无差异,并且都诱导了偏向TH1类的免疫反应;表达甲1型和甲3型流感PB1基因的复制型DNA疫苗均可保护小鼠抵御甲1型流感病毒（A/PR/8/34）的攻击.结论表达甲型流感病毒PB1的复制型DNA疫苗能保护小鼠抵御同型和异型流感病毒的攻击,本实验为流感疫苗研究提供新的候选抗原.     

中国急需加强对西尼罗病的研究

西尼罗病毒感染是世界性流行的疾病 西尼罗病毒于1937年首先在非洲乌干达的西尼罗地区从发热患者血清分离到，因此得名，并因为该病毒可以引起发热而称西尼罗热。此后发现，库蚊、伊蚊、按蚊等40余种节肢动物可以通过叮咬将病毒传播给人畜引起疾病，输血和器官移植等也可以造成传染。本病除1950年在以色列，1974年在南非流行外很少发生大流行，病情也不重，很少发生死亡。但自1994年在北非、中东、欧洲和北美等地区迅速流行，发热和脑炎病例增多，病死率也增高，近年还报道数例脊髓灰质炎样综合征的西尼罗病毒感染的病例。特别是1999年首次在美国纽约发现后，迅速传遍美国，2003年扩大到除2个州外的所有州，总病例多达8470例，死亡数百人。该病已经向北美的加拿大和南美洲的牙买加等国传播。在澳洲有西尼罗病毒的亚型病毒（Kunjin virus，Kun）引起的疾病流行。西尼罗病成为世界性公共卫生问题。     

立夫特谷热的实验室早期诊断

立夫特谷热(rift valley fever，RVF)是流行于非洲次撒哈拉地区的急性病毒性人畜共患病，病原体为立夫特谷热病毒(RVFV)，由节肢动物传播。RVFV属于布尼亚病毒科白蛉病毒属，基因组为单股负链RNA，由大(L)、中(M)、小(S)3个节段构成，每个节段包裹在单独的核衣壳中。L节段编码L蛋白即病毒RNA聚合酶；M节段编码包膜糖蛋白G1和G2及两个非结构蛋白；S节段则利用双义链策略编码N和NSs蛋白。     

动物用狂犬病疫苗研究进展

狂犬病是一种自然疫源性疾病,狂犬病病毒宿主动物的免疫状况对于预防和控制人类狂犬病的流行至关重要.随着分子生物学和免疫学的发展,动物用狂犬病疫苗,尤其是基因工程疫苗的研究取得了巨大的进展.本文将就动物用狂犬病疫苗的研究进展与应用状况作一综述.