重组核心蛋白多糖对转化生长因子β1刺激人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的作用

目的：观察重组核心蛋白多糖(decorin，DCN)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的作用，以探讨DCN抑制增生性瘢痕形成的机制。方法：实验于2004-01／10在广州市创伤研究所和上海市烧伤研究所完成。分离培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞，将5μg／LTGF—β1或同时与2mg／L重组DCN加入培养液中；培养12，24，48h用MTT法测定细胞增殖速度；培养24h用流式细胞仪检测细胞周期，并收集细胞培养上清，放射免疫方法检测Ⅰ，Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅠ，PCⅢ)含量。结果：TGF-β1促进正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞增殖、增加S期百分比、高PCⅠ，PCⅢ蛋白含量及两者比例(P&;lt;0.05或P&;lt;0．01)；同时加入TGF-β1和重组DCN，正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞增殖速度，S期百分比，PCⅠ，PCⅢ蛋白含量及两者比例均低于TGF-β1组(P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)，且与空白对照组比较差异无显著性意义(P&;gt;0.05)。结论：DCN具有抑制TGF-β1刺激正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞增殖与胶原合成的作用，这种作用可能是其抑制瘢痕增生和促进癜痕成熟的机制之一。     

93例烧伤后下肢瘢痕的治疗体会

目的：探讨下肢烧伤后瘢痕挛缩的手术适应症，方法：采用游离中厚皮片移植，各种皮瓣修复等手术治疗收治的93例病人，对治疗结果进行总结比较，分析了皮瓣或皮片失活的原因。结果：皮片或皮瓣完全成活71例，部分成活18例，不成活4例。功能恢复完全者79例，部分功能恢复者11例，功能无恢复者3例。     

15-脱氧-△12,14-前列腺素J2对兔耳增生性瘢痕Ⅰ型胶原表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的配体15-脱氧-△12,14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对兔耳增生性瘢痕Ⅰ型胶原表达的影响,探讨15d-PGJ2防治增生性瘢痕的可行性.方法 选取新西兰大白兔18只,在兔耳腹侧面制作2 cm×3 cm全层皮肤缺损创面,每耳2个,共计72个,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,随机分组,分别用15d-PGJ2及生理盐水行瘢痕内注射,1次/d,共7次.停药后第14、21天两组同时取材;每组每次切取18个组织块.应用免疫组织化学、荧光定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot检测Ⅰ型胶原的表达.结果 与对照组比较,15d-PGJ2注射后瘢痕体积缩小,变软变平,色泽轻度变浅.Ⅰ型胶原主要分布于真皮的细胞间质、成纤维细胞胞质中,血管壁上亦见阳性信号,在各个时间点15d-PGJ2组Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达均较对照组低,且差异有统计学意义(P<0.05).结论 PPAR-γ的配体15d-PGJ2可降低瘢痕内Ⅰ型胶原的含量,引起瘢痕萎缩,从而防治瘢痕.     

几丁质膜作为表皮干细胞培养支架的实验研究

Objective To investigate the feasibility of constructing a skin tissue engineering cover-ing on chitinous membrane using rat epidermal stem cells (ESCs). Methods Rat ESCs were isolated and cultured by cold digestive method and collagen type Ⅳ adherent method. Cell colonies were observed with in-verted microscope. Expressions of DNA and RNA of ESCs were detected with laser scanning confocal micro-scope. Growth curves of cells were determined with Alamar BlueTM colorimetric method. Expressions of sur-face markers of ESCs (CD29, CD71, CD49d, and CD34) were detected with flow cytometer. Positive expres-sions of CK15, CK19, and P63 of ESCs were determined by immunohistochemistry. Influence of original chi-tinous membrane leachate in different dilutions on ESCs was observed. Condition of growth of ESCs on the ve-hicle was observed. Results Isolated cultured cells were verified as ESCs, of which the doubling generation time was 48 hs. CD29 and CD49d were positive;CD71 and CD34 were negative;CKi9, CK15, and P63 were positive. Compared with that of control group, ESCs cultured in chitinous membrane leachate showed slight cell proliferation when diluted to 1:8-1:512 dilutions, but there was no statistically significant difference (P>0.05). The checkerboard-form cell colonies of ESCs could be visualized with naked eyes on the chi-tinous membrane in 2-4 weeks of culture. A multitude of ESCs were seen to grow on fibres under microscope. Conclusions Chitinous membrane may be used as ESCs culture vehicle, and biological compatibility is good.     

荷负电气溶胶治疗大鼠烧伤创面后表皮干细胞的变化

目的探讨荷负电气溶胶对烧伤创面表皮干细胞影响以及其促进创面愈合的机制。方法将清洁级健康Wistar大鼠48只随机分为A、B两组，每个动物背部两侧分别制成实验创面或对照创面，实验创面以荷负电气溶胶照射，A组动物每日照射2次，B组每日照射1次；利用干细胞表达β1整合素的特性，加入整合素β1抗体，通过免疫组织化学染色检测创面表皮干细胞含量的变化，比较各时相点两组创面间的差异。结果A、B两组各时相点实验创面的表皮干细胞数目是同组对照创面的1．5到2倍；而A组实验创面的表皮干细胞数又较B组实验创面增多。结论经用荷负电气溶胶照射大鼠烧伤创面能促进表皮干细胞的增殖。     

重组人核心蛋白多糖固相拮抗转化生长因子β1对瘢痕成纤维细胞的刺激作用

目的模拟人体内核心蛋白多糖和转化生长因子β1(TGF-β1)接触方式,观察核心蛋白多糖固相拮抗TGF-β1刺激瘢痕成纤维细胞的效果.方法制备成纤维细胞胶原网格(FPCL)体外三维培养模型,将其分为4组.对照组向FPCL中加入培养液;核心蛋白多糖组向FPCL中混入终浓度2 mg/L的重组人核心蛋白多糖,再加入培养液;TGF-β1组向FPCL中加入含5 μg/L TGF-β1的培养液;TGF-β1+核心蛋白多糖组向FPCL中混入终浓度2 mg/L的重组人核心蛋白多糖,然后加入含5μg/L TGF-β1的培养液.在培养12、24、48、72、96 h时观察各组FPCL的收缩情况,并用蛋白质印迹法与逆转录聚合酶链反应分别检测FPCL中瘢痕成纤维细胞Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白及mRNA表达水平.结果各培养时相点下,TGF-β1组FPCL收缩比对照组明显增强,核心蛋白多糖组FPCL收缩则比对照组明显减弱.TGF-β1组的PAI-1、α-SMA的蛋白及相应mRNA表达水平(3 482±211、4 320±272;0.89±0.15、0.56±0.11)显著高于对照组(1 764±147、1 699±146;0.29±0.06、0.21±0.06,P＜0.01);其余两组相应检测指标与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论重组人核心蛋白多糖混入胶原凝胶,可显著抑制TGF-β1对瘢痕成纤维细胞的刺激作用,表明在体外核心蛋白多糖具有拮抗TGF-β1的作用.提示皮肤组织损伤后,由于创面机械性缺少核心蛋白多糖,TGF-β1活性上调,可能是瘢痕增生的一个重要因素.     

高压电击伤合并严重心肺损伤一例

患男，22岁，抬钢筋时不慎接触100kV高压高例地昏迷，被带电钢筋压住胸壁数分钟后送入当地医院救治，于伤后4h转入笔单位。查体：患意识清楚，烦躁，呼吸32min，心率118次/min，早搏4-6次/min。血压为120/60mmHg(1mmHg=0.133kPa)。     

皮肤软组织快速扩张的临床应用

为了证实缩短扩张周期的可行性，我院处９５年以来，采用皮肤软组织快速扩张法为２２例烧伤后瘢痕增生挛缩畸形的病人进行了治疗，疗效满意，并明显缩短扩张 周期。     

腋部瘢痕挛缩畸形手术疗效的评价

目的：为了更有效地提高腋部瘢痕挛缩畸形手术后的疗效。方法：对各种腋部瘢痕进行分类，根据不同的腋部瘢痕挛缩畸形分别采用不同方法进行治疗。并比较其适应证和疗效。结果：五瓣法和肩胛皮瓣岛状转移法疗效稳定，中厚植皮如果术后缺乏持续的功能锻炼，再次挛缩的发生率相对较高。结论：轻度瘢痕等缩宜采用五瓣法矫正，中、重度的瘢痕挛缩，如果肩胛部局部条件许可宜采用肩胛皮瓣岛状转移修复。