Mxi1基因敲除小鼠遗传背景的转换研究

目的 对FVB/N品系Mxi1基因敲除(knock out,KO)(Mxi1-/-)小鼠进行遗传背景转换,为研究疾病发病机制提供更多种类的基因修饰小鼠.方法 将FVB/N品系杂合子小鼠(Mxi1+/-)与异性C57BL/6品系野生型(wild type,WT)小鼠(Mxi1+/+)杂交,获得杂合子F1代后将其与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,再选择F2杂合子与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,依此再回交8次后,子代互交.利用鼠尾DNA进行基因型鉴定及微卫星DNA(msDNA)检测,组织信使RNA(mRNA)和组织蛋白检测背景转换效率.结果 基因型鉴定为Mxi1-/-的互交子代小鼠msDNA检测结果与WT型C57BL/6小鼠一致,与FVB/N小鼠不同.PCR和Western印迹结果显示,随机选取的任意自交子代纯合子小鼠体内不表达Mxi1的mRNA和蛋白质,成功获得C57BL/6品系Mxi1-/-小鼠.结论 通过杂交-回交的方式成功获得的新品系Mxi1-/-小鼠能稳定地将突变基因传递给子代.这一成果为疾病动物模型的建立提供了更多的选择.     

PI3K/Akt信号通路在大鼠过度训练致急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应

目的:探讨PI3K/Akt信号通路在过度训练致急性肾损伤中的变化和作用,以及山莨菪碱是否通过PI3K/Akt信号通路起到肾脏保护作用。方法:将60只大鼠随机分为四组:正常对照组(NC)、过度训练组(OT)、过度训练+山莨菪碱组(OTA)、过度训练+渥曼青霉素组(OTW)。除NC组外,其余各组分为建模后即刻、6 h和24 h三个亚组。通过一次性游泳力竭运动建立过度训练模型。OTW和OTA组于建模前20分钟分别腹腔注射渥曼青霉素25μl/kg和山莨菪碱10 mg/kg。于相应时点检测血肌酐、尿素、肌酸激酶水平;Western blot法检测肾组织Akt、p-Akt、Nrf2表达;TUNEL法检测肾脏细胞凋亡。结果:与NC组相比,OT组出现肾功能损伤和细胞凋亡,p-Akt、Nrf2表达上调(P0.05)。与OT组相比,OTA组部分时点肾功能改善,细胞凋亡减少,p-Akt、Nrf2表达进一步上调(P0.05)。OTW组总体表现与OTA组相反(P0.05)。各组间Akt表达无明显差异。结论:在过度训练致急性肾损伤中,PI3K/Akt通路激活增多,进而减少过氧化反应,改善肾功能,抑制细胞凋亡。山莨菪碱可通过该通路发挥肾脏保护作用。     

综合康复训练对老年性痴呆患者认知功能和日常生活能力的影响

<正>老年性痴呆又称阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD),是一种中枢神经变性疾病,起病隐匿,主要表现为渐进性记忆障碍、认知功能障碍、人格改变及语言障碍等神经精神症状,并影响甚至丧失正常的社会生活能力。随着我国人口的老龄化,AD患病率逐年上升,已成为威胁老年人身心健康的重要疾病之一。由于AD的病因和发病机制还未能完全明确,未能在治疗上取得突破性进展,目     

老年肾病综合征的特点与诊治

肾病综合征(NS)是一组以大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症及水肿为主要特征的临床综合征。包括原发性和继发性两大类。老年NS临床症状常不典型,疾病谱与年轻人不同,继发性NS发病率高,诊断过程中首先应排查继发性因素。继发性因素中以糖尿病肾病、淀粉样变性、肿瘤相关性NS最多见,原发性因素中膜性肾病最常见。此外老年NS患者的感染、血栓、急性肾损伤等并发症发病率高,治疗难度大,临床缓解时间长,激素及免疫抑制剂的应用需根据病情全面权衡利弊,制定个体化的诊疗方案。     

干细胞与糖尿病肾病

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的发病率迅速增加,最新流行病学调查显示目前我国糖尿病的患病率为9.7%[1],而糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常见的慢性微血管并发症,据WHO预计,2030年全球糖尿病患者将达3.7     

慢性肾脏病对心血管系统的影响

慢性肾脏病(CKD)患者是心血管疾病(CVD)的高危人群,CVD已成为CKD患者死亡的主要病因,有效干预CKD多重CVD的危险因素,有助于控制CKD患者CVD的发生和发展。     

过度训练可部分通过上调TLR4的表达激活死亡受体凋亡通路诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的：观察过度训练大鼠肾组织TLR4、Fas及Caspase-8表达的变化,探讨TLR4在死亡受体凋亡通路中的作用。方法：将48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（CN）、力竭运动组（ES）、山莨菪碱干预组（AD）。CN组为安静对照;ES组又根据力竭后恢复时间分为力竭后即刻（ESI）、力竭后6 h（ES 6 h）和力竭后24 h（ES 24 h）;AD组于力竭运动前20 min腹腔注射山莨菪碱10 mg/kg后进行力竭运动,分为AD 6 h和AD 24 h组。采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型。采用Western印记测定肾组织TLR4和Fas的表达,免疫组织化学法检测肾组织Caspase-8的表达,并分别对TLR4与Fas、Caspase-8、肾组织细胞凋亡率进行相关性分析。结果：Western印记测定结果显示,过度训练大鼠肾组织TLR4及Fas的表达于力竭后即刻、6 h及24 h逐渐增高,均显著高于对照组（P〈0.05）。免疫组化显示,过度训练大鼠肾组织Caspase-8的表达于力竭后即刻、6 h及24 h逐渐增强,均显著高于对照组（P〈0.05）。过度训练大鼠肾组织TLR4与Fas、Caspase-8和细胞凋亡率的表达均呈正相关性（r=0.848,P〈0.05;r=0.916,P〈0.05;r=0.95,P〈0.05）。用山莨菪碱干预后,过度训练引起的肾组织TLR4、Fas及Caspase-8的过度表达均被显著抑制（均P〈0.05）。结论：过度训练可通过上调TLR4强化死亡受体凋亡通路,进而诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡。     

高糖减弱肾组织干细胞条件培养液对缺氧损伤肾小管上皮细胞的修复作用

目的： 评估高糖对肾组织干细胞（kidney stem cells,KSC）条件培养液修复缺氧损伤肾小管上皮细胞（renal tubular epithelium cells,RTEC）作用的影响。方法： 分离肾乳头处的KSC,分别用正常糖浓度（简称“正糖”,5.6 mmol/L）和高糖（30 mmol/L）培养基对KSC进行预处理后制备KSC条件培养液。建立大鼠RTEC缺氧/复氧模型,比较高糖与正糖刺激后KSC条件培养液对缺氧/复氧RTEC修复作用的差异。结果： （1）缺氧4 h/复氧2 h为RTEC缺氧/复氧模型的最佳时间。（2）缺氧后,RTEC早期凋亡率和晚期凋亡率均升高,采用KSC条件培养液干预12 h和24 h后,与缺氧/复氧对照组相比,正糖缺氧/复氧组和高糖缺氧/复氧组RTEC的凋亡率均明显降低（P<0.01）。正糖组和高糖组比较,干预24 h后,正糖组RTEC的总体凋亡率显著低于高糖组（P=0.02）。（3）缺氧后,RTEC上清液的乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平明显升高（P<0.01）,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）水平明显降低（P<0.01）。采用KSC条件培养液干预12 h和24 h后,与缺氧/复氧对照组相比,正糖缺氧/复氧组和高糖缺氧/复氧组的LDH和MDA水平均显著降低（P<0.01）,SOD水平均显著升高（P<0.01）。正糖组和高糖组比较,高糖组的LDH和MDA水平要显著高于正糖组（P<0.05）,SOD水平要显著低于正糖组（P<0.01）。结论： KSC条件培养液对缺氧损伤的RTEC有修复作用,这种作用主要是通过减少氧化应激、抑制细胞凋亡来实现的,而经高糖预处理的KSC条件培养液的抗氧化应激、抗凋亡作用减弱。