报告基因显像监测基因治疗研究进展

为评价基因治疗，需要随时对治疗基因的定位和表达进行监测。放射性核素报告基因技术是检测基因表达的最好方法。用基因融合，双顺反子，双启动子及双向转录等重组技术，构建表达报告基因的腺病毒载体，导入靶细胞或组织内，然后注射与报告基因偶合的核心素标记的探针，进行PET，SPECT或γ－照相，可无创伤地，重复地定量显示报告基因表达。目前，用于基因治疗的报告基因和报告探针系统有：HSV1-tk（单纯疱疹病毒腺嘧啶核苷激酶基因）和碘，氟同位素标记的尿嘧啶，鸟嘌呤的衍生物；突变的多巴胺D2R（多巴胺2型受体）基因和^18F-FESP(^18F-氟乙基螺环哌丁苯）；SSTr2(生长抑素2型受体基因）和生长抑素类似物等，其中，部分已用于临床试验治疗。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ的临床应用及检测方法进展

cTnI(心肌肌钙蛋白Ⅰ)是心肌肌钙蛋白的一种亚型，正常人血液中含量很低，当心肌细胞损伤时，cTnI在血液中的含量迅速升高。近年来随着cTnI检测方法的不断改进，cTnI已成为最具有临床价值的心肌损伤标志物之一，被广泛应用于心脏疾患的临床诊断和检测。     

无毛小鼠骨髓细胞染色体核型分析

目的了解无毛小鼠染色体遗传表型。方法以健康昆明小鼠做对照，制备染色体标本，分析常规染色体G-显带核型。结果常规染色体分析对照组可见染色体数目异常占9.5%，结构畸变占3%；实验组可见染色体数目异常占9.3%，结构畸变占6%。G-显带核型分析除对照组发现一个细胞有结构异常外其余细胞全部为正常核型。结论无毛小鼠的染色体数目和结构未见明显异常与正常对照小鼠无明显差别。     

线粒体DNA4977bp缺失检测肿瘤细胞辐射敏感性的初步研究

目的:探讨mtDNA4977bp缺失用于肿瘤细胞辐射敏感性检测的可行性。方法:分别采用MTT法和巢式PCR法测定人肿瘤细胞株—肝癌细胞(HepG2)、食管癌细胞(EC-9706)和乳腺癌细胞(MCF-7)不同剂量γ射线照射后的存活分数(SF)和mtDNA4977bp缺失率。结果:MTT法:2Gy、4Gy和8Gy照射后,HepG2和EC-9706的SF显著低于MCF-7,表明HepG2和EC-9706细胞具有更高的辐射敏感性,HepG2细胞照射后的SF略低于EC-9706细胞,但统计学差异不显著。PCR法:1Gy和4Gy照射后3种肿瘤细胞mtDNA4977bp缺失率无显著性差异。8Gy照射后HepG2和EC-9706 mtDNA4977bp缺失进一步增加,而MCF-7的缺失率下降,显著低于HepG2与EC-9706细胞的缺失率,但HepG2和EC-9706细胞的缺失率无统计学差异,提示HepG2和EC-9706细胞的辐射敏感性高于MCF-7细胞,这与MTT法测定结果相符。结论:测定mtDNA4977bp缺失作为快速、简便的检测方法,有望用于肿瘤细胞辐射敏感性预测。     

人脂联素重组体体外对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制

目的：研究人脂联素重组体对人乳腺癌MDA—MB-231细胞体外侵袭能力的影响。方法：将MDA—MB-231细胞分设对照组和脂联素重组体加药（2．5、5、0、10、20、30μg／ml）组，药物作用一定时间后，分别以MTT法、Transwell小室实验，Chamber小室实验，黏附实验检测脂联素重组体对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和黏附能力的影响，以明胶酶谱法检测其对肿瘤细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响。结果：脂联素重组体质量浓度高于5．0μg／ml时，对MDA—MB-231细胞生长具有明显的抑制作用（P〈0．01）；能明显地降低肿瘤细胞体外侵袭能力（P〈0．01），侵袭抑制率随脂联素重组体质量浓度的升高而增加，介于22．64％～77．84％之间；脂联素重组体质量浓度高于2．5μg／ml时，明显地抑制肿瘤细胞的迁移能力（P〈0．01）；脂联素重组体对ECM和FN黏附能力影响的程度不同，对FN的敏感性大于ECM；脂联素重组体质量浓度大于2．5μg／ml时，明显抑制肿瘤细胞MMP-2和MMP-9的分泌（P〈0、05或P〈0．01），后者的分泌量随质量浓度的升高而下降。结论：脂联素重组体在大于2．5μg／ml时，可能通过保护基底膜不受破坏而抑制人乳腺癌细胞的侵袭能力。     

N-烟酰基-L-天门冬氨酸的致突变性检测

背景与目的:研究N-烟酰基-L-天门冬氨酸遗传毒性,为临床安全用药提供理论依据.材料与方法:采用Ames试验、中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)染色体畸变试验及小鼠微核试验对N-烟酰基-L-天门冬氨酸进行致突变性研究.结果:Ames试验中加S9与不加S9混合液的各剂量组回变菌落数与阴性对照无明显差别,且无剂量-效应关系.小鼠骨髓细胞微核率及CHO细胞染色体畸变率与阴性对照组比较,差别也无统计学意义(P＞0.05).结论:在本实验条件下,N-烟酰基山天门冬氨酸无致突变作用.     

中药以毒攻毒抗肿瘤作用研究进展

中草药抗肿瘤作用已成为国内外药物研究的热点，鉴于以毒攻毒类中药有一定类似于西药的毒性特点，自有研究表明三氧化二砷（As2O3）单味注射剂对急性早幼粒细胞白血病有显著的临床治疗效果后，中药以毒攻毒的抗肿瘤研究越来越受到重视。该文对全蝎、蛇毒、斑蝥、蟾蜍、砒霜、雄黄、重楼、藤黄等近年来以毒攻毒抗肿瘤作用，如细胞毒活性，抑制肿瘤生长，以及诱导肿瘤细胞凋亡、分化等机制方面的研究概况进行综述。     

人Rb94基因联合γ-辐射抑制乳腺癌细胞生长的研究

目的 构建含有人类视网膜母细胞瘤94基因(Rb94基因)的腺病毒表达载体,研究其联合γ-辐射抑制人恶性肿瘤细胞生长的作用.方法 从人类胚胎中提取总RNA,经逆转录得到目的cDNA,用PCR技术扩增目的基因片段,将其连接入载体pENTRTM1A,然后经LR重组再转入到表达载体 pAd/CMV/V5-DESTTM中,对重组体进行鉴定.然后联合γ-辐射作用于乳腺癌细胞,观察细胞生长曲线的变化.结果 成功构建了含Rb94基因的腺病毒表达重组体并通过鉴定,联合γ-辐射作用于乳腺癌细胞后有更强的抑制效应.结论 本实验构建的人Rb94基因重组腺病毒表达质粒是成功的,与γ-辐射联合共同作用于肿瘤细胞有更强的抑制肿瘤细胞生长的作用.     

IRM-1小鼠对γ射线抗性的研究

为探讨IRM-1小鼠的辐射抗性，将小鼠分别经5．2、5．6、6．0、6．4、6.8、7.3Gy^137Cs γ射线照射后，机率单位法测定LD50／30d，经2．5、4．0Gy^137 Csγ射线照射后不同时间，分析外周血白细胞(WBC)、骨髓有核细胞(BMC)数的变化，结果显示IRM-1小鼠经2．5和4．0 Gy^137Csγ射线照射后28d，其外周血白细胞分别为正常值(照射前)的89．5％、74．1％，30d时骨髓有核细胞为正常值的82．4％、69．6％。测得的LD50／30d分别为6．8Gy(♂)和6．2Gy(♀)。为IRM-1小鼠的应用提供了实验依据。     

苦豆子生物碱衍生物9002~#急性毒性及体内抑癌活性实验研究

目的使用昆明种小白鼠对苦豆子生物碱衍生物9002~#进行急性毒性实验。使用IRM-2纯系小鼠进行淋巴瘤和乳腺癌的体内抑癌活性的实验研究。方法急性毒性实验:IP方式给药,测定小鼠LD_(50)。抑癌试验:建立荷瘤小鼠模型,以腹腔给药(ip)方式给予2个不同剂量的药物水溶液,观察瘤重和体重,测定抑瘤率。结果经实验测定9002~#的LD_(50)为4362±810mg/kg,毒性较低,经重复试验9002~#确有明显的抑癌作用。对淋巴瘤,剂量50mg/kg×10,抑瘤率51.3％～53.5％(P<0.01),150mg/kg为31.3％～35.7％(P<0.05);对乳腺癌,剂量50mg/kg×10,抑瘤率为57.1％(P<0.01),150mg/kg为48.6％(P<0.01)。结论苦豆子生物碱衍生物9002~#属低毒有抑癌活性的化合物,对IRM-2纯系小鼠移植肿瘤有明显的抑制作用,以50mg/kg×10剂量组对淋巴瘤和乳腺癌抑制剂果最显著,值得深入研究。