HPLC法同时测定异烟肼片中异烟肼及杂质异烟酸的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定异烟肼片中异烟肼及杂质异烟酸含量的方法。方法:色谱柱为SHIM-PACKVP-ODSC18,流动相为甲醇-水(含0.2%多库酯钠,40∶60),检测波长为261nm,流速为0.8mL·min-1,进样量为5μL。结果:异烟酸与异烟肼色谱峰达到有效分离,异烟肼、异烟酸检测浓度的线性范围分别为10～1000(r=0.9998)、2～24μg·mL-1(r=0.9994),平均加样回收率分别为99.57%、98.96%,RSD分别为0.26%、0.96%,定量限分别为0.05、0.16μg·mL-1。结论:本方法操作简便、快速、准确,可用于该制剂的含量测定。     

Inhibition of autophagy enhances cisplatin cytotoxicity through endoplasmic reticulum stress in human cervical cancer cells

The function of autophagy in cisplatin-treated cancer cells is not fully understood. Cisplatin treatment induced degradation of ubiquitinated proteins by autophagy, which reduced apoptosis induced by endoplasmic reticulum (ER) stress and downregulated the mitochondrial pathway of apoptosis. Inhibition of autophagy using 3-methyladenine (3-MA) or chloroquine (CQ) increased the levels of intracellular misfolded proteins, which enhanced cellular apoptosis. We found that tunicamycin, an ER stress inducer, augmented cisplatin cytotoxicity by upregulating ER stress-mediated apoptosis. Our data indicates that autophagy plays an important role in preventing cisplatin-induced apoptosis in HeLa cells, thus inhibition of autophagy may improve cisplatin chemotherapy.     

中药材龟甲细胞色素b基因特异性鉴定研究

 目的 建立一种实用、简便、准确的中药材龟甲DNA分子标记鉴定方法。方法 采用酚-三氯甲烷抽提法和盐析法提取龟甲mtDNA。从GenBank数据库中下载乌龟及常见伪品源动物mtDNA细胞色素b基因序列,经序列比较分析,设计特异性引物,并使用该引物对正品及其伪品mtDNA进行扩增并测序。结果 盐析法提取DNA的浓度高于酚-三氯甲烷抽提法,并且盐析法省时、经济。本实验所设计引物只能扩增正品龟甲mtDNA,测序结果与龟甲同源性100%。结论 盐析法是一套适合从龟甲中提取高质量DNA的方法,本实验所设计的引物具有高度特异性,可用于龟甲类药材的鉴定。     

吉林地区汉族人群4个Y-STR基因座的遗传多态性调查

目的调查吉林地区汉族人群4个Y染色体短串联重复序列（Y-STR）基因座的遗传多态性。方法利用PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对吉林地区汉族群体无关男性血样进行4个Y-STR基因座的分型。结果4个Y-STR基因座在吉林地区汉族群体分别发现4～5个等位基因,GD值最低为0.645 1（DYS389I）,最高为0.716 7（DYS19）。结论4个Y-STR基因座在吉林地区汉族群体均具有较高的遗传多态性,可应用于法医学个体识别和亲子鉴定。     

CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞及其亚型在结直肠癌组织中分布和临床意义的研究

目的:探讨CD4~+Cff25~+FOXP3~+调节性T细胞(Treg)及其亚型在结直肠癌组织(colorectal carcinoma,CRC)的分布和临床病理特征的关系.方法:收集42例CRC新鲜手术标本,应用冰冻切片、免疫组织化学SP法检测肿瘤组织和癌旁组织中FOXP3~+阳性细胞数,分析其与临床病理特征的相关性;应用双重免疫组化检测FOXP3和ICOS表达,分析FOXP3~+ICOS~+Treg和FOXP3~+ICOS-Treg两种细胞亚型分布情况.结果:CRC患者肿瘤组织中FOXP3分布显著多于癌旁组织,差异显著(P＜0.001);中低分化组Treg细胞数明显高于高分化组(P＜0.01);淋巴结转移组Treg细胞数明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05);无远处转移组Treg细胞数明显高于有远处转移组(P＜0.05);FOXP3+ICOS+Treg细胞亚群在CRC组织中高表达,与癌旁组织相比差异显著(P＜0.01).结论:CRC的发生发展与其癌组织局部微环境中Treg数量变化相关,Treg在CRC组织过量表达可能是导致肿瘤免疫逃逸的重要因素之一;抑制CRC微环境中浸润性Treg细胞功能可提高肿瘤局部免疫治疗效果.     

结节性甲状腺肿与甲状腺癌关系的探讨

目的探讨结节性甲状腺肿与甲状腺癌的关系。方法对247例结节性甲状腺肿与51例甲状腺癌的病变特征及癌前病变进行观察和分析。结果结节性甲状腺肿伴有癌变为0．81％（2／247）。甲状腺癌周围组织伴有结节性甲状腺肿病变为78．43％（40／51）。结论结节性甲状腺肿是甲状腺癌的癌前病变,其发病过程可引起癌变,积极防治结节性甲状腺肿会降低甲状腺癌的发病率。     

参果消渴胶囊对糖尿病家兔的降血糖作用研究

目的观察参果消渴胶囊对高血糖日本大耳白家兔血糖、体重、血液生化指标、血常规、血液流变学、胰岛素浓度的影响。方法将日本大耳白家兔用四氧嘧啶造高血糖动物模型,随机分为模型组,消渴丸组,参果消渴胶囊大、中、小剂量(0.26、0.13和0.06g/kg,分别相当于成人临床等效用量的8、4、2倍)组。每日口服给药1次,连续给药4周,每周测血糖、体重。于给药第4周后,取血测血常规、血液生化指标、血液流变学和胰岛素水平,并取胰腺进行病理组织学检查。结果参果消渴胶囊大、中剂量可使高血糖家兔血糖水平下降,与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论参果消渴胶囊大、中剂量可使高血糖日本大耳白家兔的血糖水平下降。     

抗坏血酸体外诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化

目的:探讨抗坏血酸作为诱导剂对小鼠胚胎干细胞(mESC)分化为心肌细胞的影响,建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的实验方法。方法:采用直接悬浮培养法使mESC形成拟胚体(EBs),用含不同浓度抗坏血酸的分化培养基对其进行诱导分化,摸索最佳的诱导分化条件。结果:抗坏血酸诱导mESC分化为心肌细胞的最佳浓度为0.1mg/ml,约为70%的EBs出现跳动的心肌合胞体,显著高于不添加任何诱导剂的对照组。抗坏血酸诱导产生的心肌细胞表达多种心肌蛋白,具有心肌细胞的结构特征。结论:抗坏血酸能够促进mESC向心肌细胞分化,应用抗坏血酸体外诱导mESC向心肌细胞分化是一种较为理想的体外诱导方法。     

柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度和细胞内VCR蓄积的影响

目的:测定中药柴胡(BupleurumChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)和长春新碱(Vincristine,VCR)浓度的影响,探索柴胡提取物逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制。方法:以Fura2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别测定不同条件下的BEL7402细胞内[Ca2 ]i。高效液相色谱法测定BCDC作用于BEL-7402后细胞内VCR蓄积情况的变化。结果:柴胡提取物可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降(P<0.001),可使细胞内VCR浓度升高(P<0.01)。结论:柴胡提取物可以增加VCR在BEL7402细胞内的积聚浓度,部分逆转BEL7402细胞的多药耐药(multidrugresistance,MDR)。钙离子通道阻滞作用可能为柴胡提取物逆转BEL7402细胞多药耐药的机制之一。     

大鼠在运动性学习记忆时小脑IL-1β含量和IL-1β免疫阳性细胞的变化

目的观察大鼠在运动性学习记忆时小脑IL-1β含量和IL-1β免疫阳性细胞的变化，探讨IL-1β与运动性学习记忆的关系。方法40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型7d组、模型14d组、模型21d组，用水迷宫建立运动性学习记忆模型，采用双抗体夹心ELISA法测定IL-1β含量和用免疫组化方法和图像分析技术，检测IL-1β免疫反应阳性细胞在小脑表达的变化。结果模型组大鼠小脑IL-1β含量和免疫反应阳性细胞数量比对照组显著增加（P〈0．05）。结论IL-1β参与了运动性学习记忆的过程，并与运动性学习记忆的巩固有关。