重组质粒pIRESEgr-IFNγ的构建及其在Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达

目的： 构建重组真核表达质粒pIRESEgr-IFNγ并检测其在体外培养的Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达。方法：利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的IFNγ表达质粒,脂质体介导体外转染Lewis肺癌细胞,酶联免疫吸附法（ELISA）检测0、2、5和10 Gy X射线诱导IFNγ表达的量效和时程关系。结果：酶切鉴定证实,Egr-1启动子和IFNγ基因正确插入真核表达载体pIRES1neo;2、5和10 Gy X射线照射转染该重组质粒的Lewis肺癌细胞,上清中IFNγ表达量明显高于假照组（P＜0.001）,其中5 Gy照射后表达量最高,为假照组的4.39倍。5 Gy照射后2、6、12和36 h上清中IFNγ表达量逐渐增加（P＜0.001）,照射后36 h表达量为照射前的6.27倍。结论：成功构建了真核表达质粒pIRESEgr-IFNγ,该质粒具有辐射诱导基因表达增强特性。     

蛋白质定量中干扰因素的配伍组方差分析

目的：探讨总体分析分离菌体蛋白的部分常用试剂对染料结合法和二辛可宁酸法蛋白质定量方法的总体干扰作用。方法：配伍组方差分析法。 结果：含EDTA和葡萄糖的分离试剂对二辛可宁酸蛋白微量定量方法干扰较强（P<0.05）,盐酸胍和尿素无干扰(P>0.05);这些试剂对染料结合法蛋白微量定量方法无干扰(P>0.05)。 结论：试剂对蛋白质定量的干扰作用不应忽视。     

抑郁症患者血清总胆固醇与自杀未遂的meta分析

<正>自杀(Suicide)是近年来医学界日益关注的一个重要的公共卫生问题,并已越来越引起社会的广泛关注,世界卫生组织调查表明,自上世纪60年代以来到2012年,全球自杀率已经上升了60%[1],且新增部分主要位于发展中国家(developing country),而在中国,自杀已经成为第五大主要死亡原因[2]。抑郁症(Depression)是导致自杀的重要精神障碍性疾病之一,近年来国内外进行了一些血清总胆固醇     

某金矿企业职业健康检查结果分析

目的 了解某金矿作业矿工的健康状况,为改善金矿工人健康水平以及有针对性地制定有效保障金矿作业矿工健康的防治措施提供科学依据.方法 收集某金矿577名矿工职业健康体检数据,对体检结果进行分析与评价.结果 高血压检出率为41.9％(242/577),高血糖检出率为12.8％(74/577),心率异常检出率为24.6％(12...     

表皮细胞培养及干细胞移植在烧伤治疗中的应用进展

皮肤是维持内环境稳定和阻止微生物、化学物质等侵入的屏障。烧伤特别是大面积深度烧伤会引发许多局部与全身各系统的变化,易引起感染,不利于创面的修复,并易留瘢痕,如果裸露的创面过大,细菌极易入侵繁殖,可引起水电解质紊乱、贫血、高热、败血症等。1皮肤组织工程1.1表皮细胞自1975年体外表皮细胞培养方法建立后,皮肤组织工程学发展迅速[1]。Rheinwald和Green将皮肤切碎用胰酶消化、分离,置于胎牛血清、胰岛素、表皮细胞生长因子(ep idermalgrowthfactor,EGF)组成的培养液中培养,其特点是用小鼠3T3细胞作培养层。1981年,培养的人自体表…     

几种肾脏疾病中抗β2 GPI抗体的检测

目的　探讨抗 β2 GPI抗体 (aβ2 GPI)与几种肾脏疾病的相关性。方法　选择 6 9例肾脏病患者及 4 0例正常对照 ,用ELISA进行aβ2 GPI及抗心磷脂抗体 (ACA)检测。结果　肾脏疾病患者aβ2 GPI和ACA阳性率均高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,肾脏病患者中aβ2 GPI和ACA呈正相关性 (r=0 .6 89,P <0 .0 5 )。结论　aβ2 GPI和ACA很可能针对同一种抗原 ,而且与慢性肾炎、肾病综合征、狼疮性肾炎等肾脏疾病有相关性 ,推测aβ2 GPI可能在肾脏病患者高凝状态的形成中起重要作用。     

电离辐射对成纤维细胞中透明质酸蛋白及透明质酸酶1mRNA表达水平的影响

目的:观察电离辐射对成纤维细胞中透明质酸（HA）蛋白及透明质酸酶1（HAase1） mRNA表达水平的影响,并探讨其在放射性臂丛神经损伤发病机制中的作用。方法: 成纤维细胞分别采用0.5、1.0、2.0、4.0和6.0 Gy X射线照射,作为 5个剂量组,同时设假照射对照组（0 Gy）。透射电镜观察0、2.0、4.0和6.0 Gy X射线照射后48 h成纤维细胞的形态变化。采用ELISA法和RT-PCR法检测0、0.5、1.0、2.0、4.0、和6.0 Gy X射线照射后24及48 h成纤维细胞中HA蛋白及HAase1 mRNA表达水平的变化。结果：2.0 Gy X射线照射后48 h细胞染色质凝聚,有空泡形成;4.0 Gy X射线照射后48 h细胞核凹陷、染色质断裂;6.0 Gy X射线照射后细胞核凹陷、染色质固缩、出现空泡,部分胞浆溶解。不同剂量X射线照射后24 h HA蛋白表达均明显增高,与0 Gy组比较差异有统计学意义(P<0.05);0.5～2.0 Gy X射线照射后48 h HA蛋白表达变化不明显,4.0和6.0 Gy组与 0 Gy组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。0～6.0 Gy X射线照射后24 h HAase1 mRNA水平明显增高,与0 Gy组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。1.0、4.0和6.0 Gy X射线照射后48 h HAase1 mRNA水平明显增高,与0 Gy组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：电离辐射可诱导人成纤维细胞中HA蛋白表达和HAase1 mRNA水平增高,可能对放射性臂丛神经损伤的发生发展起到一定的作用。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对卵巢癌SKOV3细胞的化疗增敏作用

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACIs）辛二酰苯胺异羟肟酸（SAHA）联合长春新碱（VCR）对卵巢癌SKOV3细胞的生物学作用,并阐明其作用机制。方法：选择人卵巢癌SKOV3细胞,分为对照组、SAHA组、VCR组和SAHA+VCR组。CCK-8法检测各组SKOV3细胞生存率,流式细胞术（FCM）检测各组细胞凋亡率、自噬率和细胞周期分布情况。结果：CCK-8检测,与对照组比较,SAHA组和VCR组SKOV3细胞生存率明显降低;与SAHA或VCR组比较,SAHA+VCR组SKOV3细胞生存率明显降低（P<0.05）。FCM检测,与对照组比较,SAHA和VCR组SKOV3细胞凋亡率、自噬率及G₂/M期细胞百分率升高（P<0.05）;与SAHA或VCR组比较,SAHA+VCR组SKOV3细胞凋亡率、自噬率及G₂/M期百分率升高（P<0.05）。结论：SAHA可增强卵巢癌SKOV3细胞对VCR的敏感性,能够诱导SKOV3细胞凋亡与自噬,并促进G₂/M期阻滞;SAHA和化疗药物联合应用可能是治疗卵巢癌的新策略。     

亚砷酸钠对上皮细胞向间充质细胞转变过程的影响

目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)对上皮细胞向间质细胞的转变(epithelial to mesenchymal transition,EMT)过程的影响。方法①EMT模型的建立:培养小鼠乳腺上皮细胞(NMuMG),当细胞大约融合50%时,换成3%血清的培养基,24h后加入5ng/ml TGF-β,作用24 h后,观察NMuMG形态,细胞染色检测E-ca、Vimentin表达、实时定量RT-PCR检测E-ca,Vimentin mRNAs表达水平,是否成功的由上皮细胞转变成间质细胞。②加入NaAsO2:以5 ng/ml TGF-β作为阴性对照组,观察组5ng/ml TGF-β+5μmol/ml NaAsO2、5ng/ml TGF-β+10μmol/ml NaAsO2,再次检测上述指标。结果①成功建立EMT模型:细胞形态由立方形的上皮细胞转变成长梭形间质细胞;细胞染色显示,与未诱导组相比,E-ca表达呈阴性,Vim-entin表达明显呈阳性;E-ca基因表达水平显著下降,Vimentin基因表达水平显著上调。②NaAsO2对EMT过程的影响:一定浓度范围内,随NaAsO2浓度升高,明显增强了Vimentin表达;...     

电离辐射对成骨细胞核因子κB受体活化因子配体和骨保护素mRNA及其蛋白表达的影响

目的 研究电离辐射对成骨细胞RANKL和OPG表达的影响,探讨辐射导致骨损伤的分子机制。方法 采用MC3T3-E1细胞诱导分化为成骨细胞,经0、2和4 Gy¹³⁷Cs γ射线照射后,采用实时定量PCR及Western blot方法检测电离辐射对于成骨细胞RANKL和OPG mRNA及其蛋白水平表达的影响。结果 4 Gy照射可以导致成骨细胞RANKL mRNA(t=5.41,P<0.05)及其蛋白(t=68.37,P<0.01)表达水平上调;2和4 Gy照射可以导致成骨细胞OPG mRNA(t=5.20、7.02,P<0.05)及其蛋白(t=7.78、9.45,P<0.05)表达水平下调。结论 2和4 Gy电离辐射可以导致成骨细胞中RANKL/RANK/OPG通路发生改变,促进破骨细胞的分化和成熟,进而促进破骨细胞的骨吸收作用。