褪黑素对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用

目的 探讨褪黑素(MLT)对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用及其机制。方法 采用流式细胞术和荧光分光光度法在离体和整体条件下分别检测小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。在此基础上,腹腔注射MLT,观察2 Gy X射线全身照射后24 h小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量及胸腺细胞³H-TdR掺入率和Con A、LPS诱导的脾T、B淋巴细胞转化率的变化。结果 离体研究中,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞体外接受0.5~6.0 Gy照射后,凋亡小体百分率、DNA裂解率均呈剂量依赖性增加,而照射前预先加入2 mmol/L MLT,细胞凋亡小体百分率、DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低。整体研究中,2Gy全身照射前腹腔注射MLT,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率显著低于单纯照射组,接近或低于假照水平,MLT剂量在0.1~2.5 mg/kg范围内均有作用,但无明显剂量依赖性。小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量、胸腺细胞³H-TdR掺入率及有丝分裂原诱导的脾脏T、B淋巴细胞转化率在2 Gy全身照射后均显著低于假照组(P <0.001)。0.5~10 mg/kgMLT预先腹腔注射,胸腺、脾脏淋巴细胞数显著高于0 mg/kg体重组(单纯照射),其中0.5 mg/kg体重组增高最显著;胸腺细胞³H-TdR掺入率显著增高(P <0.01或P <0.001),以0.5 mg/kg体重组增高最显著;Con A诱导的T细胞转化率显著增高,也以0.5 mg/kg体重组为著;LPS诱导的B细胞转化率增高,以10mg/kg体重组最显著。结论 MLT在体内和体外均可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞损伤,对免疫功能具有保护作用。     

DNA损伤诱导细胞周期解偶联

目的：观察DNA损伤因子丝裂霉素 (MMC) 能否诱导细胞周期解偶联。 方法：采用PI荧光标记及流式细胞术 (FCM) 测定细胞周期并分析细胞倍体的变化。 结果：1.0及2.0 mg•L^-1 MMC作用后24 h, SKOV-3细胞八倍体数显著增高(P<0.01, P<0.05)。1.0、2.0及4.0 mg•L^-1 MMC作用后24 h,L929及EL-4细胞八倍体数显著增高(P<0.05,P<0.01,P<0.01及P<0.01,P<0.05,P<0.01)。结论：MMC可诱导人卵巢癌细胞SKOV-3、小鼠成纤维细胞L929及小鼠淋巴瘤细胞EL-4发生细胞周期解偶联。     

不同剂量X射线诱导体内及体外小鼠巨噬细胞CD14的剂量效应关系

目的：观察不同剂量X射线照射在体内及体外对小鼠巨噬细胞CD14表达的影响。方法：采用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD14阳性细胞数。体内实验选择16 h、体外实验选择4 h,低剂量为0.05～0.20 Gy、高剂量为0.5～6.0 Gy。 结果：整体照射时,低剂量X射线使CD14表达明显增强,而较高剂量X射线（大于2.0 Gy）明显抑制CD14表达;在体外照射时,0.075 Gy和2.000 Gy以内的较高剂量X射线也使CD14表达明显增强,而4.0~6.0 Gy 的剂量使J774A.1细胞的CD14表达明显受到抑制。 结论：低剂量X射线在体内及体外均能诱导小鼠巨噬细胞的CD14表达;小于2.0 Gy时也能增强CD14的表达,而剂量大于2.0 Gy时CD14的表达呈剂量依赖性下降,而且在体外的变化更明显。     

线粒体基因16189 T/C突变性糖尿病的特点

目的：研究线粒体基因16189 T/C突变性糖尿病在中国北方人群中的特点。方法：采用聚合酶链反应（PCR）和限制性片段长度多态性（RELP）分析方法对中国北方155例2型糖尿病患者（糖尿病组）和164例正常中国北方人（对照组）进行核心家系线粒体基因筛检和分析。结果：①线粒体基因 16189 T/C 突变在糖尿病组占32.26%（50/155）,在对照组占15.24%（25/164）,二者比较差异有显著性（P<0.05）。②在糖尿病患者中线粒体基因16189 T/C 突变组（n=50）与非突变组(n=105)比较,空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（GHbA₁c）、空腹C-肽及餐后2 h C-肽,差异均无显著性。③线粒体基因16189 T/C突变的糖尿病患者临床特点多为50岁左右发病,男女发病率无明显差异（1.3∶1）;发病时体重指数常较高（74%的患者BMI超过标准值）;65%患者伴血脂代谢异常;具有明显的母系遗传倾向。结论：线粒体基因16189 T/C点突变可能仅为人群中的基因多态现象,还不能确定其为糖尿病单基因致病突变。     

细胞凋亡的线粒体调控机制与电离辐射

线粒体在外界刺激(如电离辐射)诱发细胞凋亡中起中心调控作用。各种死亡信号通过Bcl-2家族蛋白或直接诱导线粒体膜通透性增加、细胞色素c释放和caspases激活,最终引起细胞凋亡。线粒体膜通透性改变的机制,目前还不完全清楚。简要综述细胞凋亡的线粒体调控机制及电离辐射在其机制中的可能作用。     

低剂量电离辐射诱导小鼠胸腺细胞蛋白的早期表达

采用双向电泳方法检测低剂量Ｘ射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞核、细胞浆蛋白的早期表达。结果表明７５ｍＧｙＸ射线照射后４小时细胞核出现４个新蛋白点；５个增强蛋白点；ｌ个减弱蛋白点。胸腺细胞浆出现３个新蛋白点和３个增强蛋白点。这些早期基因表达产物可能参与细胞增殖、分化中的细胞信息传递过程和基因表达调控。     

低剂量X射线照射诱导G1期阻滞的适应性反应

目的观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导Ｇ１期细胞阻滞。方法采用碘化丙啶（ＰＩ）荧光探针标记细胞，流式细胞术（ＦＣＭ）检测并分析细胞周期。结果证实１．５ＧｙＸ射线全身照射后１２小时，小鼠胸腺细胞发生明显Ｇ１期阻滞。而０．０７５Ｇｙ低剂量预照射可明显减轻其后１．５Ｇｙ攻击剂量所致Ｇ１期阻滞。离体照射ＥＬ－４淋巴瘤细胞也得到类似结果。结论０．０７５ＧｙＸ射线照射能诱导胸腺淋巴细胞及ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞的适应性反应。     

INVOLVEMENT OF THE Ca^2＋-PROTEIN KINASE C AND ADENYLATE CYCLACE SIGNAL PATHWAYS IN THE ACTIVATION OF THYMOCYTES IN RESPONSE TO WHOLE-BODY IRRADIATION WITH LOW DOSE X-RAYS

Objective. To study the molecular mechanism of the stimulatory effect of low dose radiation(LDR) on T cell activation. Methods. Thymocytes from Kunming mice exposed to whole-body irradiation(WBI) with different doses of X-rays were analyzed for the changes in signal molecules of the phospholipase C-phos-phatidylinositol biphosphate(PLC-IP2) and G protein-adenylate cyclase(AC) pathways. Results. It was found that[Ca^2 ]i increased in response to doses within 0. 2 Gy which was most marked after 0. 075 Gy and the increase was accentuated in the presence of Con A. The changes in CD3 and cal-cineurin (CN) expression of the thymocytes followed the same pattern as the alterations in [Ca^2 ]i after LDR. The expression of α,β1 and β2 isoforms of protein kinase C(PKC) was all up-regulated after 0. 075 Gy with the increase in PKC-β1 expression being most marked. The cAMP/cGMP ratio and PKA activity of the thymocytes was lowered after low dose radiation and increased after doses above 0. 5 Gy in a dose-de-pendent manner, thus giving rise to J-shaped dose-response curves. The Ca antagonist TMB-8 and cAMP stimulant cholera toxin suppressed the augmented thymocyte proliferation induced by LDR. Conclusion. Data presented in the present paper suggest that activation of the PLC-PIP2 signal path-way and suppression of the AC-cAMP signal pathway are involved in the stimulation of the thymocytes fol-lowing WBI with low dose X-rays.     

X射线全身照射诱导小鼠脾细胞LAMP-1 表达的时程变化

目的观察X射线全身照射对小鼠脾细胞LAMP-1表达的影响。方法采用流式细胞术检测0．075和2Gy X照射后不同时间（0、2、4、8、16、24和48h）以及用Con A刺激4h后，脾细胞表面表达LAMP-1的阳性细胞数。结果脾细胞表面的LAMP-1在2Gy X射线全身照射后8、16和24h表达明显下降；0．075Gy X射线全身照射后2h显著升高，而48h又下降到低于对照的水平。0．075和2Gy X射线全身照射后再加用Con A（10μg／μl）刺激4h，LAMP-1的表达均增强；但是此时2Gy的效应比0．075Gy更明显。结论LAMP-1参与电离辐射作用下免疫信号的传导，高剂量X射线抑制它的表达，而低剂量X射线在早期对其表达有促进作用，与体内免疫细胞的活性密切相关。Con A促进免疫细胞表面LAMP-1的表达。     

组织细胞周期调节缺陷基因A型单核苷酸多态性与精神分裂症的关系

目的:探讨组织细胞周期调节缺陷基因A型(HIRA)单核苷酸多态性（SNP）与精神分裂症的关系。方法:在216个汉族精神分裂症核心家系中,以PCR和限制性片段长度多态（RFLP）方法对HIRA基因rs1473109 (A/G碱基改变) SNP进行检测,应用基于家系的连锁不平衡方法分析基因型数据。 结果: HIRA基因的rs1473109等位基因和基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律 (P>0.05)。传递不平衡检验（TDT）显示HIRA基因rs1473109与精神分裂症无连锁及关联。HIRA基因的rs1473109位点基因型频数分布与精神分裂症的阳性症状中关系妄想、读心症和思维连贯性障碍有关联（χ²=9.310,υ=2,P=0.010;χ²=14.373,υ=2,P=0.001;χ²=11.067,υ=2,P=0.004）。结论:中国汉族精神分裂症患者HIRA基因本身或其附近的基因可能与精神分裂症阳性症状的发生有关。