判定肿瘤抗原特异性T细胞反应的新方法

几十年来 ,人们致力于肿瘤疫苗的研究 ,旨在激活患者自身的免疫系统 ,产生持久有效的抗肿瘤免疫。在肿瘤疫苗治疗前后 ,如何准确地定量、定性判定肿瘤抗原特异性Ｔ细胞应答 ,评价疗效 ,是影响抗肿瘤疫苗发展的关键。51 Ｃｒ释放法和有限稀释法 (ｌｉｍｉｔｉｎｇｄｉｌｕｔｉｏｎａｎａｌｙｓｅｓ,ＬＤＡ) ,一直被认为是评价特异性Ｔ细胞反应的金标准 ,但实践证明这两种方法费时、费力且敏感性低。近 5、6年来 ,一些评价Ｔ细胞功能和特异性的新方法逐渐建立起来[1 ,2 ] ,由于这些方法更加敏感 ,提供的信息更有意义。尤为重要的是 ,有的方法…     

冻存细胞计算机管理软件的研制及应用(摘要)

冻存细胞计算机管理软件的研制及应用（摘要）杨连君陈志南隋延仿米力曲萍（第四军医大学病理学教研室，西安７１００３２）我们编制了冻存细胞计算机管理软件—ＣＭ（ＣｅｌＭａｎａｇｅｒ），可对冻存的细胞系或细胞株进行自动管理、查询和统计归类。ＣＭ软件的主控程...     

音猬因子的功能受体斑片在培养神经干细胞中的表达

目的　观察在培养的神经干细胞内是否有发育调控分子———音猬因子 (sonichedgehog)功能受体———斑片 (patched)表达。　方法　神经干细胞克隆在体外培养传代后 ,用patched的特异性引物对培养的神经干细胞进行RT PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记克隆的探针 ,对神经干细胞进行原位杂交分析。　结果　神经干细胞克隆内大量的细胞均可表达sonichedgehog的功能受体patched ,patched阳性细胞间未见明显差别 ,克隆边缘与中央的patched分布也未见明显差别。　结论　sonichedgehog信号传导路可能在神经干细胞的增殖与分化过程中起重要作用。     

抗人肝癌铁蛋白单克隆抗体的研究

用人肝癌组职提取的酸性同功铁蛋白免疫获得6株与人肝癌组织相关的单克隆抗体。选其中一株(Ab10)对肝癌、肝硬化异组织进行了免疫组织化学定位,结果表明组织特异性不明确,琼脂双向扩散及间接ELISA测定,Ab10除能与肝癌铁蛋白结合外,也可与脾.正常肝异硷性铁蛋白结合,说明b10所针对的抗原决定簇无特异性.本文对铁蛋白单克隆抗体的制备进行了文献复习,并对如何寻找抗肝癌特异的铁蛋白抗体作初步讨论。     

PTEN基因对人肝癌细胞系HHCC作用的研究

目的：研究PTEN基因对人肝癌细胞系HHCC细胞恶性表型及凋亡的影响。方法：将PTEN真核表达载体pBabe-PuroPTEN及空质粒pBabe-Puro，通过脂质体介导的基因转染方法，转入该基因表达缺失的HHCC细胞系中，嘌呤霉素筛选获得稳定表达PTEN基因的转染细胞。通过平板克隆形成试验、DNA凝胶电泳、相差显微镜和电镜，观察PTEN基因对人肝癌细胞系HHCC恶性表型及凋亡的影响。结果：转染后的细胞，经原位杂交、免疫组织化学检测证实，有PTEN mRNA及其蛋白的表达；平板克隆形成试验证实，转染PTEN基因后，细胞形成克隆的能力降低；转染PTEN的细胞在相差显微镜和电镜下可出现典型的凋亡形态学改变；DNA琼脂糖凝胶电泳呈现出明显的梯状条带。结论：外源性PTEN基因导入HHCC细胞后，可降低HHCC的细胞的恶性表型，并促进凋亡发生。     

VEGF真核表达载体的构建及在内皮与心肌细胞内的表达

目的：探讨外源性人VEGF165基因在内皮细胞与心肌细胞内表达的可行性。方法：构建了(vaseular endothelium growth factor,VEGF)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)基因其表达载体pIRES2—FGFP—VEGF165，以脂质体法转染内皮细胞和心肌细胞，采用荧光显做镜检测内皮细胞与心肌细胞中EGFP的表达，同时利用免疫组织化学方法检测VEGF的表达。结果：成功地构建了真核表达载体pIRES2—EGFP—hVEGF165，采用脂质体法转染内皮细胞与心肌细胞后，经荧光显微镜观察，可见细胞内有EGFP的表达，同时经免疫组化证实有VEGF的表达。结论：采用脂质体法可以成功地将外源性VEGF165基因转染到内皮细胞与心肌细胞中，并进行表达。本研究为今后利用VEGF基因治疗心肌缺血等疾病提供了实验基础。     

人肝癌组织中p53与HSP70相互作用的初步研究

目的 :探讨人肝癌中热休克蛋白 70 (HSP70 )与 p5 3的相互作用。方法 :用免疫组织化学染色法 ,从 12例肝癌组织中筛选HSP70与 p5 3均呈阳性表达的标本 ,并以免疫共沉淀法提取之。然后用SDS PAGE及Westernblot分析双阳性标本中两种蛋白的存在形式。结果 :用免疫组织化学法检测到 12例肝癌组织中有 3例为双阳性 ,用抗HSP70mAb免疫共沉淀的样品 ,可检测到 p5 3蛋白。用抗p5 3mAb免疫共沉淀的样品也可检测到HSP70蛋白。结论 :人肝癌中p5 3与HSP70以复合物的形式而存在 ,此可为肝癌的发病机制及免疫治疗的研究提供新的思路     

EGCG对过氧化氢所致神经元过氧化损伤的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酚(EGCG)对过氧化氢(H2O2)所致神经元过氧化损伤的保护作用。方法分离胚胎18d大鼠大脑皮质神经元,原代培养2d后分为4组:①正常细胞对照组;②药物对照组(正常细胞内加EGCG);③氧化损伤组(正常细胞内加H2O2);④损伤后药物治疗组(氧化损伤30min后加入EGCG)。各组细胞再培养36h后,进行神经元形态观察、细胞活性MTT分析及细胞中丙二醛(MDA)含量的检测。结果氧化损伤组神经元多崩解成碎片,突起不完整,细胞活性显著降低,MDA含量显著升高。而在损伤后药物治疗组,神经元胞体立体感较强,多数突起完整。细胞活性显著增高,而MDA含量则显著下降。结论EGCG可抑制羟基自由基的产生,从而保护H2O2氧化损害的神经     

网络信息在病理学教学中的应用

国际互联网中有大量的病理学相关信息,我们可以将其充分利用于医学院校的病理学大课,小课,课外科研和继续教育中,以充实病理教学材料,促进教学效果。     

兔小肠黏膜下层与软骨细胞体外培养

目的观察软骨细胞在兔小肠黏膜下层(SIS)上的生长特性,为使SIS作为软骨组织工程化的载体打下基础。方法用物理和化学方法处理兔小肠黏膜下层,将不同浓度的兔软骨细胞与SIS进行体外共培养,分别进行组织学、相差显微镜和扫描电镜观察。结果经物理和化学处理的SIS纯度高、孔隙多,胶原纤维未受损;软骨细胞在SIS材料上生长、黏附、增殖,并能长入材料的孔隙内,分泌大量的细胞外基质成分。结论SIS细胞相容性良好,不影响软骨细胞的形态,对细胞生长和功能表达无抑制作用,是一种较理想的软骨细胞载体。