MTT比色法检测人肿瘤细胞辐射敏感性的体外研究

目的 探讨MTT比色法在人肿瘤细胞辐射敏感性检测中的价值.方法 用1、2、4和8 Gy的γ射线照射肝癌细胞(HepG2)、食管癌细胞(EC-9706)和乳腺癌细胞(MCF-7),观察存活分数(SF)和平均致死剂量(D0).结果 γ射线剂量为2、4、8 Gy时,HepG2 和EC-9706的SF均显著低于MCF-7(P＜0.05、＜0.01);D0值HepG2 (2.36 Gy)＜EC-9706(2.70 Gy)＜MCF-7(3.95 Gy).HepG2 辐射敏感性最高,MCF-7最低.结论 MTT法检测人肿瘤细胞辐射敏感性简便、快捷且准确性较高,对指导临床个体化放疗有重要作用.     

碘标记c-myc反义寡核苷酸乳腺癌显像的实验研究

用反义核酸为示踪剂 ,靶组织必须具有特异的或高表达的靶分子 ,即ＤＮＡ/ＲＮＡ。在正常组织中 ,一般基因都是单拷贝的 ,而肿瘤组织中绝大部分细胞都有某种或几种癌基因的扩增和高表达。因此 ,利用反义核酸进行肿瘤显像在理论上是可行的。 1994年 ,Ｄｅｗａｎｊｅｅ等[1]首先报道利用111Ｉｎ标记的ｃ ｍｙｃ反义寡核苷酸探针进行ＢＡＬＢ/ｃ乳腺癌动物模型显像 ,实验结果证实了该方法的准确性和灵敏性。参照该实验和131Ｉ标记反义寡核苷酸的方法[2 ] ,我们研究了12 5Ｉ标记的反义和正义寡核苷酸在正常津白Ⅱ号小鼠和乳腺癌自发瘤模型中的分…     

人IL-21基因重组复制缺陷型腺病毒对肿瘤细胞的初步抑瘤效应

IL-21在治疗自身免疫性疾病、变态反应性疾病和抗肿瘤中发挥重要作用,特别是在肿瘤的基因治疗方面被广泛研究,具有潜在的临床研究价值.本研究利用AdMax腺病毒包装系统制备含人IL-21基因的重组复制缺陷型腺病毒,观察腺病毒转染食管癌细胞EC-9706后对其生长的影响,为开展IL-21基因在肿瘤治疗中的应用提供资料.     

IRM-2及其亲本小鼠mRNA差异显示分析

目的利用mRNA差异显示技术分析IRM-2在辐射抗性产生过程中是否有辐射抗性基因或抗性相关基因的表达。方法提取IRM-2小鼠及其亲本615、ICR／JCL小鼠脾细胞总RNA，进行DDRT—PCR，挑选差异表达片段并进行再扩增。结果PCR扩增产物经电泳后，有6条表达差异的带型出现，所有差异表达片段均获得了再扩增。结论某些特异基因的表达参与到了ELM-2小鼠辐射抗性产生这一过程中，推测可能是辐射抗性基因或抗性相关基因。     

电离辐射诱发小鼠脾细胞DNA链断裂及修复

目的通过观察γ射线照射后IRM-2辐射抗性小鼠DNA链的断裂及修复,探讨IRM-2小鼠辐射抗性产生的可能机理。方法采用脉冲场凝胶电泳法,测定不同剂量γ射线诱发IRM-2小鼠及其亲本ICR/JCL和615小鼠脾细胞DNA单、双链断裂及照射后不同时间DNA链断裂的修复动力学。结果对照组IRM-2小鼠本底DNA损伤较低,即ssb和dsb的数目低于未照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.01)。不同剂量(1、2、4和8Gy)照射后,IRM-2小鼠ssb和dsb的数量均明显低于经相同剂量照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.05和P<0.01)。在较低剂量2Gy时,IRM-2小鼠与亲本小鼠相比,dsb和ssb修复无统计学差异;当分别接受4、8Gy大剂量照射后,IRM-2小鼠表现出较高的修复效率,即IRM-2小鼠0.5h和1hdsb、ssb修复速率比亲本小鼠快(P<0.05和P<0.01),而且修复后剩余的损伤远低于亲本小鼠。结论电离辐射后IRM-2小鼠DNA链断裂量较低,DNA链断裂的修复速率比亲本小鼠快,因此能及时快速地抵抗辐射造成的损伤,具有较强的辐射抗性。     

IRM-2近交系小鼠的遗传监测

目的 观察IRM-2小鼠基因纯合性和遗传质量。方法用电泳法对IRM-2近交系小鼠进行了生化标记基因检测,并做了毛色基因和皮肤移植试验。结果分析测定了第23代小鼠13条染色体上25个基因位点和第38代的13个生化标记基因,所查基因位点全部纯合;同系异体问背部皮肤移植100d后,未见排斥现象,为同系组织遗传性;与BALB／c白化系小鼠交配进行的毛色基因测试,杂交第一代小鼠的毛色与IRM-2小鼠一致,均为浅桂皮色,基因型为AAbbCCDD。结论可以认为,IRM-2小鼠是遗传上高度纯合的近交系小鼠。     

IRM-2近交系小鼠的生殖生长特性

观察复方女贞子对实验性高血糖模型的影响。结果表明：该药对由肾上腺素、葡萄糖引起的小鼠血糖升高有明显的对抗作用;可明显降低四氧嘧啶糖尿病大、小鼠的血糖水平及降低高血糖大鼠并发血清甘油三酯升高的作用。对正常血糖无明显影响。     

E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响

目的 研究抗放药物E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响。方法 用不同剂量的^137Csγ射线照射培养的CHO和CHL细胞,比较在有或没有E838的情况下,其对细胞集落形成率以及转化率的影响。结果 在3Gy照射剂量下,CHO细胞加药1μg/ml处理组集落形成率显著高于不加药组（P＜0．05）,而转化率加药组比不加药组低且有统计学意义（P＜0．01）。CHL细胞在此范围内变化亦有同样的趋势,但结果无统计学意义（P＞0．05）。结论 E838在浓度范围内对辐射诱导哺乳动物细胞转化有一定的抑制作用。     

IRM-2小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养和生物学特性

目的分离原代培养IRM-2小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）,从本质上揭示IRM-2小鼠的辐射抗性。方法分离IRM-2小鼠MEFs,并进行原代培养和传代培养。观察MEFs生长形态,测定第3代和第5代细胞生长曲线、细胞周期和增殖指数。结果IRM-2小鼠在胎龄14～16d进行原代MEFs分离,MEFs在体外为贴壁生长型细胞,6代前MEFs生长良好。第3代和第5代MEFs在培养至第3天开始进入对数生长期,到第6天时细胞数达到高峰。MEFs增殖活跃,第3代和第5代细胞增殖指数分别为53%和46%。结论成功分离、培养了IRM-2小鼠MEFs,为进一步利用MEFs研究小鼠的辐射抗性机制奠定了基础。     

人IL-21基因对卵巢癌细胞生长的抑制作用

目的 研究含有IL-21基因的重组腺病毒表达载体(Ad-IL-21)抑制人卵巢癌细胞生长的作用。方法 Ad-IL-21重组体于体外转染卵巢癌细胞株ES-2,用MTT比色法和流式细胞术观察ES-2细胞的生长曲线和细胞周期的变化。结果 Ad-IL-21组ES-2细胞的生长比空白对照组和对照腺病毒组慢,在转染后第3天开始生长明显缓慢(P<0.05),转染后第5天Ad-IL-21组的细胞生长基本稳定在一定水平(P<0.05)。Ad-IL-21转染后ES-2细胞停留在G₁期细胞增加,而G₂期和S期细胞减少。结论 腺病毒介导的外源性IL-21基因可有效转染人卵巢癌细胞,并对其生长有抑制作用。