武警基层部队卫生士官药学技能培训模式探索

我教研室自2010年开始承担武警部队卫生士官培训《常用药物》的授课任务,卫生士官全部培训时间只有3个月,其中《常用药物》仅为20学时,因此如何提高卫生士官的培训效率是我们急需解决的难题。为此我教研室以贴近部队需求,培养综合素质高、应用能力强的新型卫生士官人才为目的,在教材编写、授课内容、     

鬼臼毒素衍生物NY-3诱导HeLa细胞凋亡及其机制探究

【目的】研究鬼臼毒素衍生物NY-3对人宫颈癌HeLa细胞的抗肿瘤活性并探讨其机制。【方法】MTT法检测NY-3及阳性对照药物VP-16（依托泊苷）对HeLa细胞体外增殖的抑制作用及对其生长曲线的影响;Hoechst 33342/PI双染、琼脂糖凝胶电泳技术和流式细胞术等方法进行细胞凋亡检测;RT-PCR检测NY-3对HeLa细胞凋亡相关基因表达的影响;动物移植肿瘤模型研究NY-3体内抗肿瘤作用。【结果】NY-3在体外对HeLa细胞具有明显的抑制作用,IC50值为（2.73±1.28）μmol/L,优于VP-16,其诱导细胞产生凋亡小体并呈现典型的＂DNA ladder＂,流式细胞术检测出细胞被阻断在G2/M期,发现NY-3可以上调HeLa细胞Bax/Bcl-2比值及Caspase-3 mRNA表达水平,小鼠体内抗肿瘤研究NY-3在肿瘤抑制率、动物存活率等方面均优于阳性药物VP-16。【结论】NY-3在体外及体内实验表现均优于成熟阳性药物VP-16,其可能通过影响Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关基因表达诱导HeLa细胞凋亡。     

pCMV6-Entryp62真核表达质粒构建及高表达稳定细胞系的建立

【目的】构建pCMV6-Entryp62真核表达质粒,并将其转染至人乳腺癌细胞株MCF-7中,通过抗生素筛选构建高表达p62的稳定细胞系。【方法】以293ET细胞cDNA为模板,设计引物扩增p62基因片段,双酶切扩增出的目的基因片段及pCMV6-Entry Vector空载体,将酶切后的片段进行连接,转化构建质粒,酶切及测序验证;将构建好的质粒转染入MCF-7细胞株中,G418筛选稳定表达细胞株,并用实时定量PCR和Western blotting进行验证。【结果】酶切及测序结果证实成功构建pCMV6-Entry p62真核表达质粒;实时定量PCR结果显示,与对照组相比,转染p62的MCF-7稳定细胞中p62mRNA的表达显著升高;Western blotting检测Flag及p62蛋白表达显示,在转染p62的MCF-7稳定细胞检在62kd位置测到Flag阳性条带,对照组则没有阳性条带。在转染p62的MCF-7稳定细胞中p62蛋白的表达较对照组显著升高。【结论】成功构建了pCMV6-Entryp62真核表达质粒,并成功建立高表达p62的MCF-7稳定细胞系。     

医学院校健康教育教学中开展医学人文教育的探索

随着人类社会的发展和新医学模式的转变,人的社会属性越来越被医学工作者重视。西方文化认为医学是人学,医疗技术仅是为人服务的工具,因此医学应彰显人性,体现人本立场。美国学者佩里格利诺指出：“医学是居于科学与人文之间,并非二者中任何一方,而是包含双方的许多特性。”我国中医理论更是体现以人为本理念,将人作为医疗服务主体,通过激发人体自身机能以达到治疗疾病目的。     

葡萄籽提取物与柳氮磺吡啶联合用药对实验性溃疡性结肠炎的作用

目的 研究葡萄籽提取物（GSPE）与柳氮磺吡啶（SASP）联合用药治疗葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎的效果及作用机制。方法 将SPF级C57小鼠随机分为对照组、模型组、GSPE （250 mg/kg）组、SASP （250 mg/kg）组、联合用药（SASP 250 mg/kg+SASP 250 mg/kg）组,对照组给予正常饮用水,其他组均自由饮用3% DSS水溶液,连续饮用7 d,诱发小鼠溃疡性结肠炎模型;造模第1天同步开始ig给药,每天记录小鼠体质量、便血、便型等症状变化;7 d后断头取血,收集结肠和脾脏,记录结肠长度、脾脏质量变化情况。HE染色评估小鼠结肠黏膜组织病理变化,ELISA法检测血清和结肠组织中炎症因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6和NO的表达变化以及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）细胞因子的含量变化,免疫组化分析结肠组织上皮细胞中NF-κB-p65、Nrf2、HO-1和Keap-1含量的变化。应用金氏Q值法分析联合用药的作用效果。结果 与模型组比较,各给药组的小鼠体质量下降幅度显著降低（P<0.01）,小鼠腹泻、便血症状改善明显,其中联合用药组小鼠体质量较单独给药组下降更缓,小鼠腹泻、便血程度改善更明显（P<0.05）。各给药组小鼠血清及结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、MDA含量较模型组显著降低,SOD含量则显著升高（P<0.01）;病理组织切片分析发现,各给药组小鼠结肠黏膜病理损伤较模型组显著减轻,其中联合用药组小鼠结肠黏膜病理损伤较单独给药组降低更为显著（P<0.05）。免疫组化分析结果也显示,各给药组小鼠的NF-κB-p65、Keap-1蛋白表达与模型组比较显著下调（P<0.01）,Nrf2、HO-1蛋白表达显著上调（P<0.01）。联合给药组与单独给药组比较,NF-κB-p65、Keap-1蛋白表达显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高（P<0.05）。金氏Q值法评价两药合用后对IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、MDA、NF-κB-p65、Keap-1的作用效果均大于1.15,说明GSPE与SASP具有协同作用。结论 GSPE与SASP联合用药治疗实验性溃疡性结肠炎效果优于单独给药,联合用药增强GSPE和SASP的抗氧化和抗炎作用,GSPE与SASP配伍治疗溃疡性结肠炎可进一步发挥协同增效的作用。     

有氧运动抑制自发性高血压大鼠肾脏纤维化

目的 探讨有氧运动对自发性高血压大鼠（SHR）肾脏纤维化的作用并探讨其可能生物学机制。方法 30只雄性SHR随机分为安静对照组（SHR-C）和有氧运动组（SHR-AE）,同时将15只Wistar-Kyoto大鼠作为正常血压组（WKY）。SHR-AE组大鼠进行为期8周的跑台运动（60min/d、5次/周）,SHR-C和WKY组在鼠笼内安静饲养。实验后利用无创血压测量仪测定尾动脉血压;分离肾脏,利用Masson染色进行组织病理学观察并获取胶原容积分数（CVF）,Western blot法检测白细胞介素-6（IL-6）、转化生长因子β（TGF-β）、结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达量。利用SPSS 20.0统计软件并采用单因素方差分析进行组间比较。结果 各组血压（收缩压:F＝152.174,P<0.001;舒张压:F＝96.903,P<0.001）、CVF（F＝68.861,P<0.001）、IL-6（F＝71.439,P<0.001）、TGF-β（F＝57.839,P<0.001）和CTGF（F＝41.936,P<0.001）总体比较差异有统计学意义。多重比较显示:与WKY组比较,SHR-C组大鼠血压和CVF升高（均P<0.001）,IL-6、TGF-β和CTGF蛋白表达量上调（均P<0.001）;与SHR-C组比较,SHR-AE组收缩压和CVF降低（均P<0.001）,IL-6、TGF-β和CTGF蛋白表达量下调（均P<0.001）。结论 规律有氧运动能够改善SHR肾脏纤维化,其机制与减轻炎症反应以及抑制促纤维化信号途径活性有关。     

姜黄素衍生物对脂多糖诱导急性肺损伤的防护作用研究

对姜黄素衍生物是否可治疗脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）进行研究,为研究姜黄素衍生物的作用机制及临床应用提供参考。方法小鼠腹腔注射LPS复制ALI模型,昆明小鼠90只,随机分为6组,分别为正常组、模型组、姜黄素组,以及姜黄素衍生物低、中、高剂量组（50、100 和200 mg/kg）。预先7 d 给予小鼠灌胃治疗,第7 天小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS。分别于6 h、1 d和3 d 取材,检测血中中性粒细胞和单核细胞的比例变化。酶联免疫吸附试验检测小鼠肺组织中炎症因子白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量;丙二醛、髓过氧化物酶及谷胱甘肽试剂盒检测小鼠肺组织中氧化物质的含量。肺组织苏木精- 伊红染色法（HE）染色观察肺组织病理改变。结果姜黄素衍生物可减少小鼠血中炎症细胞数,降低小鼠肺组织中炎症因子。肺组织HE染色结果显示,模型组肺组织切片炎症细胞增多,肺泡壁增厚,肺泡结构破坏,而姜黄素衍生物各剂量组与模型组比较,差异有统计学意义（p <0.05）。结论姜黄素衍生物对内毒素诱导的ALI有一定的保护作用。     

肌钙蛋白T基因单核苷酸多态性与运动性横纹肌溶解症的关联研究

 目的：分析慢肌型肌钙蛋白T（sTnT）基因第7内含子C7761T位点与快肌型肌钙蛋白T（fTnT）基因第8内含子T7955C位点单核苷酸多态性与大强度训练后血清肌酸激酶（CK）活性之间的关系,探索运动性横纹肌溶解症（ERM）的可能遗传机制。方法：85名武警战士进行一次大强度负重训练造成亚临床ERM,检测血清CK活性的时程变化;PCR-RFLP法测定sTnT（C7761T）和fTnT（T7955C）基因多态性;分析基因多态性与安静CK（CK rest）、峰值CK（CK peak）以及CK最大变化值（ΔCK max）之间的关系。结果：sTnT和fTnT基因型分布频率均符合哈-温平衡定律。sTnT基因：C/T和C/C基因型组CK rest均高于T/T基因型组（均P<0.01）,CK peak和ΔCK max在各组间无显著差异（均P>0.05）,（T/T+C/T）组CK rest低于CC基因型组（P<0.05）。fTnT基因：T/C基因型组和C/C基因型组CK rest均低于T/T基因型组（分别为P<0.05和P<0.01）,C/C基因型组CK peak和ΔCK max均低于T/T基因型组和T/C基因型组（均P<0.01）,（T/T+T/C）组CK peak和ΔCK max均高于C/C基因型组（均P<0.01）。结论：fTnT基因第8内含子T7955C位点单核苷酸多态性可作为ERM易感性的分子遗传学标记,T等位基因携带者是患ERM的高危人群。     

复方甘草软胶囊的处方与工艺研究

目的:优选复方甘草软胶囊内容物的处方及工艺。方法:采用单因素筛选方法和正交试验L9（34）法,以内容物沉降体积比和再分散性为考察指标,确定复方甘草软胶囊处方及制备工艺。结果:以PEG400为分散介质,药材冻干粉粉末过120目筛,助悬剂选择蜂蜡,润湿剂选择大豆卵磷脂;药粉与聚乙二醇400用量比为1:1.25,蜂蜡用量为2%,大豆卵磷脂用量为0.4%时,制得的内容物混悬液最为稳定。结论:该方法制得的软胶囊内容物均匀、稳定、流动性好。