降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用

目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P0.05),而OPN表达水平显著增加(P0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P0.05),相反地OPN表达水平下降(P0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。     

人羊膜上皮细胞移植改善AD样病变模型大鼠学习记忆能力

目的:观察人羊膜上皮细胞(h AECs)对阿尔茨海默病(AD)样病变大鼠模型的治疗效应。方法:采用胰蛋白酶消化法分离h AECs,流式细胞术分析表型。48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、培养基组和h AECs移植组,每组12只。采用双侧脑室注入脂多糖(LPS)复制AD样病变大鼠模型。AD样病变大鼠海马区移植5×105个h AECs。细胞移植后2周,Morris水迷宫试验观察行为学变化,HE和硫磺素S染色观察海马病理变化,免疫组化染色检测β-淀粉样蛋白42(Aβ42)、Tau蛋白和乙酰胆碱(ACh)的变化,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的变化,流式微球阵列捕获技术(cytometric bead array,CBA)检测血清细胞因子含量,免疫荧光染色检测海马区人细胞核抗原阳性细胞及其神经元特异性核蛋白(Neu N)的表达。结果:与模型组和培养基组比较,h AECs移植组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.01),跨域平台次数明显增加(P0.05);海马神经元病损减轻,Aβ沉积减轻(P0.05),磷酸化Tau蛋白水平下降(P0.05),ACh增加(P0.05);外周血Th1和Th17细胞百分比下降(P0.05),而Th2和Treg细胞升高(P0.05);IL-2和IFN-γ水平下调(P0.05),而IL-4上调(P0.05);移植区可见h AECs,并表达Neu N。结论:h AECs可明显改善AD样病变模型大鼠空间辨别性学习记忆能力,减轻海马病理损伤,其免疫调节效应可能发挥重要作用。     

吡那地尔后处理大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体的蛋白质组学研究

 目的: 运用蛋白质组学研究方法探讨吡那地尔后处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用。方法: 建立Langendorff大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型,随机分为吡那地尔后处理组(Pina组)和缺血再灌注损伤组(I/R组),每组9只。提取心肌线粒体蛋白质行双向凝胶电泳,应用质谱鉴定差异大于2倍的蛋白质点。结果: Pina组与I/R组比较,共发现7个差异蛋白质:Pina组NADH脱氢酶1α亚复合体10亚基(NDUFA10)﹑NADH脱氢酶铁硫蛋白2(NDUFS2)和NADH脱氢酶黄素蛋白2(NDUFV2)表达低于I/R组;Pina组异柠檬酸脱氢酶α亚基(IDHA)和Δ^3,5-Δ^2,4-二烯酰辅酶A异构酶(ECH1)表达高于I/R组;另有2个蛋白质点均被鉴定为ATP合酶δ亚基,一个蛋白质点表达升高,而另一个表达降低。结论:吡那地尔后处理可能抑制了复合体Ⅰ的亚基(NDUFA10﹑NDUFS2和NDUFV2)代偿性增加,但促进了IDHA和ECH1表达并引发了ATP合酶δ亚基发生磷酸化,这些改变可能均与吡那地尔后处理保护心肌的作用有关。     

T-PACS建设中教学病例数据库的规划与设计

教学图像存储与传输系统（picture archiving and communication system,PACS）应用于教学的研究成为当前医学影像教学改革发展的热点,探索建立一套独立的基于PACS-HIS资源的医学影像教学病例库是教学PACS（T-PACS）建设的首要和关键。探讨设计及构建数据库的几个关键环节：①结合《医学影像诊断学》理论教材自定义病例分类编码;②构建独立的符合教学需求的病例数据库;③建立基于临床PACS环境的实时、长效的教学病例收集机制;④影像实验教学应用程序的定制开发等。     

不同禁欲时间采集精液对IVF-ET实验室指标及临床结局的影响

目的:探讨不同禁欲时间采集精液对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)实验室指标及临床结局的影响。方法:选取2011年6月~2013年7月在该院生殖中心行IVF-ET治疗符合纳入标准的160例患者(160个周期)为研究对象,根据男方禁欲时间不同随机分为:2~3天组、4~5天组、6~7天组及大于7天组4组,每组40例(40个周期)。比较4组患者洗精前后精液质量、MⅡ卵受精率、正常受精率、正常卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、着床率及早期流产率是否有差异。结果:1随禁欲时间延长4组患者的精液量、精子密度上升(P<0.05);精子活率、前向运动精子率及正常形态率逐渐下降(P<0.05)。而精液经优选技术处理后,以上各指标均有明显改善,处理前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。2 4组患者的MⅡ卵受精率、正常受精率、正常卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、着床率及早期流产率方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:IVF-ET中精液质量正常的患者不同禁欲时间采集的精液对实验室指标及临床结局无明显影响。     

雷帕霉素对人胶质母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨雷帕霉素对人胶质母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法:细胞培养技术培养人胶质母细胞瘤细胞系A172,将其分为对照组与实验组。MTT检测两组细胞增殖;细胞免疫化学检测磷酸化核糖体S6激酶(p-P70S6K)1蛋白表达;TUNEL检测A172凋亡。结果:MTT表明,实验组细胞存活增殖与对照组比差异有统计学意义(P<0.05);实验组p-P70S6K1与对照组比差异有统计学意义(P<0.05);雷帕霉素可诱导A172凋亡(P<0.05)。结论:雷帕霉素能有效抑制人胶质母细胞瘤A172增殖,也可诱导其凋亡。雷帕霉素可能通过m TOR/P70S6K1信号通路发挥抗肿瘤作用。     

龙葵碱对人结肠癌鸡胚移植模型血管生成的影响

目的：建立人结肠癌鸡胚移植模型,研究龙葵碱对其血管生成的影响。方法将鸡胚分为对照组和低剂量组、中剂量组、高剂量组（均n＝10）,将培养的人结肠癌细胞系HT‐29细胞株接种到鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）上,通过立体显微镜、Image‐proplus6．0图像分析软件及免疫组织化学苏木精‐伊红（HE）染色法,观察移植瘤在CAM上血管生成的特点,及不同龙葵碱剂量对血管生成的影响。结果HT‐29细胞接种到CAM第3～5天,大量血管向瘤体集中,长入或跨越瘤体表面,肿瘤迅速生长。给药后第5天进行拍照,图像分析,定量计算血管新生面积明显低于对照组,且呈剂量依赖性,各组间差异有统计学意义（P＜0．01）。免疫组织化学检测表明不同剂量龙葵碱的微血管密度明显低于对照组,与血管新生面积相一致;ki‐67抗原表达指数逐渐下降,实验组低于对照组,且各组间差异有统计学意义（P＜0．01）。结论龙葵碱能明显抑制人结肠癌HT‐29细胞株诱导的血管生成,从而抑制肿瘤的生长,为抗肿瘤血管生成的治疗方面提供了重要依据。     

某医院2003年-2013年住院死亡病例死因分析

目的分析某医院2003年-2013年住院死亡病例病死情况、死因构成、年龄及性别分布,为降低该院住院病人死亡率和科学制定相关管理决策及提高医疗工作质量提供科学依据。方法通过该院病案信息系统平台,采集2003年-2013年住院死亡病例信息数据进行统计分析。结果该院2003年-2013年总的死亡率为0.01%,经Cox-Stuart检验,死亡率呈下降趋势(P<0.05)。男性病例死亡率(0.96%)高于女性(0.52%)(x2=307.86.,P<0.05)。经Cox-Stuart检验,随着年龄的增加,患者的死亡率呈上升趋势(P<0.05)。按国际疾病分类(ICD-10)的类目归类,前五位死因为头部损伤(8.95%)、脑血管病(8.50%)、消化器官恶性肿瘤(6.34%)、呼吸及胸腔内器官恶性肿瘤(6.02%)及慢性下呼吸道疾病(4.61%)。结论重点加强对患有前30位死因患者类似疾病患者的防治工作,积极提高本院医疗诊治技术,科学制定管理决策,以便进一步降低住院病人的死亡率,提高病人的生命质量。     

贵州部分地区精神分裂症患者血清PBMC博尔纳病病毒CIC及抗体的检测

目的对贵州省部分地区精神分裂症患者血清外周血单个核细胞(PBMC)进行检测,探讨博尔纳病病毒(BDV)感染与精神分裂症的相关性;方法运用新型的三联ELISA测循环免疫复合物(CIC)的方法,检测97例精神分裂症患者组及48例健康对照组PBMC中BDV特异性CIC;结果 97例精神分裂症组中有24例CIC为阳性,阳性率为24.7%(24/97);抗体检出率为14.4%(14/97),48例对照组中CIC及抗体阳性1例,阳性率为2.1%(1/48);精神分裂症组检出率高于健康对照对照组,具有统计学意义(P<0.05);结论贵州省部分地区存在着BDV的感染,BDV感染与精神分裂症可能相关。     

皮鳞癌1号方对人皮肤鳞状癌A431细胞生长的抑制作用

目的:研究皮鳞癌1号方对人皮肤鳞状癌A431细胞生长的抑制作用。方法:以0、5、10、20、40、80μg(生药)/ml皮鳞癌1号方分别作用A431细胞24、48、72 h后,测定光密度并计算细胞增殖抑制率以评价其抑制作用;在显微镜下观察细胞形态学变化;光化学法测定乳酸脱氢酶(LDH)的活性;免疫细胞化学法测定B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:5、10、20、40、80μg(生药)/ml皮鳞癌1号方对A431细胞均有抑制作用(P<0.01);5、40μg(生药)/ml皮鳞癌1号方可使A431细胞增殖变缓,细胞出现皱缩,与周围细胞黏附力减弱;5、10、20μg(生药)/ml可明显增强A431细胞LDH活性、Bax表达,减弱Bcl-2表达,降低Bcl-2/Bax的比值(P<0.01)。结论:皮鳞癌1号方对A431细胞的增殖具有一定的抑制作用;可能与促进Bax表达、抑制Bcl-2表达、降低Bcl-2/Bax的比值有关。