甲氨蝶呤对妊娠小鼠滋养细胞bcl-2/bax表达的影响

目的探讨甲氨蝶呤（MTX）促进滋养细胞凋亡、抑制滋养细胞增生的机制。方法建立正常妊娠小鼠模型、MTX妊娠小鼠模型,运用免疫组化方法检测两组小鼠孕13 d滋养细胞bax、bcl-2的蛋白表达;同时运用原位细胞凋亡（TUNEL）检测两组小鼠孕13 d的滋养细胞凋亡情况。结果与正常妊娠模型小鼠相比,MTX妊娠模型小鼠滋养细胞bax蛋白表达较强（P〈0.01）,bcl-2蛋白表达减弱（P〈0.01）;MTX妊娠模型小鼠滋养细胞凋亡指数明显高于正常妊娠模型小鼠（P〈0.01）。结论 MTX抑制滋养细胞增生、促进滋养细胞凋亡,可能是通过调节bax、bcl-2蛋白的表达实现的。     

电针刺激足三里和肺俞穴对兔内毒素休克诱发急性肺损伤的影响

目的 评价电针刺激足三里和肺俞穴对兔内毒素休克诱发急性肺损伤的影响.方法 健康雄性新西兰大白兔60只,体重1.5 ～ 2.0 kg,2月龄,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=10):假手术组(S组)、血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉-Ⅸ组(Z组)、内毒素组(L组)、电针刺激穴位+内毒素组(EL组)、电针刺激非穴位+内毒素组(SEL组)、电针刺激穴位+锌原卟啉-Ⅸ+内毒素组(ELZ组).EL组和ELZ组电针刺激双侧足三里和肺俞穴,疏密波,频率15 Hz,刺激强度以兔出现轻微肌颤为宜,1次/d,15 min/次,连续5d;SEL组刺激足三里和肺俞穴旁开0.5 cm处.停止电针刺激后24 h,L组、EL组、SEL组和ELZ组静脉注射脂多糖5 mg,/kg,S组和Z组给予等容量生理盐水0.5ml.Z组和ELZ组给予脂多糖后2h腹腔注射锌原卟啉-Ⅸ10 μmol/kg,其他4组给予等容量NaHCO3 1 ml.注射脂多糖后6h时处死兔,取肺组织,进行肺损伤评分,测定肺泡上皮细胞凋亡指数、HO-1和HO-1 mRNA表达.结果 与S组比较,Z组肺损伤评分、肺泡上皮细胞凋亡指数、HO-1和HO-1 mRNA 表达差异无统计学意义(P＞0.05),其他4组肺损伤评分和肺泡上皮细胞凋亡指数升高,HO-1和HO-1 mRNA表达上调(P＜0.01);与L组比较,EL组肺损伤评分和肺泡上皮细胞凋亡指数降低,HO-1 和HO-1 mRNA表达上调(P＜0.01),其他2组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与EL组比较,ELZ组肺损伤评分和肺泡上皮细胞凋亡指数升高,HO-1和HO-1 mRNA表达下调(P＜0.01).结论 电针刺激足三里和肺俞穴可减轻兔内毒素休克诱发急性肺损伤,其机制与上调肺组织HO-1表达,抑制肺泡上皮细胞凋亡有关.     

8例结直肠混合性腺神经内分泌癌临床病理分析

目的 探讨结直肠混合性腺神经内分泌癌 (mixed adeno-neuroendocrine carcinoma,MANEC)的临床病理特征。方法 回顾性分析2016年8月-2020年12月于天津市中西医结合医院(南开医院)经手术切除的结直肠MANEC 8例患者的临床资料。结果 8例患者中女性3例,男性5例,平均年龄63岁。临床表现无特异性。影像学表现为占位和淋巴结转移。肿瘤标记物检测示部分病例铁蛋白(2例)和癌胚抗原(2例)升高,所有病例甲胎蛋白和糖蛋白199均未见明显升高。6例行术前肠镜活检,诊断为腺癌5例,腺癌或MANEC 1例。肿瘤发生部位以结肠为主(6例)。溃疡型5例,隆起型3例,肿瘤最大径3~9 cm。光镜下:腺癌肿瘤细胞呈腺管样排列,2例伴有黏液腺癌;神经内分泌肿瘤细胞呈弥漫、巢团或器官样分布,小细胞型1例,大细胞型7例。淋巴结转移7例,肝转移1例。免疫组织化学示腺癌CK8/18、CK19和CEA不同程度阳性,神经内分泌肿瘤CgA、Syn和CD56不同程度阳性,Ki-67热点区40%~80%阳性。随访5例存活,中位生存时间17个月,2例死亡,平均生存时间8个月。结论 结直肠MANEC发病率较低,缺乏临床特异性,易发生淋巴结转移,属于高度恶性肿瘤,诊断主要依赖免疫组织化学辅助的病理检查。     

利胆药物对胆色素结石患者引流胆汁成分的影响

观察某些利胆药物对胆色素结石（pigment stone,PS）患者引流术后胆汁成分的影响,为胆石病的三级预防提供佐证。选取27例行胆总管控查加T管引流术或经内镜鼻胆管引流术（ENBD）治疗的原发性胆管结石患者,于术后分别服用熊脱氧胆酸片（熊脱氧胆酸组,7例）、利胆灵（利胆灵组,7例）以及熊脱氧胆酸片加利胆灵（联合组,7例）,并与对照组（6例,饮用开水）进行比较。取服药前及服药后1、3、5、7天胆汁,检测胆汁总胆汁酸（TBA）、3种结合型胆汁酸[甘氨胆酸（GCA）、牛磺胆酸（TCA）、甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）]、总胆红素（TBIL）、非结合胆红素（UCB）以及胆汁中Ca^2＋浓度、细菌性和内源性β-葡萄糖醛酸酶（β-G）活性。结果显示：（1）熊脱氧胆酸组及联合组胆汁TBA、GCA、TCA、GCDCA治疗后明显升高（P〈0．05）;利胆灵组无显著性变化,与对照组比较差异无显著性。（2）利胆灵组及联合组在增加胆汁中TBIL含量同时可降低胆汁中UCB浓度（P〈0．05）。（3）利胆灵组以及联合组可以明显降低胆汁中Ca^2＋浓度（P〈0．05）。（4）利胆灵组以及联合组可以明显降低胆汁中内源性β-葡萄糖醛酸酶（肛G）活性。提示利胆灵联合应用熊脱氧胆酸能增加胆色素结石患者引流术后胆汁中的TBA及结合型胆汁酸的含量,增加TBIL的排出,降低UCB和Ca^2＋浓度,降低内源性β-G活性,从而降低胆汁成石性,可用于临床胆色素类结石的预防,尤其适合术后预防结石复发。     

慢性胰腺炎的中西医结合个体化阶梯性治疗

目的：研究慢性胰腺炎中西医结合个体化阶梯性治疗的疗效。方法：慢性胰腺炎患者187例,根据不同类型给予相应的中西医结合个体化阶梯性治疗,根据疼痛缓解程度评价疗效。结果：187例中1例在施行胰十二指肠切除术后出现MODS,经治疗痊愈。全组阶梯性治疗方法有效缓解疼痛93.88%～100%,显著缓解疼痛51.01%～71.42%。结论：根据不同临床分型,给予中西医结合个体化阶梯性方案治疗,能够有效缓解不同发病阶段慢性胰腺炎的疼痛症状。     

腹腔镜与开腹肝左外叶切除对机体应激反应的对照研究

目的 研究腹腔镜与开腹肝左外叶切除术治疗左肝内胆管结石,不同术式对人体应激反应的影响.方法 对本院2006年5月至2010年9月,因左肝内胆管结石行开腹肝左外叶切除及腹腔镜肝左外叶切除术的患者进行回顾性分析,两种手术各随机选择30例.于术前24 h以及术后即刻、24 h、48 h、72 h抽取静脉血,检测中性粒细胞、肾上腺素、皮质醇、血糖、NK细胞、白介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平,进行统计学分析.结果 肾上腺素、皮质醇术后即刻达到峰值,中性粒细胞、血糖、IL-6、CRP术后24 h达峰值.术后各时段对应数值开腹手术组均高于腹腔镜手术组(P＜0.05).NK细胞术后24 h达最低值,但两组无明显差异(P＞0.05).结论 左肝内胆总管结石行肝左外叶切除术时,腹腔镜术式对机体应激反应影响较小.     

腹腔感染大鼠机体免疫状态变化

目的：观察腹腔感染大鼠的机体免疫状态变化,研究清热解毒方剂对机体细胞免疫失衡的影响。方法：采用人工胃液联合大肠杆菌腹腔内注射的方法建立大鼠腹腔感染模型,取Wistar大鼠120只随机分为对照组、模型组、清热解毒方剂组,造模后12h、24h、48h、72h经腹主动脉取血,采用流式细胞仪检测全血中辅助性T细胞1/2（Th1/Th2）比值以及调节性T细胞（Treg）比例的变化。结果：与正常对照组比较,模型组Th1/Th2比值在造模后12h明显升高,造模后48、72h明显降低（P〈0.05或P〈0.01）,而Treg比例在造模后12h明显下降,随后明显升高（P〈0.05或P〈0.01）,清热解毒方剂组Th1与Th2比值以及Treg比例升高和降低的幅度较模型组明显减低。在模型组和清热解毒方剂组,Th1/Th2比值与Treg比例呈线性负相关（P〈0.05）。结论：腹腔感染大鼠细胞免疫功能抑制,表现为Th1/Th2比值减少,其机制与肠源性内毒素介导Treg比例和活性增加有关;清热解毒方剂可能通过调节Treg比例来减少Th1向Th2的漂移,从而起到维持机体免疫平衡的作用。     

携带白蛋白启动子小鼠SCP2基因表达载体的构建

胆汁中胆固醇的过多分泌伴随肝细胞浆内胆固醇的浓度显著增高是形成胆固醇结石的关键因素,其中固醇携带蛋白2(SCP2)是影响肝细胞中游离胆固醇浓度的主要因素.本实验旨在构建携带白蛋白启动子小鼠SCP2基因表达载体.     

伊托必利联合理气中药对糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空的影响

目的:证实伊托必利联合理气中药治疗糖尿病胃轻瘫较单药治疗的优势,并阐明其在促进胃排空方面的机制。方法:70只Wistar大鼠观察1周后随机分为5组。A组(对照组)10只,B组(糖尿病组)15只,C组(糖尿病加理气中药组)15只,D组(糖尿病加伊托必利组)15只,E组(糖尿病加伊托必利联合理气中药组)15只。饲养24周后,所有实验大鼠进行13C胃排空实验,记录胃固体半排空时间;然后灌服甲基橙溶液后处死动物,计算甲基橙残留量,观察胃内液体排空情况。结果:(1)与对照组比较,糖尿病鼠的胃固体半排空时间明显延长(P<0.01),胃内甲基橙残留量较多(P<0.01);(2)给予理气中药或伊托必利治疗可改善糖尿病鼠的胃排空(固体及液体)速度(P<0.05);(3)理气中药联合伊托必利治疗组糖尿病鼠胃排空(固体及液体)的改善效果明显优于单用理气中药组或伊托必利组(P<0.01)。结论:理气中药联合伊托必利可有效促进糖尿病大鼠胃动力,其在促进胃排空方面效果优于单用理气中药或伊托必利组,为临床治疗糖尿病胃轻瘫提供了新的治疗途径。     

七氟醚预先给药对大鼠肾脏缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 探讨七氟醚预先给药对大鼠肾脏缺血再灌注时细胞凋亡的影响.方法 健康清洁级雄性SD大鼠30只,体重220～260 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚组(S组).I/R组和S组采用夹闭左肾蒂45 min后恢复再灌注的方法 建立肾脏缺血再灌注模型,C组腹部正中切口,右肾切除,左肾蒂游离后,缝合腹腔;S组模型制备前30 min开始吸入2.2%七氟醚和氧气的混合气体至再灌注3 h.于再灌注3 h时采集下腔静脉血样5 ml,测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度,然后取肾组织,光镜下观察肾组织病理学结果,TUNEL法检测细胞凋亡,计算细胞凋亡指数,采用RT-PCR和Western blot法测定血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA及蛋白表达水平.结果 与C组比较,I/R组和S组血清BUN、Cr浓度、肾脏近曲小管坏死程度、细胞凋亡指数升高,HO-1 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,S组血清BUN、Cr浓度、细胞凋亡指数、肾脏近曲小管坏死程度降低,HO-1 mRNA表达上调(P＜0.05).结论 七氟醚预先给药可通过抑制细胞凋亡而减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,其抑制细胞凋亡作用可能与HO-1 mRNA表达上调有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of sevoflurane pretreatment on renal ischemia-reperfusion (I/R)-induced apoptosis in kidney in rats. Methods Thirty pathogen-free male SD rats weighing 220-260 g were randomized into 3 groups (n=10 each):group control (group C);group I/R and group sevoflurane(group S). Renal I/R was induced by clamping the left renal pedicle for 45 min in I/R and S groups. In group S inhalation of 2.2% sevoflurane in O2 was started at 30 min before operation and maintained throughout the experiment.Venous blood samples were taken at 3 h of reperfusion for determination of serum BUN and Cr concentrations. The animals were then sacrificed and the left kidneys were removed for microscopic examination, detection of apoptosis(by TUNEL)and determination of heme oxygenase-1(HO-1) mRNA and protein expression (by RT-PCR and Western blot).Results Renal I/R significantly increased serum BUN and Cr concentrations, apoptotic index(percentage of apoptotic cells) and the severity of necrosis of renal proximal convoluted tubules (0=normal,4=necrosis of whole segment of proximal convoluted tubules).Sevoflurane inhalation attenuated the I/R-induced changes mentioned above.HO-1 mRNA and protein expression was up-regulated by I/R and HO-1 mRNA expression was further up-regulated by sevoflurane inhalation.Conclusion Sevoflurane pretreatment can protect kidney against I/R injury by attenuating cell apoptosis.Up-regulation of HO-1 mRNA expression may be involved in the mechanism.