红细胞压积及其季节性变化的临床意义探讨

目的 调查成人红细胞压积是否有季节性变化,并探讨其临床意义。方法 93－97年检测15,178例中、老年男、女性成人红细胞压积值,对其与多种气象要素（气温、相对湿度、气压）作相关性分析。结果 男、女性成人红细胞压积及其阳性率均存在显著季节性差异,（P＜0．01）。各季红细胞压积均值与气温及相对湿度呈直线负相关（r分别为男：－0．642,－0．573;女：－0．683;－0．610）,与气压呈直线正相关（r分别为男：0．647;女：0．673）（均P＜0．01）。结论 受气象条件变化影响红细胞压积具有季节性变化,可能是缺血性心、脑血管疾病的血液流变学影响机制之一。     

肺癌患者支气管肺泡灌洗液中K-ras基因突变的检测及其临床意义

Ｋ ｒａｓ基因是与肺癌密切相关的原癌基因之一 ,目前国内外对它的研究主要局限于术后石蜡标本的回顾性研究。我们从肺癌患者支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中检测Ｋ ｒａｓ基因点突变的情况 ,为肺癌的早期诊断及预后评价提供依据。材料与方法　 1 材料 :我们检测了 10 0份标本 ,其中 40份为组织标本 ,包括纤支镜活检组织及术后蜡块 (表 1) ;6 0份为灌洗液标本 ,来自我院 1998～ 2 0 0 0年住院及门诊接受支气管肺泡灌洗术 (ＢＡＬ)的患者 ,男 37例 ,女 2 3例 ,平均年龄(5 6± 12 )岁。 6 0例患者中肺癌 44例 ,均为周围型肺癌 ,其中40例最终经…     

硼中子俘获疗法促人黑色素瘤细胞凋亡

目的 研究硼中子俘获疗法(BNCT)体外杀伤人黑色素瘤细胞的效应及机制.方法 首先检测黑色素瘤细胞A375吸收含硼化合物二羟基苯丙氨酸硼(BPA)的情况,然后采用医院中子照射器(IHNI-1)对含硼(10B)细胞进行照射.克隆存活实验检测细胞的放射敏感性,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测凋亡,Western blot检测胞质内细胞色素C表达和caspase-9的激活.结果 BPA孵育24 h,A375细胞10B浓度为(2.884±0.148)μg/107个细胞,达到了BNCT杀伤细胞的要求.富含10B的细胞经中子照射2.1 min后存活分数降低为对照组的58％(t=2.964,P＜0.05),细胞经中子照射后24 h增殖率下降为对照组的83％(t=3.286,P＜0.05),BNCT组细胞凋亡率达(55.2±7.9)％,明显高于对照组(t =9.754,P＜0.05),胞质内细胞色素C水平上升且caspase-9激活程度增加(t=7.625、8.307,P＜0.05).结论 BNCT能够杀伤黑色素瘤细胞,其机制可能通过线粒体途径诱导细胞凋亡.     

CD_3AK细胞加IL-2治疗恶性肿瘤体外与临床应用研究

CD3AK细胞在体外对体外癌细胞系细胞杀伤活性最强，对自体癌细胞杀伤活性与TIL细胞接近，且均显著大于LAK细胞．CD3AK细胞IL－2治疗癌症患者30例中，CR＋PR14例，有效率为46％．Kernofsky的生活质量标准评分治疗后有显著提高（P＜0．01）．血浆IL－2活性治疗后有明显提高（P＜0．05）．T4／T6治疗后有所提高．     

血管内皮抑素转基因口服制剂治疗结肠癌的实验研究

目的　采用血管内皮抑素转基因双歧杆菌口服制剂 (ETB 2 )对裸鼠结肠癌模型进行治疗 ,并探讨其抑瘤机制。方法　人结肠癌细胞LoVo接种于BALB/C裸鼠皮下建立动物模型 ,随机分为四组 :对照组 (6只 )以生理盐水灌胃、ETB 2A组 (9只 )、ETB 2B组 (9只 )、ETB 2C组 (9只 ) ,分别给予ETB 2 3.0、4 .5、6 .0 g·kg-1·d-1。接种后 2 4h灌胃给药 ,持续 2 1d ,第 2 8天处死动物 ,计算抑瘤率。观察病理变化 ,免疫组化检测微血管密度 (MVD)、增殖细胞核抗原 (PCNA)指数和血管内皮生长因子(VEGF)阳性率 ,RT PCR检测VEGFmRNA、TGF β1mRNA ,DNA原位末端标记 (TUNEL)检测凋亡率。结果　对照组抑瘤率为 0 ,ETB 2A、ETB 2B、ETB 2C分别为 2 3.7% ,5 9.2 % ,6 7.9% ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,ETB 2C组与ETB 2A组相比差异也有显著性 (P <0 .0 5 )。ETB 2A、ETB 2B、ETB 2C组MVD与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,ETB 2B、ETB 2C组VEGF阳性率、VEGFmRNA、TGF β1mRNA与对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;PCNA指数治疗组有降低趋势 ,但各组间比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。ETB 2A、ETB 2B、ETB 2C组凋亡率分别与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　ETB 2可显著抑制裸鼠人结肠癌的生     

JB—4水溶性塑料包埋剂在肿瘤多细胞球体中的应用

用ＪＢ－４Ｅｍｂｅｄｄｉｎｇｋｉｔ对肿瘤多细胞球体进行包埋、切片和染色，组织没有变形和收缩，球体组织显示清晰。本法包埋时间短，用普通切片机就能切２～４ｍ厚的切片，直接染色，无需二甲苯和酒精进行染色前处理。     

用[α-~(32)P]—dATP标记恶性疟原虫DNA探针诊断恶性疟疾的研究

本文报告从培养的恶性疟原虫提取基因组DNA,以[α-~(32)p]—dATP标记,作为探针,按DNA斑点杂交法检查取自海南省恶性疟患者的血样23份,结果全部呈杂交阳性反应,镜检阳性样本DNA探针检出率为100%,与10例间日疟患者血样全部出现交叉杂交。该探针可检测出恶性疟原虫密度为0.0001%的原虫血症水平,与鼠疟原虫、正常人血和人白细胞无交叉杂交。     

筛选有效抑制血管内皮细胞小窝蛋白-1表达的小干扰RNA及其毒性检测

目的 筛选有效抑制血管内皮细胞小窝蛋白-1(Caveolin-1)表达的小干扰RNA(small interferenceRNA,siRNA)序列,并检测转染复合物的细胞毒性. 方法 设计合成针对Caveolin-1的siRNA 3条(siRNA422,siRNA548,siRNA710)及1条带绿色荧光标记的通用阴性对照FAM-siRNA.在siRNAFect介导下转染血管内皮细胞.用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定转染后血管内皮细胞中Caveolin-1 mRNA的表达,Western blot方法测定干扰后Caveolin-1蛋白表达,比较抑制率,筛选出有效抑制Caveolin-1表达的siRNA.采用磺基罗丹明B法(sulforhodamineB,SRB)分析转染复合物的细胞毒性. 结果 ①在siRNAFect相同剂量下,siRNA 20、30 nmol/L组或40 nmol/L组转染效率均达到85％以上(P＜0.01);②siRNAFect 1.3μl复合10 nmol/L或20 nmol/L siRNA组细胞存活率均达到80％以上(P＜0.05);③siRNA548对EA.hy926细胞Caveolin-1基因mRNA抑制效果最明显(P＜0.01);④与阴性对照组及siRNA422、siRNA710相比较,siRNA548干扰血管内皮细胞48 h后,Caveolin-1蛋白的表达量最低(P＜0.01). 结论 ①siRNA548对血管内皮细胞Caveolin-1表达的抑制效果最大.②siRNA浓度20 nmol/L复合siRNAFect 1.3μl转染效率高,细胞毒性低,适合转染.     

抗gp130单克隆抗体B—R12,B—S8和B—K11的生物学特性研究

本文继续研究另３个抗ｇｐ１３０单克隆抗体Ｂ－Ｒ１２，Ｂ－Ｓ８和Ｂ－Ｋ１１的生物学特性。结果显示，Ｂ－Ｒ１２和Ｂ－Ｓ８可抑制ＩＬ－６家族细胞因子的活动；相反，Ｂ－Ｋ１１对ＩＬ－６家族细胞因子的活动无任何影响。     

人脑胶质瘤多细胞球体培养方法的研究

本实验用静止培养法观察了接种细胞密度、血清浓度、琼脂或琼脂糖浓度及用于溶解琼脂或琼脂糖的不同溶剂对人脑胶质瘤细胞系SHG-44多细胞球体形成的影响。接种1～3×10~6细胞于铺有10m1 0.75～1.0%琼脂或琼脂糖-生理盐水或培养液底层的培养皿(直径为90mm)中,加入15ml含20%小牛血清的Eagle'sMEM培养液,所得到的球体大小较均匀,形态较圆,3～4天即可形成完整紧密的球体,重复性良好。本法与旋转瓶培养法相比,具有操作简便、经济省时等优点。