桡骨交锁钉固定防止桡神经深支损伤的应用解剖

目的:为桡骨交锁髓内钉固定术避免桡神经深支损伤提供解剖学依据。方法:前臂标本44侧解剖显露桡神经深支,将肱骨外上髁与Lister结节连线和桡骨头关节面,关节面下1.0、1.5、2.0cm,桡神经深支穿入旋后肌平面,桡神经深支跨越桡骨平面等6个面的交点,依次标记为A、B、C、D、E、F6个点。记录AE、AF的长度,测量B、C、D3个定点在屈肘前臂旋前、中立、旋后位与桡神经深支的水平距离。结果:B、C、D3个定点离桡神经深支的距离越来越近;而对于同一定点,其与桡神经深支的距离按旋前、中立、旋后位的顺序越来越远。结论:桡骨交锁髓内钉固定时,宜于屈肘前臂中立位,在肱骨外上髁与Lister结节连线上,距桡骨头关节面约1.5cm的位置,由前臂后外侧向前内侧插入远端交锁螺丝钉较为安全。     

Cx43在造血调控及重建中的作用

目的:采用条件性基因敲除技术构建造血系统间隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除(Cx43~(-/-))小鼠模型,并探讨Cx43在维持造血细胞自我更新及功能稳定中的作用。方法:将引进的2对转基因小鼠Cx43 loxP/loxP和Lyz-Cre/+杂交,选取F1雌性子代Cx43 loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43 loxP/loxP合笼回配,提取所获得子代小鼠鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法筛选Cx43~(-/-)小鼠,同时分析小鼠不同器官中Cx43基因的表达差异;该类小鼠经5-氟尿嘧啶(5-FU;125 mg/kg)处理,在化疗前及化疗后第5、10和15天经眼球取血分析其血象变化。Cx43~(-/-)及Cx43~(+/+)小鼠予7.5 Gy(~(60)Co-γ)的致死量照射,剂量率1 Gy/min,照射后6 h分别给予事先准备就序的骨髓细胞,每只3×10~6细胞于尾静脉注入,2周后处死小鼠检测造血是否重建:分离股骨切片后,收集骨髓细胞进行细胞表型分析(选用的单抗为CD45R、Gr-1、CD4、 CD8a、TCRαβ、Mac-1、抗sIgM、TER119、Sca-1及CD117);同时进行体外造血细胞集落实验观察造血细胞的体外增殖能力。结果:本研究通过2种转基因小鼠间杂交和回交,成功获得造血系统选择性Cx43基因敲除小鼠;该类小鼠骨髓及外周血细胞无Cx43表达,参与造血的组织,如肝脏和脾脏中Cx43表达也显著下调(P0.01),而心脏和肾脏的Cx43表达则无影响,小鼠成年后外周血象分析并无明显异常,但应急代偿能力下降,经5-FU处理后,其造血功能恢复显著减缓,处理15 d后,Cx43~(+/+)小鼠造血功能已接近正常水平,而Cx43~(-/-)小鼠仍无明显的恢复迹象,血红蛋白、白细胞及血小板仍处低位,2者差别有统计学显著性(P0.01);体外集落试验也证实Cx43~(-/-)小鼠造血干/祖细胞的增殖能力下降,其CFU-GM或CFU-E集落数均明显少于Cx43~(+/+)小鼠(P0.01),但流式细胞术结果显示,Cx43~(-/-)小鼠骨髓中Lin~-/c-Kit~+/Sca-1~+细胞亚群数量与Cx43~(+/+)小鼠相比差异并无统计学显著性;Cx43~(-/-)小鼠在化疗或移植后其骨髓造血功能重建均延迟,且化疗15 d后骨髓切片及涂片均证实其骨髓中造血细胞增生程度明显降低,脂肪组织显著增多,而且T、B细胞发育也有异常。此外,其外周血中CD4~+CD8~+细胞比例比野生型小鼠增多(P0.05),但CD4~+T细胞显著减少(P0.01),尤其是TCRαβ亚群细胞减少最为明显(P0.01)。同样,Cx43~(-/-)小鼠外周血中CD45R~+sIgM~-细胞亚群比例与野生型小鼠相比显著减少(P0.01)。结论:骨髓中Cx43基因表达在造血干/祖细胞发育(尤其是应急状态时)具重要作用,敲除Cx43基因后造血干/祖细胞增殖减缓,造血及免疫重建功能受损。     

人SNCA基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的:构建含人野生型及致病突变A30P、A53TSNCA基因的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA,并通过稳定转染获得过表达人野生型及致病突变A30P、A53T α-synuclein(SNCA)的单克隆PC12细胞株.方法:通过RT-PCR方法扩增SNCA基因,T-A克隆后测序.在此基础上利用单核苷酸差异引物定点诱变法相继构建含SNCA基因编码区EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ两酶切位点的同义突变及其致病突变G88C(Ala30Pro)、G209A(Ala53Thr)的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA,并以PCR、双酶切、测序鉴定.以重组质粒pEGFP-C3-SNCA通过脂质体转染方法转染PC12细胞;以G418进行筛选;以有限稀释法进行亚克隆获得稳定过表达人野生型及致病突变A30P、A53T α-synuclein的单克隆PC12细胞株,并以稳定转染pEGFP-C3的PC12细胞作为对照组细胞,通过RT-PCR、Western blot及荧光显微镜鉴定各单克隆PC12细胞株.结果:PCR、酶切及测序证明重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA构建成功.RT-PCR、Western blot及荧光显微镜确认目的基因序列在PC12细胞稳定过表达.结论:成功地构建SNCA基因WT及A30P与A53T突变型的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA;成功获得过表达人野生型及致病突变A30P、A53T α-synuclein的单克隆PC12细胞株.     

肺组织β-AR和GRK2与重症急性胰腺炎肺损伤的关系以及甲强龙的影响

目的：探讨重症急性胰腺炎（SAP）致急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织β-AR和G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）的变化规律以及甲强龙的影响。方法：SD大鼠36只，随机分为3组，每组12只。对照组，仅做十二指肠翻动；模型组，胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠（1 mL/kg），建立SAP模型；干预组，建立SAP模型后1 h给予甲强龙（30 mg/kg）。于6 h和12 h分别处死大鼠6只取肺组织，放射配基结合实验测量肺组织β-AR最大结合容量B_max和平衡解离常数K_d，免疫荧光法检测肺组织GRK2表达。结果：模型组和干预组胰腺组织损伤评分显著高于对照组，模型制备成功；模型组和干预组肺组织损伤评分显著高于对照组，发生SAP肺损伤；模型组β-AR B_max显著低于对照组和干预组，K_d显著高于对照组和干预组；模型组GRK2的表达显著高于对照组和干预组。结论：SD大鼠肺组织有丰富的GRK2表达，SAP肺损伤大鼠肺组织GRK2表达显著增加，这可能是β-AR下调的重要机制。     

体外培养大鼠脊髓运动神经元的存活率及形态观察

观察体外培养的大鼠脊髓运动神经元(SMN)的存活率、形态学特征及生长规律。对今后进一步研究脊髓损伤、运动神经元病有一定的指导意义。1材料与方法1·1实验动物:胚胎16 d的SD大鼠。1·2主要试剂:15%有血清L-15培养基、无血清L-15培养基、poly-L-lysine、层黏连蛋白(lam in in)、m etrizam ide、阿糖胞苷、DAB等(S igm a公司),小牛血清白蛋白、小牛血清(华美生物工程公司),胆碱乙酰转移酶多克隆抗体(ChAT)(武汉博士德公司)。1·3实验仪器:离心机、超净台、CO2恒温培养箱、24孔培养板、倒置显微镜(OLYMPUS)、图像分析系统(OLYMPU…     

Graves病患者外周血IL-6、TNF-α水平表达的变化及意义

目的：探讨IL-6、TNF-α与Graves病（GD）发病之间的联系及其意义。方法：采用ELISA法测定83例GD患者治疗前后外周血IL-6、TNF-α水平变化，并与，13、T4、HT3、FT4、TSH作多元相关性分析。结果：（1）GD患者IL-6、TNF-α水平显著高于正常人（P〈0．0001），且两者间呈正相关（P〈0．001）。（2）IL-6、TNF-α与，13、T4、HT3、FT4均呈正相关（P〈0．001），而与TSH呈负相关（P〈0．001）。（3）经治疗后IL-6、TNF-α．水平明显下降（P〈0．001），但仍高于对照组（P〈0．01）。结论：推测IL-6、TNF异常升高可能与GD免疫学发病机制有关，经治疗后IL-6、TNF-α水平明显下降，提示抗甲状腺药物可能具有一定的免疫调节作用。     

LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)与配体结合亲和力的比较

目的:LAIR-1/LAIR-2(CD305/306)与配体结合亲和力的比较。方法:应用不同浓度混合的LAIR-1和LAIR-2融合蛋白,同时或先后与配体表达细胞孵育后,用特异性LAIR-1或LAIR-2单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,比较LAIR-1和LAIR-2融合蛋白与细胞结合的百分率的变化及相互竞争情况。结果:LAIR-1和LAIR-2膜型配体的分布较广泛,人和小鼠LAIR受体与配体的结合具有相互交叉的特点。LAIR-2能够明显阻断LAIR-1与其膜型配体的结合,而LAIR-1对LAIR-2与其配体的结合无影响。结论:LAIR-1和LAIR-2可能结合相同的膜型配体,但LAIR-2结合配体的亲和力明显高于LAIR-1结合的亲和力。此结果为深入探讨LAIR家族免疫调节的分子机制提供重要的实验依据。     

基于Framingham模型的苏州市9～18岁学生近视风险模型的构建

目的　探讨苏州市学生近视主要影响因素,建立近视的风险模型,为学生近视综合防控提供依据。方法　分层整群随机抽样招募苏州市四至十二年级学生为调查对象,通过标准化问卷收集学生年龄、性别、饮食习惯、用眼环境、读写习惯、近距离用眼、户外活动、睡眠及父母近视史等,现场测量教室照明,对每名学生进行屈光检测和裸眼远视力检查。Logistic回归分析近视的影响因素,Framingham模型构建近视风险评分模型。结果　本次纳入9～18岁学生2 859人,近视2 264人,近视检出率为79.19%。Logistic回归分析显示,女性（OR = 1.544,95%CI:1.258～1.896）、年龄（OR = 1.404,95%CI:1.325～1.487）、父母近视（一人近视:OR = 2.114,95%CI:1.694～2.638;均近视:OR = 3.450,95%CI:2.590～4.594）、黑板面照度不合格（OR = 1.316,95%CI:1.017～1.703）和躺着或趴着看书或电子屏幕（OR = 1.464,95%CI:1.099～1.950）是中小学生近视的危险因素。Framingham近视风险模型ROC曲线下面积为0.755（95%CI:0.733～0.777）,最佳临界值点为6.6,灵敏度为68.3%,特异度为70.9%,约登指数为39.21%（95%CI:34.90%～42.35%）。结论　Framingham近视风险评分模型具有较好的近视预测能力,可用于近视的健康管理和干预。     

加味瓜蒌枳实汤联合哌拉西林钠他唑巴坦钠对痰热蕴肺型卒中相关性肺炎患者的免疫功能和血清炎症因子水平的影响

目的：探究加味瓜蒌枳实汤联合哌拉西林钠他唑巴坦钠对痰热蕴肺型卒中相关性肺炎(SAP)患者的免疫功能和血清炎症因子水平的影响。方法：将80例痰热蕴肺型SAP患者随机分为对照组与观察组,各40例,对照组SAP患者在基础治疗上加用哌拉西林钠他唑巴坦钠,观察组患者在对照组治疗基础上加用加味瓜蒌枳实汤,连续治疗2周,并比较两组SAP患者治疗前后的临床治疗效果、免疫指标、炎症指标及肺功能情况。结果：与本组治疗前比较,两组SAP患者治疗后X射线片病灶、肺啰音、咳嗽、发热、痰色、便秘评分均明显降低(P<0.05);两组SAP患者的第1秒内用力呼气量占呼气量的比例(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积百分比(FEV1%)均明显改善(P<0.05)。与对照组治疗后比较,观察组患者的FEV1/FVC、FEV1%改善更明显(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组SAP患者经治疗后中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR值)均明显降低(P<0.05);与对照组治疗后比较,观察组患者的NLR值明显降低(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组SAP患者在治疗后的血清降钙素原(PCT)、超敏C...     

苏州市公共卫生应急体系问题与补短板对策

目的为了适应新时期公共卫生应急管理的需要和总结新冠肺炎疫情防控公共卫生应急体系中暴露的问题,为政府提供公共卫生应急体系建设补短板清单。方法采用文献调查、观察(座谈和问卷调查)、比较和描述性研究等方法,通过归纳和演绎相结合手段进行综合分析研究;调查评价性问题设定等级予以赋值,使用认可指数(平均数)表述;评价性问题认可标准使用黄金分割法,统计学检验使用U检验方法。结果确定预警、应急预案、应急管理部门、体系联动和疫情研判5个方面评价问题和措施建议问题,获得的评价性问题认可指数依次为0.916、0.905、0.571、1.000、1.190,均达到认可标准,认可指数之间差异无统计学意义(P=0.357);对应评价性问题获得建立预警触发机制、模块化应急预案、政府公共卫生应急机构、各行业协同应急演练制度和专家疫情研判机制等措施建议。结论经过文献查阅、管理人员座谈和专业人员问卷调查3个步骤确定苏州市公共卫生应急体系补短板措施建议具有适合本地的针对性和客观性;研究结果为卫生行政部门向政府提出公共卫生应急体系建设补短板项目提供了客观依据。