疱疹灵药效学研究

目的 观察疱疹灵的镇痛、止痒和抗感染作用。方法 采用醋酸致小鼠扭体法及小鼠甲醛伤害法评价疱疹灵的镇痛作用及对痒痛反应的影响；以磷酸组胺悬滴刺激豚鼠破损后足背方法，观察本品的抗局部伤害作用；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀方法，探讨本品的消肿抗感染作用。结果 疱疹灵明显降低醋酸致小鼠扭体次数，减少小鼠因甲醛伤害舔咬后足及阴器的时间；本品明显降低所用磷酸组胺总量，提高豚鼠致痒阈；4倍于临床用量的疱疹灵还有一定的改善二甲苯致小鼠耳廓肿胀作用。结论 疱疹灵具有明显的镇痛、止痒作用，同时还具有一定的抗感染作用，皮肤局部用药后，有利千瘸疹件疾病疼痛、刺痒等痒状的改善．     

骨髓间充质干细胞对小鼠急性肺损伤治疗作用的研究

目的探讨输入外源性骨髓间充质干细胞(MSCs)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(AL)I的治疗作用.方法实验随机分为3组(n=10):对照组、ALI组和MSCs治疗组.健康小鼠LPS气管滴入方法建立ALI模型,尾静脉输入全骨髓培养法分离纯化的MSCs.流式细胞分析鉴定MSCs.HE染色组织切片观察输入MSCs前后肺组织病理形态学改变,W/D比值和髓过氧化物酶(MPO)活性评价肺水肿和炎症反应程度.ELISA检测肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的含量.结果流式细胞分析鉴定:培养MSCs表面标记CD105为阳性,CD34为阴性.肺组织病理学显示:ALI组小鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血、出血、水肿,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变;MSCs治疗组小鼠肺组织损伤程度明显减轻.肺W/D比值、肺组织MPO活性及TNF-α和IL-6含量:ALI组小鼠肺W/D比值、肺组织MPO活性及TNF-α和IL-6含量高于对照组(P<0.05);MSCs治疗组肺W/D比值、肺组织MPO活性及TNF-α和IL-6含量低于ALI组(P<0.05).结论输入MSCs能够减轻脂多糖致急性肺损伤程度,其作用可能与降低肺W/D比值和肺组织MPO活性、IL-6及TNF-a含量有关.     

脂肪酶的研究应用进展

脂肪酶是一类具有多种催化功能的酶,主要催化三酰甘油酯及其它一些不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应,还具有水解外消旋混合物以及酯和肽键合成的能力.脂肪酶已广泛应用于食品、化工、医药合成等诸多领域.就其来源、结构、作用及机制和应用等方面作一简要综述.     

人胚胎干细胞无血清无饲养层培养体系的建立

背景:研究表明FGF2,TGFβ/activin/nodal和IGF信号通路是人胚胎干细胞保持其多能性所必需的,然而直接添加外源性碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β和胰岛素是否能够维持人胚胎干细胞的自我更新目前尚无报道.目的:拟建立人胚胎干细胞无饲养层无血清条件下的培养体系.设计,时间及地点:细胞学体外观察,于2007-09/2009-02在中国科学院昆明动物研究所完成.材料:12.5～13.5d龄清洁级ICR孕鼠2只,由昆明医学院动物中心提供.人胚胎干细胞株BG02购自美国Bresagen公司.方法:①消化离心BG02细胞,重悬于无饲养层过渡培养基后接种,常规培养5～7 d,挑去分化的人胚胎干细胞,加入分散酶消化,切割成小团块,离心重悬后按1:3比例重新接种预铺层粘连蛋白的4孔板,此时培养基换成无血清无饲养层培养基,由80%DMEM/F12、20%KSR、2 mmol/L glutamine、1%非必需氨基酸、0.1 mmol/L β-巯基乙醇、ITS(×1)、10~6 U/L青霉素、100 mg/L 链霉素、4 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、0.12 μg/L转化生长因子β1组成.②无菌条件下取出ICR胎鼠,组织块胰酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞,接种在0.1%明胶包被的6孔板中即为饲养层.将生长在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上的人胚胎干细胞株BG02预铺至有层粘连蛋白的培养板上,加入含碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1及ITS的无血清培养基连续培养.主要观察指标:观察BG02细胞在无血清无饲养层培养体系中的形态,采用细胞免疫组化法检测人胚胎干细胞特异性分子标志的表达,检测BG02细胞体外分化能力及其核型,比较BG02细胞在无血清无饲养层和小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系中的生长情况、细胞集落分化率.结果:在无血清无饲养层培养体系中,BG02细胞连续传代20代,细胞呈典型的人胚胎干细胞形态特征;BG02细胞表达SSEA-4,SSEA-3,TRA-1-60,TRA-1-81,Oct-4,但不表达SSEA-1;培养20 d后,BG02细胞进一步分化成3个胚层的细胞,分化细胞能够表达甲胎蛋白、巢蛋白、α-肌动蛋白;培养至20代细胞核型均正常(46XY).与在饲养层培养体系下比较,无血清无饲养层条件下BG02细胞BG02细胞生长速度减慢,细胞倍增时间明显延长(P＜0.05),集落分化率明显升高(P＜0.05).结论:实验初步建立了入胚胎干细胞无血清无饲养层的培养体系,添加碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1和ITS可以维持人胚胎干细胞的自我更新.     

佛司可林两个类似物对饮水导致的人眼压升高的影响

目的实验观察佛司可林两个类似物,即isoforskolin(isoF),deacetylforskolin(deaF),对饮水导致急性人眼压升高的影响.方法按随机双盲法设计,将佛司可林两个类似物配成的滴眼液分别滴人l眼,相应的溶媒滴入另眼.让受试者饮水(14 ml/kg)造成急性人眼压升高.给药前后用气动式眼压计测定眼压值,观察眼压变化.结果表明isoF(0.5%)及deaF(1.0%)均有抑制作用,最大抑制率分别为¨.4%及12.0%,并且副作用小.结论实验证明isoF(0.5%)及deaF(1.0%)抑制饮水导致急性人眼压升高.     

佛司可林类似物激动腺苷酸环化酶及抑制免高眼压探讨

目的：从滇产毛喉鞘蕊花植物中提取到3个佛司可林类似物,即异佛司可林、去酰基佛司可林、1－乙酰基佛司可林,体外测定它们激动腺苷酸环化酶活性,并观察去酰基佛司可林及1－乙酰基佛司可林对水负荷兔高眼压的影响。方法：体外测定激动腺苷酸环化酶活性用蛋白质结合放免法、气动式眼压计察兔眼压。结果：异佛司可林体外激动腺苷酸环化酶活性与佛司可林相当,去酰基佛司林林稍弱,1－乙酰基佛司可林无活性。1％去酰基佛司可林及1－乙酰基佛司可林滴眼液滴兔眼,能抑制水负荷造成的兔高眼压,抑制率最高分别达6.0％及10.9％,作用持续至少3h。结论：研究表明异佛司可林及去酰基佛司可林具有体外激动腺苷酸环化酶活性的作用,而去酰基佛司可林及1－乙酰基佛司可林具有抑制水负荷兔高眼压的作用。     

对192份脐血多个指标的综合评估

采用密闭式脐血采血法收集了１９２份脐血，对脐血的采集量、有核细胞数、经淋巴细胞分离液分离后的单个核细胞的回收率进行了评估用含有多种生长因子的半固体培养基对脐血所含的粒单祖细胞及红系祖细胞进行了检测，并和骨髓的同类祖细胞作了比较．结果，脐血的平均可采集量为９９ｍＬ，每份脐血所含有的有核细胞数为（１３６±４８）×１０８，分离后单个核细胞的回收率为（４２３±１６４）％，脐血的粒单祖细胞及红系祖细胞的集落产率均高于骨髓，差异有显著性，（Ｐ＜００５）．脐血形成的粒单及红系集落体积也较骨髓的同类集落体积大．结果表明脐血比骨髓更富含造血祖细胞     

SpiramineN—6的抗血小板活性研究

采用Ｂｏｒｎ氏比浊法观察了ｓｐｉｒａｍｉｎｅＮ－６在体外和体内对兔血小板聚集功能的影响．应用荧光分光光度法测定其对血小板５－ＨＴ释放反应的作用．结果：ｓｐｉｒａｍｉｎｅＮ－６在体外选择性抑制血小板活化因子（ＰＡＦ）诱导的血小板聚集,并呈量效关系,其ＩＣ５０＝２６μｍｏｌ／Ｌ;２ｍｇ／ｋｇｓｐｉｒａｍｉｎｅＮ－６静注后明显抑制ＰＡＦ和花生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集,最大抑制率于给药后６０,３０ｍｉｎ分别为（５０４±４４）％和（７７３±３３）％（与生理盐水组对照Ｐ＜００５）;ｓｐｉｒａｍｉｎｅＮ－６呈浓度依赖性减少ＰＡＦ和ＡＡ引起血小板５－ＨＴ的释放,其ＩＣ５０分别为３３５ｕｍｏｌ／Ｌ和６４７μｍｏｌ／Ｌ．结果表明ｓｐｉｒａｍｉｎｅＮ－６是一种较强的抗血小板聚集剂．     

两种高脂饲料分段喂养对大鼠体重和血脂的影响

目的 探索两种高脂饲料分段喂养对大鼠体重和血脂的影响.方法 选取30只健康雄性SD大鼠,随机分为2组:对照组和实验组,每组15只.对照组大鼠以基础饲料喂养,实验组大鼠在腹腔注射VD3基础上,分阶段先后给予A和B2种不同的高脂饲料喂养(1～7周给予A种高脂饲料,8～16周给予B种高脂饲料).每周记录各组大鼠体重变化,每2周测定各组大鼠血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)水平变化.结果 对照组大鼠体重持续增加,实验组大鼠前2周体重增加,第3～7周开始持续降低,第8周更换B种高脂饲料后,体重又开始持续增加.两组体重除实验前和第16周差异无统计学意义外,其余时间点差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组大鼠血脂水平在实验期间无明显变化.实验组大鼠血清TC、HDL-C和LDL-C水平先升后降,TC在第6周达到峰值,HDL-C和LDL-C在第4周达到峰值.实验组大鼠血清TG水平在前6周无明显变化,到第8周更换B种高脂饲料后开始缓慢上升,至第16周时,明显高于对照组(P＜0.05).结论 2种高脂饲料分段喂养可加速大鼠动脉粥样硬化模型的建立.