子宫内膜异位症大鼠血浆神经内啡肽特点及其对妊娠功能的影响

【目的】探讨血浆β-内啡肽(-βEP)水平对子宫内膜异位症(EMT)大鼠妊娠功能的影响。【方法】将雌性SD大鼠于第3个动情周期的动情期复制EMT模型,取造模成功大鼠20只,随机分为模型组和那曲酮(为阿片受体拮抗剂)组各10只,另设假手术组大鼠10只;那曲酮组于动情前期灌服那曲酮2 mg.kg-1.d-1,其他时间灌服等容积生理盐水,模型组和假手术组均灌服生理盐水,连续1个月;取血检测动情前期血清-βEP、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)水平,在动情后期检测血清孕激素(P)水平以及妊娠功能指标。【结果】模型组大鼠动情前期血清-βEP、PRL水平升高,LH水平降低,动情后期血清P水平降低,与假手术组比较均具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);那曲酮组大鼠动情前期血清-βEP、PRL水平降低,LH水平升高,动情后期血清P水平升高,与模型组比较均具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);妊娠功能各指标中那曲酮组大鼠排卵数、孕育活胎数、受孕率、着床率均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01)。【结论】EMT模型大鼠血清-βEP水平升高是其妊娠功能障碍的原因之一,阿片受体拮抗剂可改善生殖内分泌状态而有效提高妊娠功能。     

甲酸钠抗氧自由基损伤的研究

目的和方法 :采用溶血试验 ,小鼠组织谷胱甘肽 (GSH)、脂质过氧化产物 (MDA)测定 ,采用质粒构象改变等方法检测甲酸钠的抗氧自由基损伤活性。结果 :甲酸钠明显抑制H2 O2 致人红细胞 (RBC)溶血作用 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;明显提高小鼠肝GSH水平 (P <0 .0 5 ) ;抑制小鼠肝、肾脂质过氧化的产生 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;抑制受辐射质粒PUC18超螺旋构象百分率的下降 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :甲酸钠具有明显抗氧自由基损伤的活性 ,是一个良好的自由基清除剂。     

PPP2RC基因结构特点和生物学功能

PPP2R5C是蛋白磷酸酶2A的调节性亚单位中一个家族成员,它在调节细胞增殖、分化和转化等方面具有重要作用,其作用主要通过对P53蛋白某些位点氨基酸的去磷酸化而实现.近期研究提示,PPP2R5C基因表达模式的改变与细胞恶性转化相关;此外,有研究发现PPP2R5C可以作为B-CLL病情进展的相关标记.本文就PPP2R5C基因结构、生物学功能及PPP2R5C基因与肿瘤发生发展的关系进行了探讨.     

整合素受体介导bcl-2反义核酸联合化疗药物对大肠癌细胞的增殖抑制作用

目的:评价以整合素配体-聚乙烯亚胺复合物(RGD-PEI)为载体携带bcl-2反义核酸(ASODN)分别联合化疗药物三氧化二砷(As2O3)和羟喜树碱(HCPT)对大肠癌细胞caco-2增殖抑制的作用。方法:改良MTT法检测bcl-2ASODN联合化疗药物对细胞的半数抑制率(IC50),金正均Q值法判断化疗药物与反义核酸联合使用的效果,并计算化疗药物的增敏倍数。结果:单用As2O3和HCPT的IC50分别是3.478μmol/L及0.771μg/mL;0.75μmol/LASOND联合As2O3和HCPT的IC50分别为3.393μmol/L和0.726μg/mL,与单用As2O3和HCPT的IC50相似;而相同浓度的RGD-PEI-ASODN联合As2O3及HCPT的IC50分别为0.119μmol/L和0.071μg/mL,将caco-2细胞对化疗药物的敏感性分别提高29.2倍及10.8倍。结论:在整合素受体介导时可以有效提高反义核酸对caco-2细胞的增殖抑制率,与化疗药物联用能明显提高细胞对化疗药物的敏感性。     

三种阳离子脂质体介导血管内皮细胞基因转染效率的比较

目的:评价不同阳离子脂质体介导基因转染血管内皮细胞的转染效率。方法:实验于2006-12/2007-02在中山大学生化实验室及广州市创伤外科研究所完成。采用增强型绿色荧光蛋白基因为报告基因,分别采用Lipofectin、Lipofectamine、Dosper3种不同的阳离子脂质体为载体,转染人脐静脉血管内皮细胞。在24孔板中,每孔加入人脐静脉血管内皮细胞悬液(1×106个细胞),各孔分别加入3种不同阳离子脂质体增强型绿色荧光蛋白质粒复合物,分别于培养24,48h后用荧光显微镜及流式细胞仪测定增强型绿色荧光蛋白在细胞内的表达及转染效率。结果:3种不同阳离子介导的增强型绿色荧光蛋白基因转染的人脐静脉血管内皮细胞内均有绿色荧光蛋白表达,24h后明显,48h后达高峰。Dosper介导组绿色荧光细胞百分比明显高于Lipofectin介导组及Lipofectamine介导组,差异有非常显著意义(P<0.01)。结论:Dosper介导的血管内皮细胞基因转染效率较高,较适合作为血管内皮细胞的基因转染载体。     

实时荧光定量PCR分析脐血T细胞亚群中TRECs水平

近期研究发现成人胸腺仍存在活化T细胞合成的功能，胸腺近期功能需要通过测定胸腺近期输出的幼稚(Naive)T细胞的数量来衡量。而能够作为Naive T细胞的标志的是T细胞受体删除DNA环(T-cell receptor excision DNA circles，TRECs)。我们的前期研究也提供了正常人外周血T细胞和胸腺细胞中TRECs含量的情况，本研究进一步分析脐血中不同组分T细胞的TRECs含量特点。     

中国人食管鳞癌10q23微卫星不稳定和杂合性缺失初步探讨

食管癌是较常见的恶性肿瘤之一，早期诊断和积极治疗十分重要。食管癌在癌变发展的不同阶段均有原癌基因的激活和抑癌基因的失活。近年主要集中于研究癌基因c-myc、c—erbB-2、cyclin D1及抑癌基因Rb、p53、p16、APC／MCC等，但尚未发现与食管癌高度相关的特征性基因。据文献报道，染色体     

B-ALL病人TCR Vβ基因谱系和克隆性分析

 目的　了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法　利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果　 13例B ALL病人分别表达 2～ 18个Vβ亚家族。 13例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞 ,增殖形式包括寡克隆及寡克隆增殖趋势、双克隆和单克隆。Vβ2 1和Vβ2 3亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高。结论　B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ谱系呈现优势利用的特点 ,并存在克隆性增殖的T细胞 ,这可能是机体对白血病相关抗原产生的特异性免疫反应 ;Vβ2 1和Vβ2 3亚家族T细胞发生克隆增殖改变的趋向性比较明显 ,可能与B ALL相关抗原刺激有关     

恶性血液病中的P_(15)~(INK4B)基因甲基化

目的　探索特定基因操纵区CpG岛高甲基化对人类造血系统恶性肿瘤的作用。方法　利用甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP)的方法 ,用亚硫酸氢钠修饰后的DNA为模板进行甲基化特异性聚合酶链反应 (PCR) ,测定了 2 5例急性髓系白血病 (AML) ,15例慢性粒细胞白血病 (CML) ,16例骨髓增生异常综合征 (MDS)和 12例多发性骨髓瘤 (MM)患者P1 5INK4B基因在操纵区 5′ CpG岛异常甲基化的发生率。结果　P1 5INK4B基因异常甲基化的发生率 :AML为 84% ,CML为 0 ,MDS为 5 0 % ,MM为 75 %。高危型的MDS较低危型更易发生甲基化。在MM中 ,P1 5INK4B甲基化一般发生在早期 ,与骨髓象的幼稚程度关系密切。结论　调节细胞生长和分化的P1 5INK4B基因高甲基化是使P1 5INK4B 基因失活的主要原因之一 ,CpG岛高甲基化与恶性血液病的发生密切相关。     

类鸦片受体δ2介导的免疫细胞激活作用

将人粒细胞和Ｍｙｔｉｌｕｓｅｄｕｌｉｓ免疫细胞分别与不同浓度的类鸦片肽ＤＡＭＡ（１０（－１３）～１０（－１０）ｍｏｌ／Ｌ）或δ拮抗剂在３７和２３℃保温１０～２０ｍｉｎ，用计算机显微图像分析法分析两种细胞的活化情况。结果显示细胞免疫活性随ＤＡＭＡ浓度增加而提高，细胞发生阿米巴样变形或变长（形状因子小于０．５）。当加入δ拮抗剂ｎａｌｔｒｉｎｄｏｌｅ（１０（－１０）ｍｏｌ／Ｌ）时，ＤＡＭＡ对以上两种细胞的免疫激活作用均受到显著抑制（Ｐ＜０．０５），说明该类鸦片肽受体能被低浓度ｎａｌｔｒｉｎｄｏｌｅ封闭；然而，同样浓度的另一种δ拮抗剂钠洛酮却没有这种封闭作用，提示ＤＡＭＡ通过δ_２受体的介导发挥对免疫细胞的激活作用。